近年來，按照藥品進(jìn)行研發(fā)并申報(bào)臨床試驗(yàn)的細(xì)胞治療產(chǎn)品大量涌現(xiàn)。細(xì)胞治療產(chǎn)品來源多樣，生物學(xué)特性復(fù)雜，對(duì)生產(chǎn)過程要求高，其研發(fā)技術(shù)與評(píng)價(jià)體系仍處于不斷發(fā)展階段。國(guó)家藥品監(jiān)督管理局于2017年發(fā)布了《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》及相關(guān)問題解讀，在該指導(dǎo)原則及問題解讀的基礎(chǔ)上，藥品審評(píng)中心結(jié)合近期細(xì)胞治療產(chǎn)品IND申報(bào)資料審評(píng)和溝通交流過程中出現(xiàn)的共性問題，提出以下建議供申請(qǐng)人參考。

由于細(xì)胞治療產(chǎn)品技術(shù)發(fā)展迅速，隨著相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)的進(jìn)步和審評(píng)認(rèn)知的積累，對(duì)該類產(chǎn)品的技術(shù)要求也將會(huì)不斷更新、充實(shí)和完善。

1、細(xì)胞治療產(chǎn)品臨床試驗(yàn)用樣品的生產(chǎn)環(huán)境是什么要求？如何進(jìn)行過程控制？

答復(fù)：人體臨床試驗(yàn)用病毒、細(xì)胞均需在符合藥品GMP條件下生產(chǎn)。生產(chǎn)中使用的質(zhì)粒視具體使用情況具體分析，如果質(zhì)粒是直接用于人體細(xì)胞體外基因編輯操作的載體，建議在GMP條件下生產(chǎn)。請(qǐng)申請(qǐng)人結(jié)合國(guó)內(nèi)現(xiàn)行GMP的要求，同時(shí)可參考國(guó)外針對(duì)細(xì)胞治療產(chǎn)品的GMP要求來進(jìn)行生產(chǎn)過程的控制。細(xì)胞治療產(chǎn)品無法耐受病毒滅活工藝的操作處置，也無法進(jìn)行終端滅菌或除菌過濾，因此對(duì)于這類產(chǎn)品的生產(chǎn)過程控制尤為重要。生產(chǎn)過程中應(yīng)在適當(dāng)?shù)纳a(chǎn)環(huán)節(jié)，設(shè)立生產(chǎn)過程控制的檢測(cè)項(xiàng)目和驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，以確保產(chǎn)品生產(chǎn)過程得到監(jiān)控，并且保證不同批次間質(zhì)量控制的一致性。另外，還應(yīng)結(jié)合生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)設(shè)備、操作與管理規(guī)范等，制定防控不同批次產(chǎn)品的混淆、污染及交叉污染的措施，并確保生產(chǎn)全過程（包括從組織/細(xì)胞采集過程、生產(chǎn)、運(yùn)輸?shù)脚R床應(yīng)用整個(gè)過程）的可追溯性。

2、細(xì)胞治療產(chǎn)品細(xì)胞培養(yǎng)過程中是否可以使用動(dòng)物血清或人血清？

答復(fù)：細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)過程中，應(yīng)盡量避免使用動(dòng)物和人來源的血清，如必須使用，申請(qǐng)人應(yīng)提供充分的研究資料，說明在細(xì)胞培養(yǎng)過程中使用血清的必要性。在確需使用血清的前體下，還需提供所使用的血清種類的選擇依據(jù)、使用量的合理性、明確血清的來源和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，建立質(zhì)量控制體系、對(duì)殘留量進(jìn)行檢測(cè)并開展安全性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。同時(shí)，技術(shù)審評(píng)過程也會(huì)結(jié)合產(chǎn)品臨床應(yīng)用的價(jià)值進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)與獲益的整體評(píng)估。建議參照《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》解讀文件中血清安全性驗(yàn)證的要求。鼓勵(lì)申請(qǐng)人積極探索更加安全、成分更加明確的血清替代物用于后續(xù)的產(chǎn)品生產(chǎn)。

3、質(zhì)粒生產(chǎn)用菌株、病毒包裝用細(xì)胞應(yīng)符合什么要求？

答復(fù)：應(yīng)當(dāng)采用歷史培養(yǎng)情況清晰明確、來源合規(guī)、質(zhì)量能夠滿足與研發(fā)階段相適應(yīng)、且可確保產(chǎn)品的質(zhì)量安全的菌株或細(xì)胞，建議申請(qǐng)人根據(jù)所購(gòu)買細(xì)胞的具體途徑提供其溯源信息，包括但不限于證明性文件、培養(yǎng)過程、傳代及檢定信息等。建議在滿足中國(guó)藥典、ICH及相關(guān)指導(dǎo)原則的前提下，結(jié)合產(chǎn)品的實(shí)際情況建立菌種庫(kù)、細(xì)胞庫(kù)并進(jìn)行全面的檢定。

4、慢病毒包裝系統(tǒng)目前常用第三代四質(zhì)粒病毒包裝系統(tǒng)，是否可以選擇第二代三質(zhì)粒慢病毒包裝系統(tǒng)？

答復(fù)：CAR T細(xì)胞產(chǎn)品中，常使用慢病毒載體導(dǎo)入目的基因，慢病毒載體的回復(fù)突變、病毒基因在人體基因組中的插入情況是CAR T產(chǎn)品使用中的風(fēng)險(xiǎn)，在產(chǎn)品設(shè)計(jì)和質(zhì)量控制時(shí)應(yīng)設(shè)計(jì)考慮，且需要在后期的研究中長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)。由于四質(zhì)粒慢病毒包裝系統(tǒng)進(jìn)一步刪除了病毒包裝非必要元件，改構(gòu)了相關(guān)基因序列，將多基因分離于不同質(zhì)粒表達(dá)等，進(jìn)一步降低了慢病毒回復(fù)突變和同源重組的可能性。因此，現(xiàn)階段，如果申請(qǐng)人擬采用慢病毒系統(tǒng)，鼓勵(lì)使用安全性更高的質(zhì)粒系統(tǒng)包裝慢病毒以及含有末端自我失活（Self Inactivating, SIN）結(jié)構(gòu)的病毒載體。如果采用風(fēng)險(xiǎn)較高的質(zhì)粒系統(tǒng)，需要對(duì)潛在的高風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估，并說明采用高風(fēng)險(xiǎn)質(zhì)粒系統(tǒng)的合理性，如果無法提供充分的依據(jù)，建議開展相應(yīng)的安全性研究。

5、生產(chǎn)工藝的摸索和生產(chǎn)條件的建立能否放在臨床試驗(yàn)期間進(jìn)行？ 

答復(fù)：申報(bào)臨床試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)確定與開展臨床試驗(yàn)階段相適應(yīng)的細(xì)胞藥物生產(chǎn)工藝的步驟、參數(shù)、以及生產(chǎn)過程控制措施等；生產(chǎn)工藝應(yīng)經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室工藝至人體臨床試驗(yàn)用工藝的轉(zhuǎn)化研究評(píng)價(jià)，支持工藝的合理性和穩(wěn)健性，能夠滿足臨床期間細(xì)胞藥物的供應(yīng)需求，保證產(chǎn)品的安全性和工藝、質(zhì)量的可控性。同時(shí)，還需要比較分析非臨床動(dòng)物研究和非注冊(cè)臨床試驗(yàn)（如適用）的生產(chǎn)工藝（廣義的包括生產(chǎn)工藝、場(chǎng)地、原材料、規(guī)模等）和產(chǎn)品質(zhì)量與開展臨床試驗(yàn)用細(xì)胞藥物工藝和產(chǎn)品質(zhì)量的異同。如果存在質(zhì)量差異，應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的分析評(píng)估是否需要開展有關(guān)橋接研究或重新開展臨床試驗(yàn)擬用工藝的相關(guān)研究。如果臨床試驗(yàn)期間需要進(jìn)行生產(chǎn)工藝的變更，建議參考ICHQ5E等國(guó)內(nèi)外有關(guān)變更相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則開展充分研究，分析變更前后產(chǎn)品安全性、有效性（視具體情況）和質(zhì)量可控性等方面的可比性。若確需在關(guān)鍵性臨床試驗(yàn)開始后改變關(guān)鍵生產(chǎn)工藝和參數(shù)，應(yīng)進(jìn)行充分的工藝變更前后可比性研究和評(píng)估，必要時(shí)，還需開展動(dòng)物或人體臨床橋接試驗(yàn)。鼓勵(lì)藥物研發(fā)機(jī)構(gòu)針對(duì)變更研究方案和藥審中心開展溝通交流。

6、對(duì)于無菌、支原體、RCL等安全性指標(biāo)的檢測(cè)方法，能否用新的自建方法替代藥典或通行指導(dǎo)原則收錄的方法檢測(cè)放行？

答復(fù)：基于細(xì)胞治療藥物的特點(diǎn)，申請(qǐng)人可以開發(fā)新型的無菌和支原體的檢測(cè)方法進(jìn)行放行檢測(cè)，但是檢測(cè)方法應(yīng)經(jīng)過充分驗(yàn)證。同時(shí)，需要關(guān)注的是，在未能充分驗(yàn)證新型方法可以完全替代藥典傳統(tǒng)檢測(cè)方法時(shí)，建議在使用新型檢測(cè)方法進(jìn)行放行檢測(cè)的同時(shí)，采用藥典傳統(tǒng)方法進(jìn)行平行檢測(cè)，并在臨床試驗(yàn)期間收集不同檢測(cè)方法的數(shù)據(jù)，開展完整的方法學(xué)研究與驗(yàn)證，在后續(xù)申報(bào)中提供研究數(shù)據(jù)。另外，在平行使用新型檢測(cè)方法和藥典傳統(tǒng)方法的同時(shí)，申請(qǐng)人應(yīng)針對(duì)兩種方法檢測(cè)結(jié)果不一致，細(xì)胞藥物又必須盡快用于人體的特殊情況，提前制定應(yīng)急補(bǔ)救措施。

基于RCL（慢病毒復(fù)制回復(fù)突變）作為一個(gè)重要安全性風(fēng)險(xiǎn)關(guān)注點(diǎn)，臨床試驗(yàn)申報(bào)時(shí)，建議申請(qǐng)人按照通行指導(dǎo)原則采用經(jīng)驗(yàn)證的指示細(xì)胞培養(yǎng)法完成病毒（上清液、生產(chǎn)終末期細(xì)胞）的RCL檢測(cè)。對(duì)于細(xì)胞終產(chǎn)品，可采用經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證的快速方法進(jìn)行RCL的檢測(cè)放行，同時(shí)進(jìn)行留樣，必要時(shí)用指示細(xì)胞培養(yǎng)法進(jìn)行回溯檢測(cè)分析。此外，提請(qǐng)申請(qǐng)人在生產(chǎn)過程中對(duì)RCL進(jìn)行監(jiān)控。對(duì)于風(fēng)險(xiǎn)較高的產(chǎn)品（如基于質(zhì)粒系統(tǒng)的選用），RCL的檢測(cè)要求需適當(dāng)提高。細(xì)胞培養(yǎng)法每批檢測(cè)時(shí)需設(shè)置合理的陽性、陰性對(duì)照，檢測(cè)方法的靈敏度和檢測(cè)樣本量需達(dá)到臨床研究使用劑量的安全性需要，同時(shí)應(yīng)考慮病毒顆粒對(duì)RCL檢測(cè)的抑制效果。

 7、臨床試驗(yàn)申請(qǐng)階段細(xì)胞治療藥物的穩(wěn)定性研究如何開展？

答復(fù)：建議參照ICH技術(shù)指導(dǎo)原則Q5C、《生物制品穩(wěn)定性研究指導(dǎo)原則》、《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》及《細(xì)胞治療產(chǎn)品申報(bào)臨床試驗(yàn)藥物研究和申報(bào)資料的考慮要點(diǎn)》合理設(shè)計(jì)穩(wěn)定性研究方案，包括研究的批次情況、研究條件、檢測(cè)項(xiàng)目和檢測(cè)頻率等。臨床試驗(yàn)申報(bào)資料中，細(xì)胞制劑的穩(wěn)定性研究應(yīng)涵蓋樣品的保存、運(yùn)輸和使用的各個(gè)階段，在滿足臨床應(yīng)用基本要求的前提下，可于臨床試驗(yàn)期間進(jìn)一步補(bǔ)充和完善穩(wěn)定性研究。細(xì)胞治療產(chǎn)品的穩(wěn)定性研究樣品建議依據(jù)特定細(xì)胞的可獲及性，對(duì)代表性樣本開展研究，包括采集的組織/細(xì)胞樣本、生產(chǎn)過程中間樣品、細(xì)胞終產(chǎn)品、臨床使用過程中樣品等，研究用樣品的細(xì)胞密度和體積范圍應(yīng)可代表實(shí)際生產(chǎn)和使用條件。細(xì)胞治療產(chǎn)品的穩(wěn)定性研究還需要結(jié)合產(chǎn)品自身的特點(diǎn)設(shè)計(jì)研究方案，例如，如果產(chǎn)品為液體劑型，需要在研究中關(guān)注振蕩對(duì)細(xì)胞的影響；如果產(chǎn)品為冷凍劑型，需要在研究中關(guān)注凍存、復(fù)蘇對(duì)細(xì)胞的影響等。

8、細(xì)胞治療產(chǎn)品直接接觸及短暫接觸產(chǎn)品的容器包材的安全性評(píng)估及相容性研究資料包括哪些？

答復(fù)：申請(qǐng)臨床試驗(yàn)階段，建議提供容器和包材的來源、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、生物安全性研究數(shù)據(jù)等基本信息。建議申請(qǐng)人在申報(bào)臨床試驗(yàn)前完成初步的產(chǎn)品與包裝容器（可采用小規(guī)格同材質(zhì)包裝）的相容性評(píng)估，確保臨床使用的安全性，特別應(yīng)關(guān)注細(xì)胞、輔料成分（如DMSO）與容器的相容性及存在的安全性風(fēng)險(xiǎn)。在保證臨床試驗(yàn)用樣品安全性的前提下，供應(yīng)商對(duì)包裝材料進(jìn)行的基本性能測(cè)試和生物評(píng)估，以及符合臨床試驗(yàn)需要的初步穩(wěn)定性研究結(jié)果可作為評(píng)估包材相容性的參考依據(jù)。臨床試驗(yàn)期間需要根據(jù)細(xì)胞制劑組分和保存條件，按照相關(guān)指導(dǎo)原則規(guī)范開展完整的相容性研究。