臨床及實(shí)驗(yàn)室研究中,經(jīng)常要求在短時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)一定量的重組蛋白。穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株生產(chǎn)重組蛋白過程繁瑣且周期長;瞬時(shí)基因表達(dá)技術(shù)則能在短期內(nèi)高表達(dá)重組蛋白,因而得到廣泛應(yīng)用。隨著生物醫(yī)藥研究技術(shù)的發(fā)展,快速生產(chǎn)毫克到克級別的重組蛋白瞬時(shí)表達(dá)體系被廣泛用于新藥篩選和臨床前研究。 XtenCHO TM高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)是Atagenix 自主開發(fā)的一套高效表達(dá)蛋白和抗體的瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng),主要包括以下組分: ① XtenCHO cell line ② ATGfect solution ③ Basic expression medium/ATGfeed medium 該系統(tǒng)不僅表達(dá)量高(一般為200-400mg/L, 部分抗體的表達(dá)量高達(dá)1g/L),而且工藝簡單,既適用人源化抗體小體積高通量篩選,又適用于大體積的放大生產(chǎn)。 01 XtenCHO細(xì)胞是Atagenix 開發(fā)的一種經(jīng)基因改造的重組CHO細(xì)胞株,使用含配套元件的載體,可以使轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞的表達(dá)載體拷貝數(shù)增加,延長游離質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)的停留時(shí)間,從而使載體攜帶的目的基因獲得高水平,持續(xù)表達(dá)。 02 XtenCHO TM高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)改進(jìn)了CHO常規(guī)轉(zhuǎn)染方法,采用新穎的高密度轉(zhuǎn)染方法和特殊的細(xì)胞培養(yǎng)模式,提高了轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞活率,使轉(zhuǎn)染細(xì)胞存活時(shí)間從常規(guī)6-7 天延長至10-14 天,進(jìn)一步提高了目的蛋白的產(chǎn)量。 03 XtenCHO TM高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染試劑、表達(dá)培養(yǎng)基和補(bǔ)料培養(yǎng)基相較于常用的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑、商業(yè)化CHO 瞬轉(zhuǎn)培養(yǎng)基以及補(bǔ)料培養(yǎng)基,成本大大降低,更適用于工業(yè)生產(chǎn),在規(guī)模較大的重組蛋白瞬時(shí)表達(dá)生產(chǎn)中更能體現(xiàn)其性價(jià)比高的特點(diǎn)。 使用XtenCHO TM高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)和其它公司的兩個(gè)商業(yè)化CHO 瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)CHO Expression system 1 和 CHO Expression system 2 同時(shí)對一個(gè)抗體進(jìn)行表達(dá),轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞密度和活率監(jiān)測及抗體產(chǎn)量見圖1和圖2: 圖1 不同表達(dá)系統(tǒng)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞密度和活率監(jiān)測 圖2 不同表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)相同抗體產(chǎn)量比較 選取4種典型的治療性重組抗體序列,用XtenCHO TM高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行表達(dá)測試??贵w產(chǎn)量見圖3: 圖3 XtenCHO TM系統(tǒng)表達(dá)不同抗體的產(chǎn)量測定 看到我們的XtenCHO TM系統(tǒng),有木有心動(dòng)的感覺~ |
|