“發(fā)汗”炮制法是常用的中藥產(chǎn)地加工方法之一，即將鮮藥材加熱或半干燥后，密閉堆積發(fā)熱，使其內部水分向外蒸發(fā)，并凝結成水珠附于藥材的表面，尤如人體出汗，故稱為“發(fā)汗”^[1]。在古代本草中，產(chǎn)地初加工最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》：“陰干、爆干、采造時日、土熟土地所出?！薄肚Ы鹨矸健芬舱撌龅溃骸胺蛩幩。灰狸幐?、爆干，雖有藥名，終無藥實?！闭f明藥材進行初加工的重要性，有利于保證藥材的質量^[2]。只有在近代相關書籍中才能找到中藥材“發(fā)汗”炮制的相關記載，因此推測“發(fā)汗”炮制法是在藥材產(chǎn)地初加工的實踐中逐漸發(fā)展起來的?！吨袊幍洹?/span>2010年版規(guī)定玄參、杜仲、茯苓、厚樸、續(xù)斷等藥材采用“發(fā)汗”炮制法進行產(chǎn)地加工^[1]。另外，在《中草藥初加工技術》中，大黃、川芎、天麻、何首烏、藿香、梔子、石斛等也有采用“發(fā)汗”炮制法進行初加工的記載^[3]。在實際生產(chǎn)中，板蘭根、薄荷、黃芪等藥材也采用“發(fā)汗”法炮制^[4]。

1  中藥材的“發(fā)汗”炮制工藝

有些根類、根莖類、皮類和全草類藥材在采收后初加工過程中要進行“發(fā)汗”處理?！吨袊幍洹?/span>2010年版規(guī)定“發(fā)汗”炮制的具體操作方法為直接堆置“發(fā)汗”炮制法，即將中藥材直接堆置“發(fā)汗”至藥材變色，如杜仲、秦艽^[1]。除《中國藥典》規(guī)定外，在實際生產(chǎn)中常用的“發(fā)汗”炮制法還有以下幾種。

1.1  反復“發(fā)汗”炮制法

藥材除去雜質堆置“發(fā)汗”后，攤開晾至表面干燥，堆積“發(fā)汗”反復幾次至藥材表面出現(xiàn)皺紋，其內部水分大部分散失后陰干，此方法適用于不易干燥的藥材，如玄參、茯苓等^[5]。

1.2  “水汗”炮制法

將藥材放入容器內，以水蒸或者置沸水中微煮，至藥材蒸軟、表面顏色變深時取出，堆置陰濕處（如土坑內），蓋上青草“發(fā)汗”干燥，如白厚樸^[5]。

1.3  “火汗”炮制法

將藥材用微火烘至半干，堆置“發(fā)汗”至內部變色時再烘干，如茯苓、川續(xù)斷、白術、地黃、川芎、天麻、大黃、何首烏等^[6]。

1.4  加輔料“發(fā)汗”炮制法

將新鮮的藥材放人甑中，以少量花椒、白礬及水蒸煮，待蒸氣均勻后取出，堆于青草中“發(fā)汗”，如厚樸^[6]。

2  “發(fā)汗”炮制法對中藥材化學成分及藥效的影響

現(xiàn)代研究將焦點集中于分析“發(fā)汗”炮制對藥材化學成分、藥理活性和藥效作用等方面產(chǎn)生的影響。劉紅亮等^[7]用色差儀和電子鼻測得厚樸“發(fā)汗”前后顏色及氣味的特征參數(shù)，并以數(shù)值的形式表述。杜偉鋒等^[8]通過分析“發(fā)汗”前后的指紋圖譜，并加以比較，再通過先進的分析檢測手段，確認化合物，進而闡明“發(fā)汗”的物質基礎；針對藥材的主要藥效，開展“發(fā)汗”前后藥效差異的比較，并通過多維譜效關系尋找發(fā)汗物質基礎與藥效之間的相關性，最終闡明其“發(fā)汗”機制。

2.1  “發(fā)汗”炮制法對中藥材化學成分的影響

中藥“發(fā)汗”后能增加其活性前體化合物的來源，同時起到減毒增效的作用，使無效化學成分轉變?yōu)橛行Щ瘜W成分，促進活性成分的吸收，減少中藥的生產(chǎn)成本，為中藥組分代謝機制研究提供輔助手段，實現(xiàn)將微生物轉化技術應用于中藥生產(chǎn)的目標。

“發(fā)汗”炮制法是厚樸常用的一種產(chǎn)地初加工方法，其中厚樸中的主要成分為和厚樸酚與厚樸酚、揮發(fā)油等成分，在中醫(yī)藥理論的指導下，主治食積氣滯、腹脹便秘、濕阻中焦、脘痞吐瀉、痰壅氣逆、胸滿喘咳^[1]。余盛賢等^[9]采用高效液相色譜（HPLC）與氣相色譜-質譜（GC-MS）檢測，“發(fā)汗”炮制后厚樸酚類成分和揮發(fā)油類成分的量均產(chǎn)生變化，與未“發(fā)汗”厚樸比較有顯著差異，“發(fā)汗”炮制后的樣品較未處理樣品在厚樸酚與和厚樸酚量均有明顯提高，桉葉醇量下降。韋熹苑等^[10]研究發(fā)現(xiàn)“發(fā)汗”炮制能提高厚樸中揮發(fā)油的量，“發(fā)汗”炮制1周后厚樸揮發(fā)油的量提高將近1倍。另外有研究報道表明蒸后或煮后再進行“發(fā)汗”炮制的厚樸其酚類成分的量較高，與未“發(fā)汗”相比質量較佳，而揮發(fā)油的量在“發(fā)汗”炮制后有所降低^[11]。采用《中國藥典》中浸出物測定法測定后，發(fā)現(xiàn)厚樸經(jīng)“發(fā)汗”炮制處理后，浸出物量提升23%^[12]。以上研究表明“發(fā)汗”炮制法能提高厚樸中酚類成分的量，而對揮發(fā)油量的影響尚不明確，還需要進一步的研究分析。

另一種主要采用“發(fā)汗”炮制法處理的藥材為續(xù)斷?，F(xiàn)代研究已明確續(xù)斷總皂苷可促進成骨細胞分化和形成，有抗骨質疏松，治療骨折、阿爾茨海默病（AD）和白血病的作用，而川續(xù)斷皂苷Ⅵ是續(xù)斷中治療AD和白血病的活性物質。續(xù)斷“發(fā)汗”炮制后醇溶性浸出物的量降低5%，總皂苷的量也降低，川續(xù)斷皂苷Ⅵ的量則升高了23%^[13]。杜偉鋒等^[14]采用HPLC-ESI/MS研究發(fā)現(xiàn)川續(xù)斷經(jīng)“發(fā)汗”處理后綠原酸量下降了2.34%，川續(xù)斷皂苷Ⅵ量升高4.43%。王初^[15]測得不“發(fā)汗”續(xù)斷中的水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ量較“發(fā)汗”續(xù)斷高，分別提高0.8%和2.88%。由此可見，續(xù)斷“發(fā)汗”后川續(xù)斷皂苷Ⅵ量升高，其他成分亦有變化。

另外，丹參經(jīng)“發(fā)汗”后，迷迭香酸的量降低，丹酚酸B的量無明顯變化，而隱丹參酮和丹參酮Ⅱ_A的量顯著升高^[16]。另外，傳統(tǒng)“發(fā)汗”法能提高丹參中丹參酮Ⅱ_A的量^[17]。許臘英等^[18]研究表明茯苓發(fā)汗能使茯苓多糖的量升高。不同初加工方法對茯苓中多糖的量有極顯著影響，用“發(fā)汗”處理后再切制的方法，其多糖的量高于趁鮮切制法，而對三萜類成分則無顯著影響^[19]?！鞍l(fā)汗”干燥對禹白芷藥材中揮發(fā)性成分的量有較大的影響，不適于在產(chǎn)地加工中使用^[20]。

2.2  “發(fā)汗”炮制法對中藥材藥效的影響

目前對中藥材“發(fā)汗”前后化學成分變化的研究遠遠多于對藥理學變化的研究，對于藥物毒理方面研究甚少。尹愛武等^[21]研究表明，厚樸“發(fā)汗”后改善大鼠胃動力障礙和抗?jié)冏饔酶鼜?，厚樸“發(fā)汗”炮制工藝是必要的。金奇等^[13]、杜偉峰等^[14]、王初^[15]發(fā)現(xiàn)續(xù)斷“發(fā)汗”后川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量升高，相關藥效學實驗^[22]亦表明川續(xù)斷皂苷Ⅵ具有增加骨密度的作用，與中醫(yī)臨床應用續(xù)斷“補肝腎，強筋骨，續(xù)折斷”的主治和功能相吻合，同時亦具有神經(jīng)及心肌保護作用。王麗楠等^[23]采用HPLC法，以血管緊張素轉化酶抑制率為指標，考察了杜仲“發(fā)汗”前后其降壓作用的變化，發(fā)現(xiàn)未“發(fā)汗”樣品對血管緊張素轉化酶的抑制率顯著低于“發(fā)汗”樣品。

2.3  不同“發(fā)汗”炮制方法對中藥材質量的影響

“發(fā)汗”炮制法為一種產(chǎn)地初加工方法，在不同的產(chǎn)地“發(fā)汗”炮制法存在著差異。研究證明不同產(chǎn)地采用不同“發(fā)汗”方法的玄參中核苷含量差異較大，經(jīng)反復“發(fā)汗”處理后，其有效成分的量顯著高于普通堆積“發(fā)汗”法^[24]。陳佩東等^[25]發(fā)現(xiàn)厚樸經(jīng)水蒸15 min后，以薄膜代替青草覆蓋“發(fā)汗”8 d時所含厚樸酚與和厚樸酚的量最高。許臘英等^[18]以茯苓多糖為主要考察目標，在《中國藥典》規(guī)定的基礎上，確定了茯苓的最佳炮制工藝：直接堆積發(fā)汗2次，加12倍量水，洗2次，每次洗3 min，蒸20min，趁熱去皮切成大小約為0.5 cm×0.5cm×0.5 cm的茯苓丁于60 ℃烘8 h，其間翻動2次。

3  “發(fā)汗”炮制法相關機制探討

3.1  生物酶的作用

“發(fā)汗”炮制的過程中由于藥材還處于新鮮的狀態(tài)，含水量較高，其中的生命活動仍在進行，化學成分間的相互轉化等理化變化沒有停止。酶是一種具有生物活性的特殊蛋白質，“發(fā)汗”能促進生物組織內部酶發(fā)揮作用。藥材在“發(fā)汗”的過程中，組織細胞的呼吸作用使其自身產(chǎn)熱，溫度升高，為一系列復雜的酶促、水解、氧化、聚合等生化反應創(chuàng)造了有利條件，從而導致了藥材外觀性狀和內在品質的變化^[3]，進而對藥材的化學成分、藥理活性產(chǎn)生影響。在“發(fā)汗”過程中涉及到的常見酶有多酚氧化酶、過氧化物酶、水解酶等。厚樸藥材經(jīng)水法“發(fā)汗”后，其中木蘭苷A的量較未“發(fā)汗”者顯著下降，其原因推測與酶的活性有關^[9]。

3.1.1  多酚氧化酶的作用  多酚氧化酶是自然界分布很廣的一種酶，在昆蟲、植物、真菌等機體中廣泛存在，在果蔬以及茶葉加工中對其品質產(chǎn)生重要的影響^[26]。多酚氧化酶是使藥材在“發(fā)汗”炮制中發(fā)生色澤和藥效的變化的重要酶之一。

多酚氧化酶存在于植物細胞中，在細胞質內形成，通過一定的方式轉運至質體內而成為活性形式。細胞中，多酚氧化酶與底物通常存在于不同的區(qū)域，多酚氧化酶在質體中以潛伏狀態(tài)存在，其作用底物存在于液泡中。然而中藥材在“發(fā)汗”的過程中，隨著內部溫度的升高，植物體內發(fā)生生理紊亂或組織受損，多酚氧化酶與底物的亞細胞區(qū)域化被打破，其活性隨之增高并與底物發(fā)生反應^[27]。

中藥材地黃中含有豐富的酚類物質如咖啡酰葡萄糖苷等，這些物質在多酚氧化酶催化作用下形成對應的醌類產(chǎn)物，呈淺色的醌式結構分子，其進一步聚合或與其他芳香化合物結合形成更大的共軛體系，產(chǎn)生黑色或褐色，即產(chǎn)生褐變，從而導致藥材品質的改變^[3]。

3.1.2  過氧化物酶的作用  過氧化物酶是廣泛而大量存在于植物體內且活性較高的一種氧化還原酶。過氧化物酶是一種保護酶類，對逆境脅迫常以升高自身酶活力作為反應，以保護機體的生理活性。藥材在“發(fā)汗”炮制過程中，在特定的濕度條件下，溫度不斷升高，細胞的呼吸作用加強，從而使過氧化物酶的活性升高。在過氧化物酶的催化作用下，藥材的化學成分也隨之發(fā)生改變。含有單萜類物質的中藥材“發(fā)汗”炮制前后可能存在氧化還原反應，生成單萜類芳香產(chǎn)物，進而改變藥材的品質與氣味，如檸檬^[28]。

3.1.3  水解酶的作用  在藥材“發(fā)汗”炮制的過程中，植物組織細胞受損或解離，在一定的濕度和溫度條件下，水解酶類開始發(fā)揮其作用。細胞壁及細胞間質中的纖維素、半纖維素、果膠質等成分被水解，導致細胞壁的致密構造被破壞，植物細胞壁及細胞間質結構產(chǎn)生局部疏松、膨脹、破碎等變化，細胞壁及細胞間質等傳質屏障的作用減弱，存在于不同部位的化學成分得以接觸，進而發(fā)生一系列生物轉化反應，最終引起中藥材“發(fā)汗”炮制前后化學成分和藥材品質的變化^[29]。王建華等^[30]研究表明，堆積發(fā)汗的玄參藥材與未“發(fā)汗”藥材相比，其哈巴俄苷的量降低，哈巴苷和肉桂酸量升高，其原因可能是“發(fā)汗”使哈巴俄苷的肉桂?；猓闪斯蛙蘸腿夤鹚?。

3.1.4  糖苷水解酶的作用  糖苷水解酶在部分藥材的“發(fā)汗”炮制過程中發(fā)揮著重要的作用。糖苷水解酶能專一性、選擇性地對糖苷鍵產(chǎn)生水解作用，釋放出相應的糖配體和糖基。

天麻類藥材含有天麻苷等化合物，在“發(fā)汗”炮制前后發(fā)生糖基化反應，其功效成分天麻苷在酶催化下水解釋放出葡萄糖和天麻素。而糖基化通常是植物或微生物中天然產(chǎn)物生物合成的最后一步。地黃、玄參在堆置“發(fā)汗”過程中，其中富含的環(huán)烯醚萜類成分發(fā)生了一系列的氧化、聚合、轉化等反應，地黃中梓醇在β-葡萄糖苷酶的作用下發(fā)生酶解或在酸性環(huán)境下發(fā)生水解，生成穩(wěn)定的顯色物質^[31]。

3.2  熱脅迫作用

在植物生長發(fā)育過程中，如果周圍的環(huán)境條件顯著偏離于植物適宜的環(huán)境條件，那么該環(huán)境就會對植物的生長構成脅迫。在脅迫的條件下植物為了提高對生態(tài)環(huán)境的適應性，一方面會在形態(tài)結構上發(fā)生改變，另一方面會在生理生化上發(fā)生改變，生成一些與抗環(huán)境脅迫密切相關的次級代謝產(chǎn)物^[32]。藥材在“發(fā)汗”炮制過程中，內部溫度隨著“發(fā)汗”炮制的時間逐漸升高，當達到一定溫度時藥材細胞相當于處于高溫脅迫的環(huán)境中，相關的基因得以誘導表達，從而最終產(chǎn)生并累積某些次生代謝產(chǎn)物。植物次生代謝產(chǎn)物是由次生代謝產(chǎn)生的一類細胞生命活動或植物生長發(fā)育正常運行的非必需的小分子有機物。研究表明，許多中藥的藥理作用與其所含的次生代謝產(chǎn)物有關，次生代謝產(chǎn)物通常也是其主要藥效成分，如黃酮類、酚類、香豆素類等^[33-37]。

特定的環(huán)境刺激可以誘導植物細胞內控制次生代謝產(chǎn)物合成過程相關酶的基因表達，最終促進次生代謝產(chǎn)物的生成。外界環(huán)境對細胞外部的信號受體產(chǎn)生刺激，從而激活次生代謝信使發(fā)出信號分子，通過一系列的信號傳遞途徑轉入細胞，啟動關鍵合成酶基因的表達，最終促進相關次生代謝產(chǎn)物的合成。也就是說，次生代謝產(chǎn)物在植物體內的合成和積累是一定的環(huán)境條件誘導作用下相關基因表達而產(chǎn)生的最終結果。

目前，有多項研究已經(jīng)證明植物受到各種環(huán)境脅迫后，會引起體內物質成分的變化。雞爪槭經(jīng)高溫脅迫后，葉片的相對電導率和丙二醛（MDA）量分別為對照組的137.41%和139.91%，超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化物酶（POD）的活性分別為對照組的304.06%和258.88%，脯氨酸和可溶性蛋白量分別為對照組的215.98%和368.85%^[38]。黃連經(jīng)高溫脅迫后，可溶性糖量最高值比對照組增加了1倍，脯氨酸量增加了7倍^[39]。焉申堂等^[40]采用HPLC法測定熱脅迫后黃柏中小檗堿量的變化，結果表明根中小檗堿量高于莖和葉，說明高溫對小檗堿的合成具有促進作用。

4  結語與展望

“發(fā)汗”是在民間長期生產(chǎn)和加工中總結出的一種炮制方法，現(xiàn)代對“發(fā)汗”炮制法的研究主要集中于對比“發(fā)汗”炮制前后化學成分的變化，對其作用機制的研究很少，因此無法制定規(guī)范化的“發(fā)汗”炮制法標準，從而大大局限了“發(fā)汗”炮制法的應用范圍。未來對于“發(fā)汗”炮制法的研究應該著眼于對其內在作用機制的探究，可以從生物酶的作用以及植物抗熱脅迫等方面入手，為“發(fā)汗”炮制法的應用提供理論依據(jù)，為大規(guī)模推廣“發(fā)汗”炮制法奠定理論基礎。

參考文獻（略） 

來  源：陳  茹，陳  成，楊興鑫，俞  捷，趙榮華，顧  雯. 中藥“發(fā)汗”炮制法的現(xiàn)代研究進展 [J]. 中草藥, 2018, 49(2):489-493.