目前，隨著人們對(duì)自身的健康狀況越來(lái)越重視，HBsAg檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性顯得尤為重要。國(guó)內(nèi)大多數(shù)臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行HBsAg血清學(xué)檢測(cè)最為常用的方法是酶聯(lián)免疫法，按照試劑盒說(shuō)明書說(shuō)明當(dāng)檢測(cè)信號(hào)吸光度值(A)超出試劑盒設(shè)定的陽(yáng)性判斷值時(shí)，即判為陽(yáng)性，反之則判為陰性。由于影響酶聯(lián)免疫測(cè)定的因素有很多，這些報(bào)告對(duì)于強(qiáng)反應(yīng)性和明顯陰性的標(biāo)本，造成錯(cuò)誤結(jié)果的可能性較小，但對(duì)處于陽(yáng)性判斷值周圍的弱陽(yáng)性反應(yīng)性標(biāo)本則可能影響較大，就可能會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果，這些結(jié)果可能會(huì)影響檢驗(yàn)人群身心健康，還可能引發(fā)不必要的醫(yī)療糾紛。因此，臨床實(shí)驗(yàn)室要重視對(duì)感染性疾病血清學(xué)標(biāo)志物檢驗(yàn)中弱陽(yáng)性反應(yīng)性標(biāo)本的確認(rèn)及報(bào)告解釋。

造成假陽(yáng)性的因素有以下幾點(diǎn)：

1．內(nèi)源性因素

血清是最常見(jiàn)的ELISA標(biāo)本，大約有40%的人血清標(biāo)本含類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、嗜異性抗體嗜靶抗原、自身抗體等非特異性物質(zhì)。它們的存在對(duì)ELISA測(cè)定有干擾作用易造成假陽(yáng)性結(jié)果，應(yīng)該在不同時(shí)期多次采血以減少假陽(yáng)性率。

2．外源性因素

⑴標(biāo)本溶血：各種人為因素引起標(biāo)本溶血，使細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化物酶進(jìn)人血漿，并吸附于細(xì)胞及纖維蛋白原上，增加加樣后微孔板洗滌難度，引起HRP活性增高，造成非特異性顯色。有研究發(fā)現(xiàn)溶血標(biāo)本OD值較高，且與溶血程度成正比；

⑵標(biāo)本受細(xì)菌污染產(chǎn)生非特異性顯色；

⑶標(biāo)本保存不當(dāng)；

⑷標(biāo)本凝集不全血清中殘留纖維蛋白原；

⑸比色時(shí)間：有研究顯示雙波長(zhǎng)法比色，延遲10 min或更長(zhǎng)時(shí)間比色，結(jié)果有不同程度的“高檢出”現(xiàn)象，因此檢測(cè)應(yīng)保證終止顯色后及時(shí)比色；

⑹人為因素：試劑因素、加樣不準(zhǔn)確、孵育溫度及時(shí)間、洗板次數(shù)、顯色液的加入方式、標(biāo)本有污染和操作不熟練等。

對(duì)弱陽(yáng)性反應(yīng)標(biāo)本的雙份復(fù)檢可以減少報(bào)告的誤診和漏診，但是仍有一些標(biāo)本需要確認(rèn)實(shí)驗(yàn)才能確認(rèn)。弱陽(yáng)性反應(yīng)標(biāo)本有一定的傳染性，應(yīng)加以重視。如果忽視弱陽(yáng)性反應(yīng)結(jié)果尤其是陽(yáng)性判斷值附近的結(jié)果，易造成低濃度HBsAg表達(dá)人群的漏檢和高濃度類風(fēng)濕因子等因素引起的誤診。

在目前尚沒(méi)有對(duì)臨界結(jié)果有統(tǒng)一規(guī)則之前，除選擇質(zhì)量較好的試劑，對(duì)定性檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化以減小實(shí)驗(yàn)誤差外，還應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)立合適灰區(qū)和弱陽(yáng)性反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)弱陽(yáng)性反應(yīng)樣本進(jìn)行嚴(yán)格復(fù)檢和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。如若遇到HBsAg測(cè)定結(jié)果為弱陽(yáng)性反應(yīng)的樣本，應(yīng)通過(guò)雙份復(fù)檢或確認(rèn)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定，復(fù)檢可以減少外源性干擾，復(fù)檢結(jié)果不一致的再做確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，其目的是要排除內(nèi)源性的干擾因素，有條件的單位可采用定量或者HBV DNA檢測(cè)來(lái)綜合分析報(bào)告。總之，檢驗(yàn)工作者必須對(duì)弱陽(yáng)性反應(yīng)標(biāo)本加以重視，減少漏診誤診。

要做好HBsAg檢測(cè)工作，提高檢測(cè)質(zhì)量，必須選擇國(guó)家衛(wèi)生部批檢合格試劑盒；標(biāo)本空腹采集無(wú)溶血，血清完全分離；操作嚴(yán)格按說(shuō)明書操作規(guī)程進(jìn)行；臨床檢驗(yàn)各室應(yīng)根據(jù)目的不同、項(xiàng)目不同分別采血，防止轉(zhuǎn)血過(guò)程中標(biāo)本污染可能，導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤的發(fā)生；對(duì)于陽(yáng)性標(biāo)本或可疑標(biāo)本采用不同廠家不同方法及重新采血復(fù)查。而現(xiàn)階段由于方法學(xué)特定的局限性及試劑盒客觀存在的質(zhì)量差異，抗原抗體結(jié)合有一定線性區(qū)、等價(jià)區(qū)和抗原過(guò)剩區(qū)，只有當(dāng)HBsAg濃度在線形范圍內(nèi)，S/CO值與HBsAg濃度呈正相關(guān)，故臨床報(bào)告化驗(yàn)單時(shí)，不宜單純報(bào)告陰、陽(yáng)性（質(zhì)控標(biāo)本除外），且建議臨床規(guī)范化驗(yàn)單，臨床醫(yī)生在化驗(yàn)單上詳細(xì)注明患者病情和分期。

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