由于相對成本低，血清學(xué)檢測目前為檢測HBV感染的經(jīng)典一線檢測方法。血清學(xué)檢測方法主要包括：快速診斷檢測法(RDTs)、酶標(biāo)法(EIAs)、化學(xué)發(fā)光免疫法(CLIAs)及電化學(xué)發(fā)光免疫法(ECLs)。病毒核酸檢測(NAT)既往主要用于檢測病毒的出現(xiàn)以確定是否為活動性的病毒感染以及確定是否有抗病毒應(yīng)答。

a. 快速診斷檢測法

RDT是單次使用的一次性檢測，簡單易用，通常不需要試劑盒以外的其他試劑?？梢栽?0分鐘內(nèi)從視覺上給出簡單的定性結(jié)果。由于其簡單，成本低和快速性，可以由培訓(xùn)后的人員操作，而不需要靜脈穿刺采集標(biāo)本。正基于此，HBV快速診斷具有快速和簡便的特點，非常適合現(xiàn)場獻血員開展篩查和其他應(yīng)急檢測，以及基層醫(yī)療機構(gòu)進行常規(guī)臨床檢測，因此即時檢測(Point-of-care Testing POCT)對臨床檢測具有比較重要的意義。 但快速測試通常不適合測試大量血液樣本，結(jié)果的判定取決于主觀判斷，不能永久保留原始測試結(jié)果記錄。

指南認(rèn)為：貧窮或缺少EIAs基礎(chǔ)檢測設(shè)施的地區(qū)，擴大使用有質(zhì)量保證的RDTs能夠幫助擴大HBsAg的檢測規(guī)模；RDTs也適用于高收入國家，可增加不愿意檢測或不能更好的接受醫(yī)療保健服務(wù)的人群以及制度外的人群中的肝炎檢出率；存在的問題是RDTs靈敏度較低，很少有HBsAg RDTs能夠滿足歐洲聯(lián)盟提出的分析靈敏度的要求。

b. 基于實驗室的免疫分析

大多數(shù)基于實驗室的血清免疫學(xué)測定（EIAs，CLIAs和ECL）是檢測抗體、抗原或兩者的結(jié)合，僅免疫復(fù)合物的檢測模式稍有不同。通常由制造商確定臨界值和結(jié)果的有效性，因此EIA結(jié)果報告為OD / CO 比值。這些類型的檢測法最適合于考慮成本效益且具有高通量樣品（每天超過40次）的情況。這些方法是在實驗室或由實驗室專業(yè)人員操作才能進行，因為專業(yè)實驗室能提供電力，冷庫，氣候控制室等條件和專業(yè)技術(shù)人員，并且需要全程低溫存儲樣品和使用精密移液器。這些測定通常僅用于血清或血漿標(biāo)本，因此需要靜脈采血來收集合適的標(biāo)本。

指南認(rèn)為：盡管RDTs和EIAs對HBsAg檢測的臨床靈敏度與特異度相似且可與單一EIA相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)相符，不同于RDTs的靈敏度相差較大，且一些RDTs具有次優(yōu)靈敏度；對于HIV感染人群而言，RDTs的臨床靈敏度較差（72.3%），但較EIAs而言稍好；EIAs的分析靈敏度較高（高出50-100倍），檢測局限性較低的高靈敏度方法的優(yōu)勢在于，能夠增加初次感染人群以及HBsAg水平較低的人群的檢出率；應(yīng)用中和步驟的確證試驗可合并至實驗室水平的EIAs檢測；應(yīng)用于實驗室水平的EIAs檢測是自動化的，在每天進行大量檢測操作的社會環(huán)境中是適合而具成本效益性的。

c. 確診分析檢測

對于HBsAg – 化學(xué)中和測定法，實驗室的免疫測定中，使用中和步驟的同一標(biāo)本重復(fù)測試，確定是否有可觀察到抗原反應(yīng)性。在同一測定中使用特定的含抗HBs的試劑，當(dāng)與對照組相比，該中和試劑可以因免疫中和反應(yīng)被消除，可證實為陽性。

a. 應(yīng)用何種方法

在成人、青少年和兒童（年齡> 12個月）中診斷慢性HBV感染，推薦應(yīng)用RDT或?qū)嶒炇宜矫庖邫z測形式進行HBsAg檢測，該方法能滿足質(zhì)量、安全性和技能標(biāo)準(zhǔn)的最低要求（考慮到分析和臨床的敏感性和特異性）。在實驗室檢測可行且可接受的環(huán)境中，推薦將實驗室水平免疫檢測作為首選分析格式；在實驗室檢測有限的環(huán)境和/或在快速檢測聯(lián)合護理和治療的人群中推薦使用RDTs以提高檢測獲得率。

b. 血清學(xué)檢測策略

指南基于陽性預(yù)測值的預(yù)估模式結(jié)果，根據(jù)檢測人群不同的血清學(xué)流行率，來評價和分析診斷性能，推薦在HBsAg血清流行率≥0.4%的環(huán)境或人群中，在進一步評估HBV DNA和肝臟疾病分級前，推薦應(yīng)用單一血清學(xué)方法檢測HBsAg；在HBsAg血清流行率＜0.4%的環(huán)境或人群中，需要應(yīng)用兩次血清學(xué)檢測方法檢測HBsAg，即應(yīng)用同一免疫測定中的中和步驟或另一不同的RDT對HBsAg進行檢測以證實HBsAg陽性結(jié)果。具體檢測策略見圖1。

策略制定的依據(jù)包括：有效地檢測方法能夠識別大多數(shù)可能感染的人群，雖然一種血清學(xué)指標(biāo)檢測的陽性預(yù)測值比兩種血清學(xué)指標(biāo)的檢測低，特別是在低患病率的人群中（0.4%、2%），會產(chǎn)生更多的假陽性結(jié)果。指南制定小組認(rèn)為該結(jié)果不會產(chǎn)生臨床意義，是因為所有的HBsAg陽性患者需要進一步評估肝病分期，及進行HBV DNA檢測來評估治療的需要。指南制定小組指出，在某些特定條件下需6個月后再次檢測以確認(rèn)診斷CHB，這主要是為了區(qū)別于急性乙型肝炎。如果第一次使用了高特異性的檢測，那么很少需要第二次檢測。策略將大大簡化檢驗過程和降低成本，特別是在護理上。

圖1 WHO推薦的用于診斷慢性HBV感染的檢測策略

（A）HBsAg 血清流行率高于0.4%的單一檢測

（B）HBsAg血清流行率低于0.4%的雙檢測

指南強烈推薦選擇抗體或抗原/抗體作為HCV血清標(biāo)志物，應(yīng)用RDT或符合最低質(zhì)控和安全性標(biāo)準(zhǔn)的實驗室基礎(chǔ)的免疫檢測方法進行成人、青少年和兒童既往或現(xiàn)癥感染的檢測。對于實驗室基礎(chǔ)設(shè)施及檢測條件有限的地區(qū)，在需要與后續(xù)的治療護理相結(jié)合的人群，推薦使用RDT進行檢測。

指南推薦無論人群血清抗體陽性率高低，均應(yīng)用單一血清學(xué)檢測方法檢測HCV感染，并推薦NAT檢測HCV RNA作為確定HCV現(xiàn)癥感染的檢測方法，HCV核心抗原檢測作為替代NAT的備選方法。推薦具體檢測策略見圖2。

圖2 WHO推薦的用于診斷HCV感染的檢測策略

指南推薦單一血清學(xué)檢測策略依據(jù)：首先是由于首先選擇單一血清學(xué)檢測隨后應(yīng)用核酸檢測來確定HCV現(xiàn)癥感染是更符合成本效益的；其次單一血清學(xué)檢測即具有很高的陽性預(yù)測價值，而雙血清學(xué)檢測僅在低患病率的人群（＜0.4%）中對陽性預(yù)測值有影響；此外指南推薦存在HCV暴露史者，需進行核酸檢測以確定是否存在HCV感染，故單一血清學(xué)檢測出現(xiàn)假陽性造成的風(fēng)險是小的。