| HPLC故障排除 |
| 癥狀類型 | 可能的原因 | 解決方案 |
| 基線噪聲大 | 隨機(jī)性－ 污染物積聚沖 | 沖洗柱；凈化樣品；使用HPLC 級溶劑 |
| 連續(xù)性－ 檢測器燈故障 | 更換紫外燈（壽命為1000 小時） |
| 偶然性－ 外部電氣干擾 | 使用LC 系統(tǒng)專用穩(wěn)壓器 |
| 樣品量過大 | 進(jìn)樣量應(yīng)為流動相進(jìn)樣量的1/6 |
| 雙峰 | 樣品量過大 | 進(jìn)樣量應(yīng)為流動相進(jìn)樣量的1/6 |
| 進(jìn)樣溶劑過強(qiáng) | 使用較弱的進(jìn)樣溶劑或流動相 |
| 濾芯堵塞 | 更換并使用0.5 μm 孔隙率的在線過濾器 |
| 柱有空隙或氣溝 | 用玻璃珠或填料填充空隙；重填柱 |
| 進(jìn)樣器流路不通暢 | 更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子 |
| 柱頭有空隙 | 使用填料或玻璃珠填充柱頂部 |
| 柱上樣品超載 | 使用更高負(fù)載量的固定相 增加色譜柱內(nèi)徑 減少樣品量 |
| 單峰－ 存在干擾性組分 | 凈化樣品；預(yù)分離 |
| 拖尾峰 | 開始出雙峰 | 請參見雙峰 |
| 存在未掃的死體積 | 減少接頭的數(shù)量 確保進(jìn)樣器密封墊緊密 確保接頭正確固定 |
| 堿性化合物－ 硅醇相互作用 | 換成聚合物固定相 |
| 堿性物質(zhì)－ 硅醇相互作用 | 使用更強(qiáng)的流動相或添加競爭堿（例如，三甲胺 |
| 硅膠基－ 柱降解 | 使用特種色譜柱；聚合物柱或空間位阻 |
| 峰展寬 | 進(jìn)樣量過大 | 降低進(jìn)樣溶劑的強(qiáng)度以集中溶質(zhì) |
| 進(jìn)樣閥中的峰擴(kuò)散 | 在進(jìn)樣前/后引入氣泡以減少擴(kuò)散 |
| 數(shù)據(jù)系統(tǒng)的采樣速率過低 | 增大采樣 |
| 檢測器時間常數(shù)低 | 調(diào)節(jié)時間常數(shù)使之與峰寬匹配 |
| 流動相粘度過高 | 提高柱溫 |
| 檢測器池容積過大 | 使用盡可能小的池容積（系統(tǒng)中無熱交換器） |
| 注射器體積過大 | 減少進(jìn)樣量 |
| 保留時間長 | 使用梯度洗脫或較強(qiáng)的流動相 |
| 壓力波動 | 單向閥泄漏 | 更換單向 |
| 泵密封墊泄漏 | 更換泵密封 |
| 微粒積聚 | 過濾樣品；在線過濾器；過濾流動相 |
| 壓力漸增 | 微粒積聚 | 過濾樣品；在線過濾器；過濾流動相 |
| 水/有機(jī)系統(tǒng)－ 緩沖液沉淀 | 測試緩沖液-有機(jī)混合物；確保兼容性 |
| 保留超出總滲透體積 | 體積排阻－ 特異性相互作用 | 添加流動相改性劑或更改溶劑 |
| 保留時間不斷變動 | 柱溫不斷變化 | 使柱恒溫；絕緣；保證實(shí)驗(yàn)室溫度恒定 |
| 平衡時間不足以適應(yīng)梯度洗脫要求，或等度洗脫流動相起變化 | 確信在溶劑改變或梯度結(jié)束后至少10 個柱容積通過色譜柱 |
| 流動相組分選擇性蒸發(fā) | 減少氦氣的劇烈脫氣；保持溶劑貯器蓋好；制備新的流動相 |
| 緩沖能力不足 | 用>20 mM 濃度的緩沖液 |
| 在線流動相混合不一致 | 保證梯度系統(tǒng)輸送恒定組成；與手動制備流動相核對 |
| 污染積聚 | 沖洗色譜柱以去除污染物 |
| 最初幾次進(jìn)樣— 吸附在活性部位 | 用濃樣品進(jìn)樣沖洗柱，使其處于正常狀態(tài) |
| 保留時間逐漸縮短 | 流速在增加 | 檢查泵以確保正確；否則需重調(diào) |
| 柱上進(jìn)樣超載 | 減少樣品 |
| 鍵合固定相的流失 | 保持流動相pH 值在2-8.5 間 |
| 保留時間逐漸增加 | 流速在減慢 | 解決液流中的漏液現(xiàn)象，更換泵密封墊，檢查泵的渦流和氣泡 |
| 硅膠填料的活化點(diǎn) | 使用流動相改性劑 |
| 鍵合固定相的流失 | 保持流動相pH 值在2-8.5 間 |
| 流動相組成在變化 | 確保流動相容器蓋好 |
| 硅膠填料的活化點(diǎn) | 流動相中加競爭堿 |
| 硅膠填料的活化點(diǎn) | 固定相用更高覆蓋度的填充料 |
| 靈敏度問題 | 峰位于檢測器線性范圍之外 | 稀釋或濃縮使之處于線性區(qū)內(nèi) |
| 最初幾次進(jìn)樣—樣品在樣品池或柱中被吸附自動進(jìn)樣器 流路阻塞 | 用濃樣品處理樣品池/柱 |
| 自動進(jìn)樣器流路阻塞 | 檢查流量情況，確保無阻塞現(xiàn)象 |
| 進(jìn)樣器樣品定量管未充滿 | 確保樣品池中已充滿樣品 |
| 在樣品制品時有關(guān)的樣品流失 | 用內(nèi)標(biāo)法在制備樣品，優(yōu)化樣品制備方法 |
| 柱平衡時間減慢（離子對現(xiàn)象） | 長鏈離子對試劑平衡時間慢 | 使用較短的烷鏈試劑 |
