熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。

某些物質(zhì)經(jīng)一定波長(zhǎng)的光（如紫外光）照射后，物質(zhì)中的分子被激活，吸收能量后躍遷至激發(fā)態(tài)；當(dāng)其從激發(fā)態(tài)返回到基態(tài)時(shí)，所吸收的能量除部分轉(zhuǎn)化為熱量或用于光化學(xué)反應(yīng)外，其余較大部分則以光能形式輻射出來，由于能量沒能全以光的形式輻射出來，故所輻射出的光的波長(zhǎng)比激發(fā)光的要長(zhǎng)，這種波長(zhǎng)長(zhǎng)于激發(fā)光的可見光部就是熒光(fluorescence)。所謂熒光就是某些物質(zhì)在一定波長(zhǎng)光（如紫外光）的照射下、在極短時(shí)間內(nèi)所發(fā)出的比照射光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的可見光。由此可見，被照射物質(zhì)產(chǎn)生熒光必須具備以下兩個(gè)條件：①物質(zhì)分子（或所特異性結(jié)合的熒光染料）必須具有可吸收能量的生色團(tuán)；②該物質(zhì)還必須具有一定的量子產(chǎn)率和適宜的環(huán)境（如溶劑、pH、溫度等）。
熒光顯微術(shù)是利用熒光顯微鏡結(jié)可發(fā)熒光的物質(zhì)進(jìn)行觀測(cè)的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)。某些物質(zhì)在一定短波長(zhǎng)的光(如紫外光)的照射下吸收光能進(jìn)入激發(fā)態(tài)，從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時(shí), 就能在極短的時(shí)間內(nèi)放射出比照射光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光(如見光)，這種光就稱為熒光。有些生物體內(nèi)的物質(zhì)受激發(fā)光照射后可直接產(chǎn)生熒光, 稱為自發(fā)熒光(或直接熒光)，如葉綠素的火紅色熒光和木質(zhì)素的黃色熒光等。有的生物材料本身不能產(chǎn)生熒光，但它吸收熒光染料后同樣卻能發(fā)出熒光，這種熒光稱為次生熒光(或間接熒光)，如葉綠體吸附吖啶橙后便可發(fā)出桔紅色熒光。
熒光顯微鏡具特殊光源（多為紫外光光源），提供足夠強(qiáng)度和波長(zhǎng)的激發(fā)光，誘發(fā)熒光物質(zhì)發(fā)出熒光。在視場(chǎng)中所所觀察到的圖像，主要是樣品的熒光映像。

　　（一）光源

　　現(xiàn)在多采用200W的超高壓汞燈作光源，它是用石英玻璃制作，中間呈球形，內(nèi)充一定數(shù)量的汞，工作時(shí)由兩個(gè)電極間放電，引起水銀蒸發(fā)，球內(nèi)氣壓迅速升高，當(dāng)水銀完全蒸發(fā)時(shí)，可達(dá)50～70個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力，這一過程一般約需5～15min。超高壓汞燈的發(fā)光是電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果。它發(fā)射很強(qiáng)的紫外和藍(lán)紫光，足以激發(fā)各類熒光物質(zhì)，因此，為熒光顯微鏡普遍采用。

　　超高壓汞燈也散發(fā)大量熱能。因此，燈室必須有良好的散熱條件，工作環(huán)境溫度不宜太高。

　　新型超高壓汞燈在使用初期不需高電壓即可引燃，使用一些時(shí)間后，則需要高壓?jiǎn)?dòng)（約為15000V），啟動(dòng)后，維持工作電壓一般為50～60V，工作電流約4A左右。200W超高壓汞燈的平均壽命，在每次使用2h的情況下約為200h，開動(dòng)一次工作時(shí)間愈短，則壽命愈短，如開一次只工作20min，則壽命降低50%。因此，使用時(shí)盡量減少啟動(dòng)次數(shù)。燈泡在使用過程中，其光效是逐漸降低的。燈熄滅后要等待冷卻才能重新啟動(dòng)。點(diǎn)燃燈泡后不可立即關(guān)閉，以免水銀蒸發(fā)不完全而損壞電極，一般需要等15min。由于超高壓汞燈壓力很高，紫外線強(qiáng)烈，因此燈泡必須置燈室中方可點(diǎn)燃，以免傷害眼睛和發(fā)生爆炸時(shí)造成操作。

　　超高壓汞燈（100W或200W）光源的電路和包括變壓、鎮(zhèn)流、啟動(dòng)幾個(gè)部分。在燈室上有調(diào)節(jié)　燈泡發(fā)光中心的系統(tǒng)，燈泡球部后面安裝有鍍鋁的凹面反射鏡，前面安裝有集光透鏡。

　　國產(chǎn)超高壓汞燈GCQ-200型性能良好，可以代替HBO-200等型的進(jìn)口燈泡，平均壽命在200h以上，價(jià)格也比較低。

　　我國研制的一種簡(jiǎn)易輕便型高色溫溴鎢熒光光源裝置，體積小，重量輕，功率小，交、直流兩用（自帶直流電源），易于攜帶，使用方便，已推廣應(yīng)用。

　?。ǘV色系統(tǒng)

　　濾色系統(tǒng)是熒光顯微鏡的重要部位，由激發(fā)濾板和壓制濾板組成。濾板型號(hào)，各廠家名稱常不統(tǒng)一。濾板一般都以基本色調(diào)命名，前面字母代表色調(diào)，后面字母代表玻璃，數(shù)字代表型號(hào)特點(diǎn)。如德國產(chǎn)品（Schott）BG12，就是種藍(lán)色玻璃，B是藍(lán)色的第一個(gè)字母，G是玻璃的第一個(gè)字母；我國產(chǎn)品的名稱已統(tǒng)一用拼音字母表示，如相當(dāng)于BG12的藍(lán)色濾板名為QB24，Q是青色（藍(lán)色）拼音的第一個(gè)字母，B是玻璃拼音的第一個(gè)字母。不過有的濾板也可以透光分界濾長(zhǎng)命名，如K530，就是表示壓制濾長(zhǎng)530nm以下的光而透過530nm以上的光。還有的廠家的濾板完全以數(shù)字命名，如美國Corning廠的NO：5-58，即相當(dāng)于BG12。

　　1．激發(fā)濾板　 根據(jù)光源和熒光色素的特點(diǎn)，可選用以下三類激發(fā)濾板，提供一定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光。

　　紫外光激發(fā)濾板：此濾板可使400nm以下的紫外光透過，阻擋400nm以上的可見光通過。常用型號(hào)為UG-1或UG-5，外加一塊BG-38，以除去紅色尾波。

　　紫外藍(lán)光激發(fā)濾板：此濾板可使300～450nm范圍內(nèi)的光通過。常用型號(hào)為ZB-2或ZB-3，外加BG-38。

　　紫藍(lán)光激發(fā)濾板：它可使350～490nm的光通過。常用型號(hào)為QB24（BG12）。

　　最大吸收峰在500nm以上者的熒光素（如羅達(dá)明色素）可用藍(lán)綠濾板（如B-7）激發(fā)。

　　近年開始采用金屬膜干涉濾板，由于針對(duì)性強(qiáng)，波長(zhǎng)適當(dāng)，因而激發(fā)效果比較玻璃濾更好。如西德Leitz廠的FITC專用KP490濾板和羅達(dá)明的S546綠色濾板，均遠(yuǎn)比玻璃濾板效果好。

　　激發(fā)濾板分薄厚兩種，一般暗視野選用薄濾板，亮視野熒光顯微鏡可選用厚一些?；疽笫且垣@得最明亮的熒光和最好的背景為準(zhǔn)。

　　2．壓制濾板 壓制濾板的作用是完全阻擋激發(fā)光通過，提供相應(yīng)濾長(zhǎng)范圍的熒光。與激發(fā)濾板相對(duì)應(yīng)，常用以下3種壓制濾板：

　　紫外光壓制濾板：可通過可見光、阻擋紫外光通過。能與UG-1或UG-5組合。常用GG-3K430或GG-6K460。

　　紫藍(lán)光壓制濾板：能通過510nm以上濾長(zhǎng)的熒光（綠到紅），能與BG-12組合。通常用OG-4K510或OG-1K530。

　　紫外紫光壓制濾板：能通過460nm以上波長(zhǎng)的熒光（藍(lán)到紅），可與BG-3組合，常用OG-11K470AK 490，K510。

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　　反光鏡的反光層一般是鍍鋁的，因?yàn)殇X對(duì)紫外光和可見光的藍(lán)紫區(qū)吸收少，反射達(dá)90%以上，而銀的反射只有70%；一般使用平面反光鏡。

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　　專為熒光顯微鏡設(shè)計(jì)制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成。分明視野聚光器的暗視野聚光器兩種。還有相差熒光聚光器。

　　1．明視野聚光器　 在一般熒光顯微鏡上多用明視野聚光器，它具有聚光力強(qiáng)，使用方便，特別適于低、中倍放大的標(biāo)本觀察。

　　2．暗視野聚光器 　暗視野聚光器在熒光顯微鏡中的應(yīng)用日益廣泛。因?yàn)榧ぐl(fā)光不直接進(jìn)入物鏡，因而除散射光外，激發(fā)光也不進(jìn)入目鏡，可以使用薄的激發(fā)濾板，增強(qiáng)激發(fā)光的強(qiáng)度，壓制濾板也可以很薄，因紫外光激發(fā)時(shí)，可用無色濾板（不透過紫外）而仍然產(chǎn)生黑暗的背景。從而增強(qiáng)了熒光圖像的亮度和反襯度，提高了圖像的質(zhì)量，觀察舒適，可能發(fā)現(xiàn)亮視野難以分辨的細(xì)微熒光顆粒。

　　3．相差熒光聚光器　 相差聚光器與相差物鏡配合使用，可同時(shí)進(jìn)行相差和熒光聯(lián)合觀察，既能看到熒光圖像，又能看到相差圖像，有助于熒光的定位準(zhǔn)確。一般熒光觀察很少需要這種聚光器。

　　（五）物鏡

　　各種物鏡均可應(yīng)用，但最好用消色差的物鏡，因其自體熒光極微且透光性能（波長(zhǎng)范圍）適合于熒光。由于圖像在顯微鏡視野中的熒光亮度與物鏡鏡口率的平方成正比，而與其放大倍數(shù)成反比，所以為了提高熒光圖像的亮度，應(yīng)使用鏡口率大的物鏡。尤其在高倍放大 時(shí)其影響非常明顯。因此對(duì)熒光不夠強(qiáng)的標(biāo)本，應(yīng)使用鏡口率大的物鏡，配合以盡可能低的目鏡（4×,5×，6.3×等）。

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　　在熒光顯微鏡中多用低倍目鏡，如5×和6.3×。過去多用單筒目鏡，因?yàn)槠淞炼缺入p筒目鏡高一倍以上，但目前研究型熒光顯微鏡多用雙筒目鏡，觀察很方便。

　　（七）落射光裝置

　　新型的落射光裝置是從光源來的光射到干涉分光濾鏡后，波長(zhǎng)短的部分（紫外和紫藍(lán)）由于濾鏡上鍍膜的性質(zhì)而反射，當(dāng)濾鏡對(duì)向光源呈45。傾斜時(shí)，則垂直射向物鏡，經(jīng)物鏡射向標(biāo)本，使標(biāo)本受到激發(fā)，這時(shí)物鏡直接起聚光器的作用。同時(shí)，濾長(zhǎng)長(zhǎng)的部分（綠、黃、紅等），對(duì)濾鏡是可透的，因此，不向物鏡方向反射，濾鏡起了激發(fā)濾板作用，由于標(biāo)本的熒光處在可見光長(zhǎng)波區(qū)，可透過濾鏡而到達(dá)目鏡觀察，熒光圖像的亮度隨著放大倍數(shù)增大而提高，在高放大時(shí)比透射光源強(qiáng)。它除具有透射式光源的功能外，更適用于不透明及半透明標(biāo)本，如厚片、濾膜、菌落、組織培養(yǎng)標(biāo)本等的直接觀察。近年研制的新型熒光顯微鏡多采用落射光裝置，稱之為落射熒光顯微鏡。

　?。ㄒ唬┹d玻片

　　載玻片厚度應(yīng)在0.8～1.2mm之間，太厚的坡片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔，厚度均勻，無明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片。

　　（二）蓋玻片

　　蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光，也可用干涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)（如氟化鎂）的蓋玻片，它可以使熒光順利通過，而反射激發(fā)光，這種反射的激發(fā)光女可激發(fā)標(biāo)本。

　?。ㄈ?biāo)本

　　組織切片或其他標(biāo)本不能太厚，如太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部，而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外，細(xì)胞重迭或雜質(zhì)掩蓋，影響判斷。

　　（四）封裱劑

　　封裱劑常用甘油，必須無自發(fā)熒光，無色透明，熒光的亮度在pH8.5～9.5時(shí)較亮，不易很快褪去。所以，常用甘油和0.5mol/l pH9.0～9.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱劑。

　?。ㄎ澹╃R油

　　一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時(shí)，必須使用鏡油，最好使用特制的無熒光鏡油，也可用上述甘油代替，液體石蠟也可用，只是折光率較低，對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。

　?。?）嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序。

　　（2）應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后，接上電源，點(diǎn)燃超高壓汞燈5～15min，待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后，眼睛完全適應(yīng)暗室，再開始觀察標(biāo)本。

　?。?）防止紫外線對(duì)眼睛的損害，在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。

　?。?）檢查時(shí)間每次以1～2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降，熒光減弱；標(biāo)本受紫外線照射3～5min后，熒光也明顯減弱；所以，最多不得超過2～3h。

　?。?）熒光顯微鏡光源壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，以節(jié)　省時(shí)間，保護(hù)光源。天熱時(shí)，應(yīng)加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí)，須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。

　?。?）標(biāo)本染色后立即觀察，因時(shí)間久了熒光會(huì)逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時(shí)間，防止封裱劑蒸發(fā)。

　?。?）熒光亮度的判斷標(biāo)準(zhǔn)：一般分為四級(jí)，即“一”—無或可見微弱熒光?！?”—僅能見明確可見的熒光?！?+”—可見有明亮的熒光?！?++”—可見耀眼的熒光。

　　熒光顯微鏡所看到的熒光圖像，一是具有形態(tài)學(xué)特征，二是具有熒光的顏色和亮度，在判斷結(jié)果時(shí)，必須將二者結(jié)合起來綜合判斷。結(jié)果記錄根據(jù)主觀指標(biāo)，即憑工作者目力觀察。作為一般定性觀察，基本上可靠的。隨著技術(shù)科學(xué)的發(fā)展，在不同程度上采用客觀指標(biāo)記錄判斷結(jié)果，如用細(xì)胞分光光度計(jì)，圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結(jié)果，也必須結(jié)合主觀的判斷。

　　熒光顯微鏡攝影技術(shù)對(duì)于記錄熒光圖像十分必要，由于熒光很易褪色減弱，要即時(shí)攝影記錄結(jié)果。方法與普通顯微攝影技術(shù)基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA200以上或24。以上。因紫外光對(duì)熒光猝滅作用大，如FITC的標(biāo)記物，在紫外光下照射30s，熒光亮度降低50%。所以，曝光速度太慢，就不能將熒光圖像拍攝下來。一般研究型熒光顯微鏡都有半自動(dòng)或全自動(dòng)顯微攝影系統(tǒng)裝置。

吖啶橙：吖啶橙是最經(jīng)典的靈敏的熒光染料，它可對(duì)細(xì)胞中的DNA和RNA同時(shí)染色而顯示不同顏色的熒光，DNA呈綠色熒光，RNA呈橙紅色熒光。
EB:染色DNA和RNA
熒光素雙醋酸酯(FDA)：FAD 本身無熒光,無極性,可透過完整的原生質(zhì)膜。 一旦進(jìn)入原生質(zhì)體后,由于受到酯酶分解而產(chǎn)生 具有熒光的極性物質(zhì)熒光素。它不能自由出入原 生質(zhì)膜,因此有活力的細(xì)胞能產(chǎn)生熒光,無活力 的原生質(zhì)體不能分解FAD無熒光產(chǎn)生。5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下貯存,使用 時(shí)取0.22mlFDA貯存液加入5ml0.65mol/L甘露醇中.使用時(shí),使最終濃度為0.01%。
熒光染料Ho33342和若丹明123: 活細(xì)胞雙熒光染色觀察細(xì)胞核和線粒體。一般的生物染料不能穿透細(xì)胞膜，只有當(dāng)細(xì)胞被固定后改變了細(xì)胞膜的通透性，染料才能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。但有些活體染料能進(jìn)入活細(xì)胞，并對(duì)細(xì)胞不產(chǎn)生毒性作用。熒光染料Ho33342和若丹明123都是活體染料。Ho33342能與細(xì)胞中DNA進(jìn)行特異的結(jié)合，若丹明123能與線粒體進(jìn)行特異的結(jié)合。采用兩種熒光染料的混合染液可對(duì)一個(gè)活細(xì)胞的核和線粒體同時(shí)染色。

1．每種熒光染料，均有自己的最適PH值，此時(shí)熒光最強(qiáng)。當(dāng)pH改變時(shí)，不僅熒光強(qiáng)度減弱，而且波長(zhǎng)將有所改變，因此熒光檢測(cè)時(shí)要在一定的PH值的緩沖液中進(jìn)行。
2．一放熒光染色在20。C以下時(shí)熒光比較穩(wěn)定，溫度升高常出現(xiàn)溫度猝滅。
3．在熒光觀察中，常因激發(fā)光的增強(qiáng)而使樣品熒光很快衰竭，造成觀察和照相困難。為此最好用能量小的長(zhǎng)波長(zhǎng)光進(jìn)行觀察，需照相時(shí)再適當(dāng)增強(qiáng)激發(fā)光。
4．一般熒光染液的濃度在萬分之一以下，甚至億萬分之一，也能使標(biāo)本著色。在一定的限度內(nèi)，熒光強(qiáng)度可隨熒光素的濃度增加而增強(qiáng)，但超過限度，熒光強(qiáng)度反而下降，這是由于熒光分子間的締合而使自身熒光猝滅所致。

使用方法：
(1)將材料片放在載物臺(tái)上。
(2)開啟熒光顯微鏡穩(wěn)壓器．然后按下啟動(dòng)組點(diǎn)燃紫外燈15min內(nèi)不得關(guān)閉，關(guān)閉后3min內(nèi)不得再啟動(dòng)。
(3)將激發(fā)濾光片轉(zhuǎn)至v，分色片調(diào)到v，選用495或475nm阻擋濾光片。
(4)選用uvFL40、uvFL100熒光接物鏡鏡檢。
(5)在玻片上加無熒光油，先用40 x，再用100 x調(diào)焦鏡檢．呈現(xiàn)熒光。
(7)因熒光物質(zhì)受紫外光照射時(shí)隨時(shí)間的增長(zhǎng)熒光逐漸變?nèi)?，因此鏡檢時(shí)應(yīng)經(jīng)常變換視野。
(8)亦可用uvFL10或uvFL20低倍鏡鏡檢材料(用低倍鏡時(shí)不加無熒光油)。

1. 開機(jī)：
1.1. 打開房間總電源開關(guān)
1.2. 打開電腦電源開關(guān)
1.3. 打開數(shù)碼相機(jī)電源開關(guān)
1.4. 打開顯微鏡電源開關(guān)（打開汞燈電源開關(guān)）

2. 調(diào)試顯微鏡光路：
2.1. 把載玻片放到載物臺(tái)上。調(diào)節(jié)聚焦。
2.2. 根據(jù)物鏡指數(shù)乘0.8確定聚光鏡光圈值，調(diào)整到位。
2.3. 將視場(chǎng)光闌縮小，然后調(diào)節(jié)聚光鏡高度，直到從目鏡中觀察到視場(chǎng)光闌的清晰成像。
2.4. 放大視場(chǎng)光闌，使其在目鏡中的黑框擴(kuò)展到視野以外。

3. 調(diào)試數(shù)碼相機(jī)拍攝照片：
3.1. 在顯微鏡取景器中對(duì)好視野及焦距。
3.2. 打開photoshop程序。
3.3. 點(diǎn)擊 “文件 -- 自動(dòng)…。”調(diào)出相機(jī)控制窗口。
3.4. ZOOM定為77。拍攝圖片格式為640*480。
3.5. 在相機(jī)控制窗口上點(diǎn)preview，觀察預(yù)覽圖象的亮度。選擇適當(dāng)?shù)钠毓鈺r(shí)間使預(yù)覽圖片的亮度合適。
3.6. 點(diǎn)拍攝按紐拍攝，等待幾秒鐘后圖片傳回電腦并在photoshop窗口里顯示。
3.7. 繼續(xù)拍攝下一張照片。
3.8. 拍攝十來張照片后要及時(shí)保存照片。
3.9. 先關(guān)閉相機(jī)控制按紐。并保存拍攝條件到默認(rèn)值。
3.10. 在photoshop中保存剛拍攝的照片到指定文件夾中，保存后要關(guān)閉照片。
3.11. 保存并關(guān)閉全部照片后重新打開相機(jī)控制窗口繼續(xù)拍攝。
3.12. 拍攝全部完成后保存所拍攝的照片。需要時(shí)將照片通過網(wǎng)絡(luò)上傳到校園網(wǎng)服務(wù)器上，不能使用U盤或軟盤轉(zhuǎn)移文件?；蛘邔⒄掌募啼浀焦獗P上。

4. 關(guān)機(jī)：
4.1. 關(guān)閉顯微鏡電源。
4.2. 關(guān)閉汞燈電源。
4.3. 關(guān)閉數(shù)碼相機(jī)電源。
4.4. 關(guān)閉電腦時(shí)點(diǎn)“重新啟動(dòng)電腦”，待電腦進(jìn)入關(guān)閉狀態(tài)并重新啟動(dòng)時(shí)按電腦電源開關(guān)強(qiáng)制關(guān)機(jī)。注意不能直接點(diǎn)擊“關(guān)閉電腦”。
4.5. 關(guān)閉房間電源總開關(guān)。

1、 初次使用者事先要經(jīng)過培訓(xùn)。
2、 該顯微鏡有2套拍照系統(tǒng)；傳統(tǒng)膠卷拍照和數(shù)碼拍照。根據(jù)需要可更換相應(yīng)的附件。
3、 該鏡可作為明視場(chǎng)顯微鏡使用，也可作為熒光顯微鏡使用，根據(jù)需要，做相應(yīng)的附件連接，開啟相應(yīng)的電源。禁止亂調(diào)設(shè)置，以免影響他人正常使用。
4、 作為明視場(chǎng)顯微鏡使用；A、接通電源后，打開顯微鏡底座前的電源開關(guān)，按光亮需要調(diào)節(jié)底座右側(cè)的滑竿。B、根據(jù)需要，調(diào)節(jié)底座光柵和聚光器光柵及其高度，可獲得最佳的圖象效果。C、需要圖片，要把鏡體上的相應(yīng)拉桿拉到綠線位子。按下相應(yīng)附件上的照相按扭。
5、 作為熒光顯微鏡使用；A、先關(guān)閉熒光通道，再打開熒光激發(fā)器電源，等待15分鐘。B、等待期間，打開顯微鏡光源，找到需要觀察的樣品，選用合適的物鏡，調(diào)整焦距。C、關(guān)閉顯微鏡光源，打開熒光通道。D、需要圖片，要把鏡體上的相應(yīng)拉桿拉到綠線位子。按下相應(yīng)附件上的照相按扭。

注意事項(xiàng)：
1、 不要污染物鏡鏡頭。一旦污染，先用擦鏡紙擦除一遍，再用顯微鏡專用擦洗液擦洗，最后用鏡紙?jiān)俨烈槐椤Ｓ糜顽R鏡頭后，以同樣方法擦洗。
2、 關(guān)閉顯微鏡電源前，先把光源調(diào)到最低。
3、 用過熒光鏡的，注意清潔載物臺(tái)，防止有害有毒致癌物污染。
4、 結(jié)束工作，關(guān)閉所有電源，清潔工作臺(tái)和房間。
5、 發(fā)現(xiàn)漏電和其他故障，及時(shí)報(bào)告。