張宿

摘要γ-氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid ，GABA）是生物應激反應體系的重要氨基酸，廣泛分布于自然界中。長久的進化使得生物可以通過GABA的H+和Ca2+依賴方式響應于內(nèi)外界應激?？梢酝ㄟ^腐胺途徑和GABA分流途徑干涉生物內(nèi)能量代謝、碳氮代謝的方式緩解生物體內(nèi)壓力。GABA在生物體內(nèi)組織發(fā)育和形成、生物內(nèi)和生物間的信號交流中扮演著重要角色。作為癲癇等疾病的特效藥，可降解尼龍的前體物質(zhì)GABA有著長足的發(fā)展空間。分析了GABA的生理機制，綜述了谷氨酸脫羧酶及其基因定點突變的研究，最后對GABA的制備方法與應用進行了介紹。

關(guān)鍵詞γ-氨基丁酸;谷氨酸脫羧酶;應激調(diào)節(jié)

中圖分類號Q 517文獻標識碼A

文章編號0517-6611（2019）18-0001-09

The Physiological Mechanism and Application of γ-aminobutyric Acid

ZHANG Xiu （College of Life Sciences，Sichuan Normal University，Chengdu，Sichuan 610101）

Abstractγ-aminobutyric acid（GABA） is important amino acid of biological stress reaction，widely distributed in nature.In long-term evolution，biological GABA levels can be regulated by H+ and Ca2+ ions levels are altered by intra- and inter-biostimulation.It can be used to relieve stress of biological by the way of putrescine metabolism and GABA shunt pathway interfered with energy metabolism and C/N metabolism.GABA plays an important role in the tissue development and formation intra-and inter-biosignal communicate.As a special medicine of epilepsy，etc.disseases，the precursor of degradable nylon，GABA has a long-term development space.The physiological mechanism of GABA was analyzed， the research of glutamate decarboxylase and its site-directed mutation were reviewed， and the preparation and application of GABA were introduced.

Key wordsGABA;GAD;Stress regulation

γ-氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid）是一種四碳非蛋白氨基酸，簡稱GABA，廣泛存在于自然界中。GABA最早于1910年在腐生菌中發(fā)現(xiàn)[1]。在隨后的100年中，研究者相繼在不同生物中檢測到。GABA由谷氨酸脫羧酶（GAD，glutamic acid decarboxylase）催化L-谷氨酸（L-Glu，L-glutamic acid）脫羧而成[2-3]。其分子量為103.1，分子式為C4H9NO2。GABA高度溶于水，在生理pH條件下為兩性分子[4]。GABA在氣態(tài)時呈高度折疊態(tài)，固態(tài)時為舒展狀態(tài)，液態(tài)具有包括環(huán)狀結(jié)構(gòu)在內(nèi)的多種分子形態(tài)[5-6]。至今為止，GABA已被確定與多種代謝應激有關(guān)，同時也作為一種信號分子存在于自然界中[7-11]。作為動物中主要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)[12]，GABA具有多種功能[13]。在微生物細胞中受到酸的調(diào)控[14-15]。因此，GABA作為一種常見的響應外部應激的代謝物質(zhì)發(fā)揮重要的調(diào)控作用。在生物體中有2個途徑可以合成GABA。一種是通過精氨酸（Arg，argimime）和精氨（spermine）代謝過程合成GABA。其具體過程：精氨酸通過精氨酸脫羧酶（ADC，arginase decarboxylase）催化得到瓜丁酸（agmatine），瓜丁酸經(jīng)瓜丁氨酰脫羧酶（AGIH，agmatine imidohydrolase）以及氨甲酰腐胺酰胺水解酶（CPAH，carbamolputreacine amidohydrolase）生成腐胺（putrescine）。也可以通過精氨酸酶催化生成鳥氨酸（ornithine），再經(jīng)鳥氨酸脫羧酶（ODC，ornithine decarboxylase）生成腐胺。同樣精胺（spermine）也可以經(jīng)由反轉(zhuǎn)多氨氧化酶（BCPAO，back-conversion polyamine oxidase）2次催化得到一分子腐胺和兩分子3-氨基丙醛（APAL，3-aminopropionaldehyde）。腐胺經(jīng)二胺氧化酶（damine oxidase）催化脫去一分子NH3+得到γ-氨基丁醛（γ-Aminobutyraldehyde）。后者再經(jīng)過4-氨基丁醛脫羧酶（ABALDH，γ-aminobutyraldehyde dehydrogenase），以及吡咯烷脫氫酶（PDH，pyrroline dehydregenase）生成γ-氨基丁酸[16-17]。

途徑二是三羧酸循環(huán)的一個分支，該過程起始于三羧酸循環(huán)中的α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），α-酮戊二酸經(jīng)由谷氨酸脫氫酶（GDH，glutamate dehydregonase）催化得到谷氨酸，再經(jīng)過GAD催化脫去α羧基得到GABA[2-3]。GABA經(jīng)由GABA轉(zhuǎn)氨酶（γ-aminobutyric acid transaminase）催化生成琥珀酸半醛（succinic semialdehyde），琥珀酸半醛再經(jīng)琥珀酸半醛脫氫酶（SSADH，succinic semialdehyde dehydregenase）轉(zhuǎn)化為琥珀酸（succinic）再次進入三羧酸循環(huán)。而琥珀酸半醛可被琥珀酸半醛還原酶（SSAR，succinic semialdehyde reductase）和乙醛酸還原酶（GLYR，glyoxylate reductase）可逆轉(zhuǎn)化為γ-羥基丁酸（GHB，γ-hydroxybutyrate）[4，9-10]（圖1）。

1GABA的生理機制

在生物體內(nèi)GABA作為信號分子發(fā)揮重要作用[11，18-20]。在高等生物中GABA受體體系的研究較為深入，GABA在動物體內(nèi)作為動物的主要抑制性神經(jīng)遞質(zhì)和通過GABA受體發(fā)揮作用[21]。同時GABA可以兼作營養(yǎng)因子為生物體內(nèi)提供能量[22-25]。此外還能調(diào)節(jié)細胞內(nèi)多種生理信息[4，7，21-23，26]。

1.1GABA受體

GABA在昆蟲中的受體為離子型受體，也是大部分殺蟲劑的靶標。外部藥物可以通過GABA離子型受體抑制或殺死昆蟲[19，27]。

動物中的GABA受體分為GABAA和GABAB兩大類受體。這兩類受體均可以被GABA激活。GABAA受體為多聚配體的門控（Cl-）通道離子型或離子滲透型受體。GABAB受體為代謝型的G蛋白偶聯(lián)受體，可調(diào)控Ca2+和K+的離子通道[28]。GABAA受體是異戊二烯配體門控離子通道超家族成員，這個家族還包括煙堿乙酰膽堿受體、甘氨酸受體和 5-HT3受體[29]。其基本結(jié)構(gòu)包括細胞外N末端結(jié)構(gòu)域、4個跨膜結(jié)構(gòu)域以及TM3和TM4之間的擴展區(qū)域，具有介導運輸和傳遞信號的作用[30]。哺乳動物中已經(jīng)鑒定出19種GABAA受體亞基，可分為α（1-6）、β（1-3）、γ（1-3）、δ、ε、π和ρ（1-3）等8類[31]。大多數(shù)GABAA受體包括2個α、2個β和1個γ亞基[32]。GABA在GABAA受體上的α、β、γ亞基有2個結(jié)合位點，位于α和β之間[33]。GABAA受體是激動劑、抑制劑和拮抗劑、驚厥劑的靶標。這些藥物包括一些抗焦慮藥物、抗驚厥的苯二氮卓藥物、印防已毒素類驚厥劑、全身麻醉劑、巴比妥鹽、異丙酚、乙醇低效作用的藥品、神經(jīng)活性類、固醇類藥等[34]。GABAARS受體與記憶分裂癥、老年癡呆癥等神經(jīng)類疾病的治療具有密切關(guān)系[35]。

GABAB受體是相對緩慢的G蛋白偶聯(lián)受體家族成員[34]。GABAB受體由7個跨膜結(jié)構(gòu)域組成，G蛋白在細胞內(nèi)與跨膜結(jié)構(gòu)域結(jié)合。這個結(jié)構(gòu)域由α、β、γ 3個亞基組成，β和γ形成復合體。受體失活下α與β、γ結(jié)合在一起，受體被激活時亞基復合體分離，并與其他受體靶標結(jié)合發(fā)揮作用[36]。GABAB受體與谷氨酸受體具有明顯的相似性，均屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族3成員[37]。GABAB受體與精神分裂癥[38]、藥物成癮[39]、癲癇[40]等治療有關(guān)。

植物中，GABA受體最近才被發(fā)現(xiàn)。研究表明，GABA在不同組織中表達水平不同[41]，且GABA響應于幾乎所有應激反應，以及不同濃度下發(fā)揮的作用具有差異。大部分研究者認為植物谷氨酸受體GLR與動物IGLUR受體（動物谷氨酸受體）相似[7]。而動物GABAB受體與谷氨酸受體存在序列相似性[37]。推測植物GABA受體可能存在于線粒體 膜上[42]。

植物GABA受體的陰離子通道是可被Al3+、陰離子激活或者GABA負調(diào)節(jié)的植物蘋果酸轉(zhuǎn)運蛋白（alaminium activated malate transporters，ALMTS）受體家族。ALMTS高度保守，含有12個氨基酸結(jié)構(gòu)域，與GABAA受體一致。因此ALMTS受體是植物GABA受體[7]。在植物GABA代謝過程中，ALMTS受體膜上陰離子流被改變，將化學信號轉(zhuǎn)變?yōu)槟ば盘朳43]。GABA可抑制ALMTS受體并使其膜電位超極化，降低興奮。被陰離子激活后ALMT則會使膜去極化發(fā)揮作用[7]。擬南芥ALMT基因家族包含14個基因。ALMT家族N端高度相似，有6～7個跨膜結(jié)構(gòu)域的疏水核心。其C端親水可能含有2個跨膜結(jié)構(gòu)域或錨定結(jié)構(gòu)域。其N-末端組成了滲透通道，而多變的C端是功能的基礎(chǔ)。同時ATALMT9可能由四聚體組裝而成[44]。目前發(fā)現(xiàn)ALMT家族除參與解毒外還具有其他作用[45]。

1.2在高等動物中GABA的藥用價值

在動物中，GABA最早被發(fā)現(xiàn)位于動物的腦組織中[3，46]。隨后在貓耳核中發(fā)現(xiàn)存在GABA和GABA-T的蹤跡[13]，小鼠的肌神經(jīng)細胞群[47]、胃[48]以及兩棲動物的胰腺內(nèi)也檢測到GABA[49]。在外源注射GABA的試驗中，觀察到GABA對疼痛調(diào)節(jié)具有抑制作用[21]。通過研究GABA介導的大鼠下丘腦神經(jīng)元的反應，觀察到GABA可以誘導膜電位去極化，并導致神經(jīng)元的活動增加，這種現(xiàn)象可能導致神經(jīng)元的興奮或者抑制作用[50]。利用外部藥物注射觀察GABA在應激中發(fā)揮的作用中，發(fā)現(xiàn)注射SCH23390（R-（+）-8氯-2-3，4-5-四氫-3-甲基-5-苯基-1氫-3-苯并氮雜-7-醇即潛在的苯并安定抗精神病藥物，其在多巴胺系統(tǒng)上具有獨特的作用[51]會增加對側(cè)前額葉皮層（prefrontal cortex，PFC）的谷氨酸水平。其他刺激介導的GABA水平上升會被SCH23390介導的反應所抑制。由于SCH23390具有抑制GABA應激的作用，因此GABA受體可以雙向調(diào)節(jié)GABA的應激作用[52]。GABA存在于周身血液循環(huán)中[22]，與許多神經(jīng)元的遷移[53]、軸突發(fā)芽有關(guān)。GABA和谷氨酸可以使大鼠胚胎新皮層細胞去極化，通過刺激細胞內(nèi)Ca2+增加，降低DNA的合成，進而在調(diào)節(jié)新皮質(zhì)神經(jīng)發(fā)生起作用[54]。GABA和谷氨酸使得胚胎腦室的心室區(qū)神經(jīng)祖細胞增殖增加，使腦下室區(qū)神經(jīng)祖細胞增殖 減少[55]。

GABA具有特殊的藥用價值，其對癲癇的治療是近年來的熱點之一。在幾年來的抗神經(jīng)性疼痛研究中發(fā)現(xiàn)大部分合成的GABA三唑衍生物具有抗癲癇、陣痛和抗痛覺過敏的作用[56]。通過對癲癇發(fā)病患者和非癲癇患者的GAD比對，發(fā)現(xiàn)癲癇患者GAD活性比非癲癇患者低[57]。后來也有研究發(fā)現(xiàn)GABA的釋放和GABA存儲機制與癲癇存在密切關(guān)系[58-59]。且GABA抑制作用減弱會導致癲癇發(fā)作[60]。通過增加GABA代謝的藥物對癲癇治療已初見成效[61]。目前癲癇發(fā)病原因被認為是神經(jīng)自興奮和抑制之間的平衡被破壞，而GABA在這其中起著重要的平衡作用[62-63]。癲癇患者GAD神經(jīng)元亞群易在發(fā)病中受損，導致GABA能神經(jīng)元減少，而其他神經(jīng)元則會上調(diào)GAD的表達以維持這種平衡[64]。

作為一個作用廣泛的氨基酸，GABA還能影響癌細胞的增殖和凋亡[65]、集落形成和侵襲[66-67]，導致癌細胞有絲分裂活性變化[68]，可作為治療癌癥的輔助藥物[69]。同樣GABA可以提高自發(fā)性壓力感受器反射功能（baroreceptor reflex function，BRS），調(diào)節(jié)心率降低血壓[70]。它還可以拮抗由咖啡因引起的睡眠障礙，且不影響自主活動[71]。另外，也有研究發(fā)現(xiàn)GABA具有治療糖尿病[72]等作用。

GABA有上述積極的作用同時，有時也不總是那么盡人意，甚至在動物體內(nèi)還有許多不明確的生理和藥理作用[73]，需要更加謹慎的處理GABA和動物之間的關(guān)系。

1.3GABA的生物抗逆生理及調(diào)控作用

GABA長久以來被認為與植物多種應激和防御系統(tǒng)有關(guān)。GABA會隨著植物受到刺激而升高，被認為是植物中響應于各種外界變化、內(nèi)部刺激和離子環(huán)境等因素如pH、溫度、外部天敵刺激的一種有效機制。GABA還可以調(diào)節(jié)植物內(nèi)環(huán)境如抗氧化、催熟、保鮮植物等作用。近年來GABA在植物中也被發(fā)現(xiàn)作為信號分子在植物中傳遞擴大信息[11，18-19，42，74]。GABA曾在大豆[75]、擬南芥[76]、茉莉[74]、草莓[77]等植物中相繼發(fā)現(xiàn)。低濃度的GABA有助于植物生長發(fā)育，高濃度下又會起相反的作用[11]。

1.3.1GABA對外部酸化的響應。

低pH下GABA會在細胞內(nèi)快速增加[78]，這種GABA的積累在微生物[79]和動物[80]中也存在。植物在酸性pH下細胞內(nèi)H+隨之升高，誘導細胞內(nèi)GABA含量增加[78]。該GABA的合成過程消耗H+，使得細胞內(nèi)酸化得到緩解[81]。在微生物中也存在這種快速的反應機制，在產(chǎn)生GABA的同時，會增加質(zhì)子呼吸鏈復合物的表達，促進ATP合成。并且上調(diào)F1F0-ATP水解酶活性，促使酸性條件下ATP依賴的H+排出過程[79]。在動物中，也會向外排出GABA和谷氨酸以此來改變細胞外環(huán)境的pH[82]。更重要的是，GABA在生理環(huán)境下為兩性離子，因此在酸堿調(diào)節(jié)中發(fā)揮一定作用[4]。

1.3.2GABA對昆蟲的防御作用。

GABA有助于植物對外界天敵的防御。當昆蟲取食時由于植物受傷導致細胞破裂和組織受傷，這種機械切割會刺激植物中Ca2+的增加，植物在Ca2+刺激下分泌GABA作為一種抵御昆蟲取食的措施。且在此過程中不存在茉莉酸類信號參與GABA的積累[74]。昆蟲存在離子型GABA受體，其中果蠅的GABA門控氯離子通道亞基RDL（resistant to dieldrin）是許多殺蟲劑藥物的作用靶標[27]。GABA誘導使得GABA受體的單電流降低[83]。具體為GABA在無脊椎動物中通過GABA受體門控的氯離子通道起作用，與大多數(shù)殺蟲劑相同，通過GABA受體氯離子通道，使Cl-在電化學梯度的驅(qū)使下流向下游，導致質(zhì)膜超極化，并抑制昆蟲取食[4，19]。而在過量表達GABA的煙草植物中，接種北方線蟲，發(fā)現(xiàn)其雌性成年線蟲的繁殖能力整體下降，這種方式可以使植物達到防御天敵的效果[18]。在對女貞子被草食女娥幼蟲取食過程中，發(fā)現(xiàn)女貞子會降低自身賴氨酸活性使得蛋白質(zhì)無營養(yǎng)，而女娥幼蟲在此期間會分泌甘氨酸、β-丙氨酸、胺等分子抑制植物賴氨酸的減少，這種植物與草食昆蟲的交流過程也證明了GABA作為信號分子的 功能[20]。

1.3.3GABA對高等生物在高溫和冷凍下的保護作用。在小麥開花期間噴灑GABA（200 mg/L），可以調(diào)節(jié)膜穩(wěn)定性，增加抗氧化能力等，減少了小麥高溫下的損失[84];外源GABA的施用對黃瓜幼苗生長也有明顯的作用[85]。高溫會抑制中樞GABA能神經(jīng)元活性，激活膽堿類神經(jīng)系統(tǒng)并引起體溫升高[86]。長期處于高溫下，下丘腦的GABA能神經(jīng)元活性會增加以適應環(huán)境和調(diào)節(jié)體溫[87]。GABA會在血漿中升高進而抑制冷敏神經(jīng)核血漿中兒茶酚胺的濃度，達到降低食道溫度的目的[88]。

低溫會降低植物的生物合成能力，對重要功能造成干擾，并產(chǎn)生永久性傷害[89]。動物在低溫下也會導致?lián)p傷甚至造成更嚴重的傷害[90]。低溫下生物GABA表達會上調(diào)，這與低溫的耐受性存在關(guān)聯(lián)[91-92]。在低溫下，75%的代謝物會增加，包括氨基酸、糖類、抗壞血酸鹽、腐胺和一些三羧酸循環(huán)中間體[93]。能量代謝涉及的氨基酸代謝，酶類的轉(zhuǎn)錄豐度均會增加[94]?？梢酝ㄟ^增強GABA分流途徑產(chǎn)生ATP以及積累GHB[95]。另外低溫下利用褪黑霉素可以使精胺、亞精胺和脯氨酸積累，促使二胺氧化酶表達升高。通過腐胺途徑合成GABA，使得H2O2積累和苯丙烷途徑通量下降以達到防腐和抗寒的效果[77]。

1.3.4GABA在抗氧化和氧化過程中的作用。

GABA分流作為三羧酸循環(huán)分支途徑的中間產(chǎn)物，與能量循環(huán)關(guān)系密切[4]。同時GABA作為氧化代謝物的調(diào)控者發(fā)揮作用。擬南芥SSADH突變體暴露于高溫下生長，發(fā)現(xiàn)其活性氧中間體（reactive oxygen intermediate，ROI）積累，使得植株死亡[96]。證明ROI與GABA存在關(guān)系。同樣SSADH和GABA-T基因的突變株在高溫下存在大量的ROI，利用ROI消除劑N-叔丁基-α-苯基硝酮（PBN）可使GABA大量積累，從而提高酵母的存活率[97]。因此，認為GABA分流途徑在抑制高溫下ROI具有作用。在GABA分流過程中，SSA可以經(jīng)由GLYR/SSAR轉(zhuǎn)化為GHB，而GHB與ROI存在密切關(guān)系。在SSADH缺失突變株中的GHB與ROI存在大量積累，而瓜巴特林可以抑制這種GHB與ROI的積累，并抑制了過氧化死亡[98]。GABA分流過程可以減少ROI的積累使得生物免于高溫帶來的氧化損傷以及過氧化衰亡。

1.3.5GABA維持碳氮平衡。

碳氮代謝平衡涉及許多生理過程，包括能量代謝、氨基酸代謝等。由于GABA合成和分流途徑涉及氮代謝，GABA也是能量循環(huán)中三羧酸循環(huán)的重要組成部分，GABA分流途徑與呼吸鏈競爭SSADH，因此長時間以來GABA被認為是碳氮代謝的重要一環(huán)[4，42]。三羧酸循環(huán)分支的谷氨酸合成GABA途徑是植物快速響應外部刺激的關(guān)鍵因素之一[16-17]。絕大部分NH3+是通過谷氨酰胺合成酶/谷氨酸合成酶途徑合成（glutamine synthetase/glutamate synthetase，GS/GOGAT），被認為是氨基酸的主要合成途徑[25]。游離的氨基分子大部分通過谷氨酰胺固定，谷氨酸被認為是植物老根中氮主要的積累形式，氮存儲于精氨酸等氨基酸中，同時精氨酸也可用于運輸，滿足生物體的氮需求[25，99]。同樣氨基酸也通過轉(zhuǎn)化為三羧酸循環(huán)的前體或中間體參與能量代謝過程[25]。在對菠菜的研究中發(fā)現(xiàn)脯氨酸占總游離氨基酸的8.1%～36.1%，GABA占12.8%～22.2%，谷氨酸占5.6%～21.5%。谷氨酸是GABA和脯氨酸的前體物質(zhì)，低溫下植物會使谷氨酸的氮分流進入GABA和脯氨酸調(diào)控氮的代謝途徑[8]。另外在50 mmol/L GABA下培養(yǎng)的擬南芥中除NADP+依賴性檸檬酸脫氫酶、根和芽中谷氨酰胺合成酶、芽中磷酸烯醇丙酮酸羧化酶外，幾乎所有的初級氮代謝和硝酸鹽吸收有關(guān)的酶活性均受到影響[100]。而在NaCl條件下培養(yǎng)的擬南芥中，發(fā)現(xiàn)GABA積累的同時帶動擬南芥整體氨基酸的增加[10]。在分別利用不同氮化合物 （10 mmol/L NH4Cl， 5 mmol/L NH4NO3，5 mmol/L谷氨酸和5 mmol/L的谷氨酰胺）作為唯一氮源培養(yǎng)的擬南芥葉片中，其GAD活性和蛋白質(zhì)水平不同，說明GAD在氮代謝中發(fā)揮作用[101]。

在NO脅迫下的香蕉中也發(fā)現(xiàn)了GAD活性上升、GABA和香蕉多巴胺增加的現(xiàn)象[102]。鹽脅迫下谷氨酸脫氫酶活性與GAD的表達瞬時上升，進而提高GABA分流等相關(guān)途徑的通量以調(diào)節(jié)碳氮平衡。應激下NADH：NAD+和ADP：ATP的比值也能影響GABA-T，從而使GABA積累。鹽脅迫下植物更多地利用C/N平衡途徑緩解壓力[9]。

1.3.6GABA在干旱和水澇中的作用。

20世紀末，人們就發(fā)現(xiàn)干旱可以降低根的固氮和O2的擴散，使得植物缺氧而導致GABA的積累[103]。低氧條件下谷氨酸和天冬氨酸含量增加[24]。干旱下GAD活性提高，GABA-T快速積累[104]。干旱條件下，根系、莖的生長和葉面積伸展被抑制，活性氧增加，低分子滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)如GABA等氨基酸、多元醇、有機酸產(chǎn)量增加，以及抗氧化損傷的酶表達均上調(diào)[105]。研究表明，干旱條件下，與細胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)、活性氧的清除、結(jié)構(gòu)蛋白穩(wěn)定保護、滲透調(diào)節(jié)劑、轉(zhuǎn)運蛋白等有關(guān)的基因表達上調(diào)[106]。外源GABA使得植物保持較高的相對含水量，降低電解質(zhì)滲漏、脂質(zhì)、過氧化物、碳代謝并能提高膜穩(wěn)定性[107-108]。此外外源GABA也可以誘導GABA-T和α-戊酸脫氫酶活性上升，抑制GAD活性使得GABA和谷氨酸增加。同時GABA加速多胺合成，抑制多胺分解，并進一步激活δ-1-吡咯林-5-羧酸合成酶和脯氨酸脫氫酶以及鳥氨酸-δ-氨基轉(zhuǎn)移酶活性，致使GABA預富集物的高度積累和代謝[109]。GABA還可以通過促進葉綠素表達，進而使得過氧化氫酶（catalase，CAT）、過氧化物酶（peroxidase，POX）活性增加，提高脯氨酸和糖含量，調(diào)節(jié)滲透和降低氧化[110]。

植物在水澇下pH會下降[111]。長時間水澇會使土壤缺氧且短時間內(nèi)水澇使得GABA升高[112-113]。而水澇下氣孔關(guān)閉與脫落酸存在直接關(guān)系[114]。由于H+上升和缺氧會導致GABA增加[4，42]。同時丙氨酸的積累可提高缺氧條件下植物的生存能力[115]。在缺氧條件下GABA可以通過間接調(diào)節(jié)使得光合作用增強，降低氣孔限制值[116]，使得通氧量加大。缺氧條件下GAD活性上升，而GABA可以緩解缺氧對植物幼苗的傷害，而且外源GABA可以使低氧條件下根生長抑制得以緩解[117]，快速生長出不定根。不定根生長也可以緩解植物的缺氧情況[118]。

另外，水澇缺氧條件下除GABA、谷氨酸以及丙氨酸外其他與三羧酸循環(huán)有關(guān)的氨基酸水平均下降。GABA與谷氨酸可作為丙氨酸的直接合成底物，通過這種厭氧途徑生成2倍于糖酵解產(chǎn)生的ATP，保證供能[115，119]。GABA還具有消除活性氧中間體以及為植物解毒和間接通過H2O2信號作用防止細胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）[120-121]，以及發(fā)揮其他作用。

1.3.7GABA的其他生理作用。

50 mmol/L GABA和不同鹽濃度會對植物幼苗產(chǎn)生不同的影響，當NO3-離子低于 40 mmol/L時，GABA會刺激根伸長，當NO3-離子大于 40 mmol/L時GABA會抑制根伸長。并且GABA刺激低濃度的NO3-吸收，抑制高濃度NO3-的攝取，而GS等酶被氮調(diào)控，以上研究認為氮對調(diào)控植物生長有一定作用[100]。NaCl脅迫下，擬南芥POP2-1突變體對NaCl敏感，使得GABA代謝總體發(fā)生上調(diào)[10]。在NaCl（50 mmol/L）刺激下，植物的糖基化代謝會發(fā)起變化，并影響包括三羧酸循環(huán)、GABA代謝、氨基酸合成和莽草酸介導的次級代謝等發(fā)生變化[122]。較高的鹽離子會導致大豆的多胺氧化降解為GABA[123]。植物GABA受體具有調(diào)節(jié)pH和Al3+的根耐受性[7]。

細菌侵染過程中的植物GAD表達量和γ-羥基丁酸轉(zhuǎn)錄豐度會上升，致使GABA升高[124]。高GABA合成水平的煙草對根癌土壤桿菌C58感染敏感性有所下降。GABA可誘導農(nóng)桿菌ATTKLM操縱子表達，使得N-（3-氧代辛酰基）高絲氨酸內(nèi)酯（OC8HSL）的濃度減少，群體感應信號（或激素）下調(diào)，影響其對植物的毒性[125]。GABA在植物與細菌的信號交流中也發(fā)揮作用，GABA可以抑制細菌內(nèi)Hrpl基因表達（Hrpl基因編碼蛋白使得植物致敏或引起其組織疾病[126]），同時抑制植物體內(nèi)hrp基因表達，使得植物免于過敏反應（hrp：控制植物病原體致病能力，并引起過敏反應[127]）[11]。

此外，GABA還具有催熟作用。GABA可以通過刺激1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸（ACC）合成酶轉(zhuǎn)錄豐度刺激乙烯生物合成[128]。而水澇下乙烯可以通過促進不定根的生長為植物提供氧氣[129]。

高濃度GABA可抑制植物和細菌GABA轉(zhuǎn)氨酶（GABA-T，GABT）突變體的生長，高濃度下可抑制細菌在植物內(nèi)的繁殖[11]。番茄中的GABA-T被抑制會導致GABA的積累，使番茄出現(xiàn)矮小癥[130]。

在動物中，GABA在線粒體中以濃度依賴方式氧化丙酮酸和脂肪提供ATP。GABA也可以通過抑制腫瘤壞死因子介導的活性H2O2增加，從而抑制炎癥的發(fā)生[22]。

2谷氨酸脫羧酶及其基因定點突變的研究

谷氨酸脫羧酶（GAD，glutamic acid decarboxylase）催化谷氨酸生成GABA和二氧化碳，GAD在維生素B6等吡哆醇化合物的輔助下發(fā)揮作用，為一種吡哆醛-5-磷酸（Pyridoxal-5-phosphatemonohydrate，PLP）依賴性酶[131]。其在生物應激反應下大量表達，為生物提供GABA，滿足應激下植物的生存需要[4，42，132]。同時GAD也在生物中存在常態(tài)表達[22]，以滿足生物對碳氮平衡、氨基酸支路和氧化物等的調(diào)控需求。GAD在植物不同組織中的表達水平不同，便于靈活調(diào)控[41]。而在動物中存在一個生物體總GABA濃度循環(huán)[22]。植物受精過程中存在GAD表達濃度梯度依賴的受精方式[133]。

2.1GAD的結(jié)構(gòu)

GAD在微生物和高等生物基因組中通常存在多個GAD編碼基因[134-135]。細菌GAD蛋白一般由460～475個氨基酸殘基組成[136]。GABA在中性條件下僅存于細胞質(zhì)中，而酸性條件下分布于膜上[131]。GAD由3個二聚體組成，分為2層，每層含有3個亞基[137]。以大腸桿菌為例（圖2），其N端的1～57個殘基對二聚體形成和穩(wěn)定起作用，58～346殘基組成大結(jié)構(gòu)域，由8個α螺旋包圍7個β片層的結(jié)構(gòu)域組成，347～466殘基形成小結(jié)構(gòu)域，由4個反向平行的β片層和3個α螺旋組成[137]，其活性位點300～313的殘基在酸性環(huán)境下向活性中心移動，在PLP的幫助下使得活性中心收緊。而C末端16個殘基452～466在中性條件下插入活性中心，而酸性條件下使得活性中心暴露出來提高表達[131，138]。動物GAD結(jié)構(gòu)與微生物類似，而植物GAD其碳末端含有一個Ca/鈣調(diào)結(jié)構(gòu)域，用于Ca2+調(diào)控[4，41-42，139]。

擬南芥與大腸桿菌GAD晶體結(jié)構(gòu)相比，在4個暴露的區(qū)域112～117、160～163、267～273、381～385以及β發(fā)夾結(jié)構(gòu)存在差異（圖3）。大腸桿菌GAD酶β發(fā)夾結(jié)構(gòu)允許底物在低pH進入活性位點，中性條件下β發(fā)夾結(jié)構(gòu)會延伸至活性位點附近[140]。在短乳桿菌（CGMCC1306）中 ，GAD的Y308-E312在入口處呈柔性狀態(tài)[141]。郁凱[142]也發(fā)現(xiàn)由Phe65和Thr215構(gòu)成的底物入口是一個疏水區(qū)域，其形狀和大小決定了底物分子進入活性中心時的正確取向。輔酶PLP對活性位點很重要，PLP具有誘導活性中心構(gòu)像變化、穩(wěn)定蛋白結(jié)構(gòu)以及促進亞基組裝成大分子的功能[138]。而短乳桿菌（CGMCC1306） Ser126、Ser127、Cys168、Ile211、Ser276、His278、Ser321和PLP輔因子在酶的活性中起作用[141]。PLP可以與Lys276形成亞胺鍵，結(jié)合后其吡啶環(huán)位于Gln63和Ala246之間。Lys276與PLP醛基的N形成鹽橋即希夫堿起作用[136，143-144]。GAD存在高度保守的PLP結(jié)合位點 （-RxxxxxxPHKMMxVxLxC-）[139]。PLP吡啶環(huán)通常與Tyr、Trp、Phe、Gln殘基相互作用，PLP磷酸基團與酶的色氨酸和丙氨酸作用[131，136]。Thr64、Phe65、Asn85、Gln166、Phe320、Arg42對催化至關(guān)重要[141]。Arg422對Phe63側(cè)鏈吸引使得α-脫羧不受干擾[136]。而gadB Asn83、Asp86、Thr62、Phe63參與底物與遠端羧基的結(jié)合[140]。gadB活性位點包括Phe63、Ser128、Thr212、Asp243、Ala245、Asp86、His275、Lys276、Arg422，而Cys64、Thr63、Asp86、Asn83等殘基形成的氫鏈有助于底物的識別[131，137]。

注：紅色.112～117氨基酸殘基，藍色.160～163氨基酸殘基，黃色.267～273氨基酸殘基，紫色.381～385氨基酸殘基，彩虹色.β發(fā)夾結(jié)構(gòu)

2.2GAD表達的影響因素及其定點突變的研究

在微生物中，GAD表達主要受pH的影響[4，42，131]。而植物中GAD表達同時受Ca2+調(diào)控和pH調(diào)控的影響[4，42，74]。動物中則通過受體和pH調(diào)控[4，22，42，52]。GAD表達也受多種因素制約如氮壓力、過氧化物中間體、底物水平、GABA的反饋抑制調(diào)節(jié)等。同時其活性也受乙酸等化合物抑制[131]。

近年來，為了解析GAD結(jié)構(gòu)和功能，研究者在GAD的定點突變、酶學特性改善研究方面取得了突破。研究表明，GAD His465對于限定酶的酸性pH適應范圍發(fā)揮重要作用，提高pH時，酶會解聚?；谶@個原理，畢金麗等[145]設(shè)計了包含His465在內(nèi)的6個氨基酸缺失突變，在中性條件下，GAD的表達量上升，且防止了酶的解聚。也有研究者認為其pH范圍的限制與酶在C和N端的協(xié)同性有關(guān)，基于此設(shè)計了E89Q/△His465和C末端14氨基酸殘基的突變體，使GAD在中性條件下活性得到了提高[146]。而林玲[147]研究表明，D88突變體降低了酶活性，推測Asp88是質(zhì)子供體。利用定點突變設(shè)計的S307N突變體，成功地改變了β發(fā)夾結(jié)構(gòu)和酶pH適應性，使得酶活性在中性條件下得到了大幅提高。郁凱[142]利用計算機輔助設(shè)計的突變篩選出20個候選位點，經(jīng)過復篩后得到的C379N突變體明顯提高了酶的熱穩(wěn)定性，酶的半失活溫度提高了5 ℃。田健[148]也以此法篩選出了G194P在內(nèi)的6個提高穩(wěn)定性的突變體。

3GABA的制備方法與應用

3.1GABA的制備可通過生物和化學2種方法制備GABA。化學合成是通過鄰苯二甲酰亞氨鉀在180 ℃下與γ-氯丁氰反應，得到的產(chǎn)物經(jīng)過濃硫酸回流，提純結(jié)晶而得;另一種方法經(jīng)由吡咯烷酮在氫氧化鈣和碳酸氫銨下水解開環(huán)等方法得到?；瘜W合成法由于存在使用危險溶劑和有毒物殘留的不足，不適宜在食品應用領(lǐng)域使用[149-150]。生物合成又分為植物富集和微生物發(fā)酵2種方法。植物富集可以通過植物具有的2種GABA生產(chǎn)途徑完成生產(chǎn)，而微生物發(fā)酵則使用谷氨酸脫羧酶途徑發(fā)酵生產(chǎn)GABA。戴鳳燕等[151]、楊晶晶等[152]利用兩步酶法合成GABA，該方法包括發(fā)芽及均相反應2個階段， 其中發(fā)芽階段是將原料浸泡發(fā)芽; 均相反應階段即在發(fā)芽后一定條件下碾碎原料，在水相中利用釋放的酶生產(chǎn)GABA最高達3.7 mg/g。

3.2GABA的應用

目前GABA作為癲癇、帕金森以及神經(jīng)類等藥物廣泛應用于醫(yī)藥領(lǐng)域。在農(nóng)作物種植中，GABA噴灑在植物表面可增強植物耐寒、耐旱、耐堿、耐澇、耐熱能力，還可進行果實催熟。GABA產(chǎn)品AvxGro很早就用在農(nóng)業(yè)中[4]。而作為食品添加劑在東亞地區(qū)是廣泛關(guān)注的課題。日本和我國也相繼在2001和2009年分別將其作為食品級添加劑[152]。Hayisamaae等[153]認為植物乳桿菌DW12發(fā)酵的紅海藻培養(yǎng)液是一種潛在的飲品，其GABA達1 284 mg/L。日本是最早使用GABA作為食品添加劑的國家，以高GABA含量的茶類、發(fā)芽糙米作為健康食品素材[154]。Kim等[155]也發(fā)現(xiàn)短乳桿菌BH2 GABA產(chǎn)量達194 mmol/L。Seo 等[156]通過短乳桿菌877G的gad基因在大腸桿菌中異源表達，測得較高酶活，在29.57 mmol/L L-谷氨酸鈉中利用短乳桿菌877G和薩克氏乳桿菌795共發(fā)酵得到22.51 mmol/L GABA ，這種方法可作為GABA功能性發(fā)酵食品和乳制品強化的促進劑[157]。我國近年來同樣有許多微生物發(fā)酵生產(chǎn)GABA的嘗試。短乳桿菌NCL912是近年來的一株高產(chǎn)菌株，其GABA濃度達（1005.81±47.88） mmol/L[158]。Huang等[159]從牛奶中分離獲得短乳桿菌CGMCC1306，優(yōu)化培養(yǎng)得到最大酶活性。其后也生產(chǎn)出526.33 mmol/L GABA，以及利用酶定向進化的方法提高GABA產(chǎn)量[160-161]。龔福明等[162]利用植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum ）YM-4-3優(yōu)化，其產(chǎn)量為 15.09 mmol/L。啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae） MJ2的GABA產(chǎn)量最高可達7.539 g/L[163]。趙安琪[164]嘗試利用布氏乳桿菌（Lactobacillus buchneri） WPZ001 gadB基因重組菌將原本搖瓶中GABA的75.5 g/L提升到313.1 g/L。相對于高等生物中極低的GABA生理含量，微生物中發(fā)酵所得遠遠超出這個數(shù)字。微生物中GAD較窄的pH適用范圍，仍限制了GABA在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應用范圍。因此，有必要從多角度開展工作，發(fā)掘更多的基因資源，以克服不足。而利用代謝工程生產(chǎn)GABA具有更大的生產(chǎn)潛力和更低的成本，因而具有較高的經(jīng)濟價值。

4展望

GABA作為生物體常駐的氨基酸一直廣泛并深遠地影響著我們。作為生物體應激響應中關(guān)鍵的中間體和生物體內(nèi)重要的信號傳遞者。從低等到高等生物中呈現(xiàn)從簡單到復雜的有序過程。作為植物以及人體中重要的信號分子，起著承上啟下的作用。尤其是對于高等生物中受體調(diào)節(jié)機制，是多種病理發(fā)病和治療的重要因素。隨著科技的進步，GABA作為一個媒介可以幫助了解更多的應激以及神經(jīng)的生理調(diào)節(jié)過程，更加理性和精準地利用GABA。

參考文獻

[1]ACKERMANN D，KUTSCHER F.-ber die aporrhegmen[J].Hoppe-Seyler′ s Zeitschrift für physiologische Chemie，1910，69（3/4）：265-272.

[2]AWAPARA J.Occurrence of free γ-aminobutyric acid in brain and its formation from L-glutamic acid[J].Tex Rep Biol Med，1950，8（4）：443-447.

[3]ROBERTS E，F(xiàn)RANKEL S.γ-Aminobutyric acid in brain：its formation from glutamic acid[J].J Biol Chem，1950，187：55-63.

[4]SHELP B J，BOWN A W，MCLEAN M D.Metabolism and functions of γ-aminobutyric acid[J].Trends Plant Sci，1999，4（11）：446-452.

[5]MAJUMDAR D，GUHA S.Conformation，electrostatic potential and pharmacophoric pattern of GABA （γ-aminobutyric acid） and several GABA inhibitors[J].J Mol Struc-theochem，1988，180：125-140.

[6]CHRISTENSEN H N，GREENE A A，KAKUDA D K，et al.Special transport and neurological significance of two amino acids in a configuration conventionally designated as D[J].J Exp Biol，1994，196（1）：297-305.

[7]RAMESH S A，TYERMAN S D，XU B，et al.GABA signalling modulates plant growth by directly regulating the activity of plant-specific anion transporters[J].Nat Commun，2015，6：1-9.

[8]YOON Y E，KUPPUSAMY S，CHO K M，et al.Influence of cold stress on contents of soluble sugars，vitamin C and free amino acids including γ-aminobutyric acid （GABA） in spinach （Spinacia oleracea）[J].Food Chem，2017，215：185-192.

[9]AKCAY N，BOR M，KARABUDAK T，et al.Contribution of γ amino butyric acid （GABA） to salt stress responses of Nicotiana sylvestris CMSII mutant and wild type plants[J].J Plant Physiol，2012，169（5）：452-458.

[10]RENAULT H，ROUSSEL V，EL AMRANI A，et al.The Arabidopsis pop2-1 mutant reveals the involvement of GABA transaminase in salt stress tolerance[J].BMC Plant Biol，2010，10（1）：1-16.

[11]PARK D H，MIRABELLA R，BRONSTEIN P A，et al.Mutations in γ-aminobutyric acid （GABA） transaminase genes in plants or Pseudomonas syringae reduce bacterial virulence[J].Plant J，2010，64（2）：318-330.

[12]ROBERTS E.γ-aminobutyric acid and nervous system function-A perspective[J].Biochem Pharmacol，1974，23（19）：2637-2649.

[13]DAVIES W E.The distribution of GABA transaminase-containing neurones in the cat cochlear nucleus[J].Brain Res，1975，83（1）：27-33.

[14]CASTANIE-CORNET M P，PENFOUND T A，SMITH D，et al.Control of acid resistance inEscherichia coli[J].J Bacteriol，1999，181（11）：3525-3535.

[15]SANDERS J W，LEENHOUTS K，BURGHOORN J，et al.A chloride‐inducible acid resistance mechanism in Lactococcus lactis and its regulation[J].Mol Microbiol，1998，27（2）：299-310.

[16]SHELP B J，BOZZO G G，TROBACHER C P，et al.Hypothesis/review：Contribution of putrescine to 4-aminobutyrate （GABA） production in response to abiotic stress[J].Plant Sci，2012，193/194：130-135.

[17]ZAREI A，TROBACHER C P，SHELP B J.Arabidopsis aldehyde dehydrogenase 10 family members confer salt tolerance through putrescine-derived 4-aminobutyrate （GABA） production[J].Sci Rep，2016，6：1-11.

[18]MACGREGOR K B，SHELP B J，PEIRIS S，et al.Overexpression of glutamate decarboxylase in transgenic tobacco plants deters feeding by phytophagous insect larvae[J].J Chem Ecol，2003，29（9）：2177-2182.

[19]BOWN A W，MACGREGOR K B ，SHELP B J.Gamma-aminobutyrate：Defense against invertebrate pests？[J].Trends Plant Sci，2006，11（9）：424-427.

[20]KONNO K，HIRAYAMA C，YASUI H，et al.GABA，β-alanine and glycine in the digestive juice of privet-specialist insects：Convergent adaptive traits againstplant iridoids[J].J Chem Ecol，2010，36（9）：983-991.

[21]XU Y，XU M Y，LI X.Modulation of γ-aminobutyric acid on painful sense in central nervous system of morphine-dependent rats[J].Neurosci Bull，2008，24（5）：278-282.

[22]SEN S，ROY S，BANDYOPADHYAY G，et al.γ-Aminobutyric acid is synthesized and released by the endothelium：Potential implications[J].Circ Res，2016，119（5）：621-634.

[23]BOUCH N，F(xiàn)ROMM H.GABA in plants：Just a metabolite？[J].Trends Plant Sci，2004，9（3）：110-115.

[24]MAPELLI S，BRAMBILLA I，BELLONI V，et al.Changes of free amino acids in leaf sap of trees subjected to flooding and drought stresses[J].Acta Hortic，2001，544（544）：233-238.

[25]HILDEBRANDT T M，NUNES NESI A，ARA U′JO W L，et al.Amino acid catabolism in plants[J].Mol Plant，2015，8（11）：1563-1579.

[26]BOULLAND J L，CHAUDHRY F A.Ontogenetic changes in the distribution of the vesicular GABA transporter VGAT correlate with the excitation/inhibition shift of GABA action[J].Neurochem Int，2012，61（4）：506-516.

[27]BUCKINGHAM S D，BIGGIN P C，SATTELLE B M，et al.Insect GABA receptors：Splicing，editing and targeting by antiparasitics and insecticides[J].Mol Pharmacol，2005，68（4）：942-951.

[28]DURKIN M M，GUNWALDSEN C A，BOROWSKY B，et al.An in situ hybridization study of the distribution of the GABAB2 protein mRNA in the rat CNS[J].Brain Res Mol Brain Res，1999，71（2）：185-200.

[29]BARNARD E A，SKOLNICK P，OLSEN R W，et al.International Union of Pharmacology.XV.Subtypes of γ-aminobutyric acid A receptors：Classification on the basis of subunit structure and receptor function[J].Pharmacol Rev，1998，50（2）：291-313.

[30]LUSCHER B，F(xiàn)UCHS T，KILPATRICK C L.GABAA receptor trafficking-mediated plasticity of inhibitory synapses[J].Neuron，2011，70（3）：385-409.

[31]SIEGHART W，SPERK G.Subunit composition，distribution and function of GABA-A receptor subtypes[J].Curr Top Med Chem，2002，2（8）：795-816.

[32]OLSEN R W，SIEGHART W.International Union of Pharmacology.LXX.Subtypes of γ-aminobutyric acidA receptors：Classification on the basis of subunit composition，pharmacology，and function[J].Update Pharmacol Rev，2008，60（3）：243-260.

[33]SIEGHART W.Allosteric modulation of GABAA receptors via multiple drug-binding sites[J].Adv Pharmacol，2015，72：53-96.

[34]OLSEN R W.GABAA receptor：positive and negative allosteric modulators[J].Neuropharmacology，2018，136（Pt A）：10-22.

[35]RAJAGOPAL L，SONI D，MELTZER H Y.Neurosteroid pregnenolone sulfate，alone，and as augmentation of lurasidone or tandospirone，rescues phencyclidine-induced deficits in cognitive function and social interaction[J].Behav Brain Res，2018，350：31-43.

[36]KφLLER K S.Structure/activity relationship of alpha-conotoxins targeting GABAB receptor[D].Tromso，Norway：Universitetet i Tromso，2011.

[37]EMSON P C.GABAB receptors：Structure and function[J].Prog Brain Res，2007，160：43-57.

[38]BOLTON M.Alternations of NMDA and GABAB receptor function in development：A potential animal model of schizophrenia[D].Nevada：University of Nevada，2013.

[39]FILIP M，F(xiàn)RANKOWSKA M.GABA（B） receptors in drug addiction[J].Pharmacol Rep，2008，60（6）：755-770.

[40]STRAESSLE A，LOUP F，ARABADZISZ D，et al.Rapid and long‐term alterations of hippocampal GABAB receptors in a mouse model of temporal lobe epilepsy[J].European J Neurosci，2003，18（8）：2213-2226.

[41]LEE J H，KIM Y J，JEONG D Y，et al.Isolation and characterization of a Glutamate decarboxylase （GAD） gene and their differential expression in response to abiotic stresses from Panax ginseng C.A.Meyer[J].Mol Biol Rep，2010，37（7）：3455-3463.

[42]KINNERSLEY A M，TURANO F J.Gamma aminobutyric acid （GABA） and plant responses to stress[J].Crit Rev Plant Sci，2000，19（6）：479-509.

[43]GILLIHAM M，TYERMAN S D.Linking metabolism to membrane signaling：The GABA-malate connection[J].Trends Plant Sci，2016，21（4）：295-301.

[44]SHARMA T，DREYER I，KOCHIAN L，et al.The ALMT family of organic acid transporters in plants and their involvement in detoxification and nutrient security[J].Front Plant Sci，2016，7：1-12.

[45]LIU J，ZHOU M X.The ALMT gene family performs multiple functions in plants[J].Agronomy，2018，8（2）：1-18.

[46]AWAPARA J，LANDUA A J，F(xiàn)UERST R，et al.Free γ-aminobutyric acid in brain[J].J Biol Chem 1950，187：35-39.

[47]KRANTIS A，HARDING R K.The distribution of GABA-transaminase-dehydrogenase activity in the myenteric plexus of rat small intestine：A histochemical analysis[J].Neurosci Lett，1986，64（1）：85-90.

[48]ERD S L，WOLF J R.Releasable，non-neuronal GABA pool in rat stomach[J].Eur J Pharmacol，1988，156（1）：165-168.

[49]TRANDABURU I，KUMMER W，TRANDABURU T.The immunocytochemical detection of gamma-aminobutyric acid （GABA） in the pancreas of amphibian rana esculenta;light-and electron-microscopic observations[J].Studia Universitatis Vasile Goldis Seria Stiintele Vietii （Life Sciences Series），2010，20（1）：5-11.

[50]CHEN G，TROMBLEY P Q，VAN DEN POL A N.Excitatory actions of GABA in developing rat hypothalamic neurones[J].J Physiol，1996，494（2）：451-464.

[51]IORIO L C，BARNETT A，LEITZ F H，et al.SCH 23390，a potential benzazepine antipsychotic with unique interactions on dopaminergic systems[J].J Pharmacol Exp Ther，1983，226（2）：462-468.

[52]LUPINSKY D，MOQUIN L，GRATTON A.Interhemispheric regulation of the rat medial prefrontal cortical glutamate stress response：Role of local GABA-and dopamine-sensitive mechanisms[J].Psychopharmacology，2017，234（3）：353-363.

[53]BEHAR T N，LI Y X，TRAN H T，et al.GABA stimulates chemotaxis and chemokinesis of embryonic cortical neurons via calcium-dependent mechanisms[J].J Neurosci，1996，16（5）：1808-1818.

[54]LOTURCO J J，OWENS D F，HEATH M J S，et al.GABA and glutamate depolarize cortical progenitor cells and inhibit DNA synthesis[J].Neuron，1995，15（6）：1287-1298.

[55]HAYDAR T F，WANG F，SCHWARTZ M L，et al.Differential modulation of proliferation in the neocortical ventricular and subventricular zones[J].J Neurosci，2000，20（15）：5764-5774.

[56]YOGEESWARI P，PATEL S K，REDDY I V，et al.GABA derivatives for the treatment of epilepsy and neuropathic pain：A synthetic integration of GABA in 1，2，4-Triazolo-2H-one nucleus[J].Biomedicine and Aging Pathology，2012，2（2）：31-40.

[57]LLOYD K G，BOSSI L，MORSELLI P L，et al.Alterations of GABA-mediated synaptic transmission in human epilepsy[J].Adv Neurol，1986，44：1033-1044.

[58]KOKAIA M，AEBISCHER P，ELMR E，et al.Seizure suppression in kindling epilepsy by intracerebral implants of GABA-but not by noradrenaline-releasing polymer matrices[J].Exp Brain Res，1994，79（2）：385-394.

[59]HIRSCH J C，AGASSANDIAN C，MERCHAN-PEREZ A，et al.Deficit of quantal release of GABA in experimental models of temporal lobe epilepsy[J].Nat Neurosci，1999，2（6）：499-500.

[60]BUHL E H，OTIS T S，MODY I.Zinc-induced collapse of augmented inhibition by GABA in a temporal lobe epilepsy model[J].Science，1996，271（5247）：369-373.

[61]CZUCZWAR S J，PATSALOS P N.The new generation of GABA enhancers.Potential in the treatment of epilepsy[J].CNS Drugs，2001，15（5）：339-350.

[62]TASKER J G，DUDEK F E.Electrophysiology of GABA-mediated synaptic transmission and possible roles in epilepsy[J].Neurochem Res，1991，16（3）：251-262.

[63]PEARL P L，SHUKLA L，THEODORE W H，et al.Epilepsy in succinic semialdehyde dehydrogenase deficiency，a disorder of GABA metabolism[J].Brain Dev，2011，33（9）：796-805.

[64]ESCLAPEZ M，HOUSER C R.Up-regulation of GAD65 and GAD67 in remaining hippocampal GABA neurons in a model of temporal lobe epilepsy[J].J Comp Neurol，1999，412（3）：488-505.

[65]OH C H，OH S H.Effects of germinated brown rice extracts with enhanced levels of GABA on cancer cell proliferation and apoptosis[J].J Med Food，2004，7（1）：19-23.

[66]LIN C C，CHUNG Y C，HSU C P.GABA tea extract inhibit the colony formation and invasion of colorectal cancer cells[J].MOJ Food Process Technol，2017，5（4）：349-351.

[67]SOLORZANO S R，IMAZ-ROSSHANDLER I，CAMACHO-ARROYO I，et al.GABA promotes gastrin-releasing peptide secretion in NE/NE-like cells：Contribution to prostate cancer progression[J].Sci Rep，2018，8（1）：1-13.

[68]YOUNG S Z，BORDEY A.GABAS control of stem and cancer cell proliferation in adult neural and peripheral niches[J].Physiology，2009，24（3）：171-185.

[69]AL-WADEI H A N，AL-WADEI M H，ULLAH M F，et al.Celecoxib and GABA cooperatively prevent the progression of pancreatic cancer in vitro and in xenograft models of stress-free and stress-exposed Mice[J].PLoS One，2012，7（8）：1-11.

[70]MA P J，LI T，JI F C，et al.Effect of GABA on blood pressure and blood dynamics of anesthetic rats[J].Int J Clin Exp Med，2015，8（8）：14296-14302.

[71]MABUNGA D F N，GONZALES E L T，KIM H J，et al.Treatment of GABA from fermented rice germ ameliorates caffeine-induced sleep disturbance in mice[J].Biomol Ther （Seoul），2015，23（3）：268-274.

[72]TIAN J，DANG H，KAUFMAN D L.Combining antigen-based therapy with GABA treatment synergistically prolongs survival of transplanted β-cells in diabetic NOD mice[J].PLoS One，2011，6（9）：1-5.

[73]ISRAEL M.Inadequate pancreatic GABA controls that explain cancer metabolism[J].Acta scientific cancer biology，2018，2：23-26.

[74]SCHOLZ S S，REICHELT M，MEKONNEN D W，et al.Insect herbivory-elicited GABA accumulation in plants is a wound-induced，direct，systemic，and jasmonate-independent defense response[J].Front Plant Sci，2015，6：1-11.

[75]XU L，CAI W X，XU B J.A systematic assesdment on vitamins （B2，B 12） and GABA profiles in fermented soy products marketed in China[J].J Food Process Pres，2017，41（5）：e13126.

[76]MIYASHITA Y，GOOD A G.Contribution of the GABA shunt to hypoxia-induced alanine accumulation in roots of Arabidopsis thaliana[J].Plant Cell Physiol，2008，49（1）：92-102.

[77]AGHDAM M S，F(xiàn)ARD J R.Melatonin treatment attenuates postharvest decay and maintains nutritional quality of strawberry fruits （Fragaria× anannasa cv.Selva） by enhancing GABA shunt activity[J].Food Chem，2017，221：1650-1657.

[78]CARROLL A D，F(xiàn)OX G G，LAURIE S，et al.Ammonium assimilation and the role of γ-aminobutyric acid in pH homeostasis in carrot cell suspensions[J].Plant Physiol，1994，106（2）：513-520.

[79]KRULWICH T A，SACHS G，PADAN E.Molecular aspects of bacterial pH sensing and homeostasis[J].Nat Rev Microbiol，2011，9（5）：330-343.

[80]KAILA K，SAARIKOSKI J，VOIPOIO J.Mechanism of action of GABA on intracellular pH and on surface pH in crayfish muscle fibres[J].J Physiol，1990，427（1）：241-260.

[81]CRAWFORD L A，BOWN A W，BREITKREUZ K E，et al.The synthesis of γ-aminobutyric acid in response to treatments reducing cytosolic pH[J].Plant Physiol，1994，104（3）：865-871.

[82]CHEN J C，CHESLER M.Modulation of extracellular pH by glutamate and GABA in rat hippocampal slices[J].J Neurophysiol，1992，67（1）：29-36.

[83]KOLLENDA M C，SCARBOROUGH R M，GERBES A L.Discrimination and quantification of glomerular receptor subtypes for atrial natriuretic factor （ANF）[J].J Recept Res，1991，11（1/2/3/4）：259-273.

[84]王曉冬，解備濤，譚偉明，等.γ 氨基丁酸對冬小麥籽粒灌漿期耐熱性及產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[J].麥類作物學報，2009，29（4）：623-626.

[85]黃娟.高溫脅迫下外源GABA對黃瓜幼苗生長的影響[J].長江蔬菜，2016（8）：73-78.

[86]BISWAS S，PODDAR M K.Does GABA act through dopaminergic/cholinergic interaction in the regulation of higher environmental temperature-induced change in body temperature？[J].Methods Find Exp Clin Pharmacol，1990，12（5）：303-307.

[87]BISWAS S，PODDAR M K.Repeated exposure to high environmental temperature changes brain regional GABA metabolism[J].Methods Find Exp Clin Pharmacol，1990，12（6）：395-400.

[88]YOSHIKAWA T，MIYAGAWA T.Effect of oral administration of GABA on temperature regulation in humans during rest and exercise at high ambient temperature[J].Osaka City Med J，2009，55：99-108.

[89]LARCHER W，BAUER H.Ecological significance of resistance to low temperature[M]//LANGE O L，NOBEL P S，OSMOND C B，et al.Physiological plant ecology I：Responses to the physical environment.New York：Springer，1981：403-437.

[90]FUJISAKI T，WAKATSUKI H，KUDOH M，et al.Irreversible impairment of inhibitory neurons and nitric oxide release in the neocortex produced by low temperature and hypoxia in vitro[J].Neurosci Res，1999，33（4）：307-316.

[91]BISWAS S，PODDAR M K.Effect of short-and long-term exposure to low environmental temperature on brain regional GABA metabolism[J].Neurochem Res，1990，15（8）：815-820.

[92]BUSTAMANTE C A，MONTI L L，GABILONDO J，et al.Differential metabolic rearrangements after cold storage are correlated with chilling injury resistance of peach fruits[J].Front Plant Sci，2016，7：1478.

[93]OBATA T，F(xiàn)ERNIE A R.The use of metabolomics to dissect plant responses to abiotic stresses[J].Cell Mol Life Sci，2012，69（19）：3225-3243.

[94]KAPLAN F，KOPKA J，SUNG D Y，et al.Transcript and metabolite profiling during cold acclimation of Arabidopsis reveals an intricate relationship of cold‐regulated gene expression with modifications in metabolite content[J].Plant J，2007，50（6）：967-981.

[95]AGHDAM M S，NADERI R，JANNATIZADEH A，et al.Impact of exogenous GABA treatments on endogenous GABA metabolism in anthurium cut flowers in response to postharvest chilling temperature[J].Plant Physiol Biochem，2016，106：11-15.

[96]BOUCH N，F(xiàn)AIT A，BOUCHEZ D，et al.Mitochondrial succinic-semialdehyde dehydrogenase of the γ-aminobutyrate shunt is required to restrict levels of reactive oxygen intermediates in plants[J].Proc Natl Acad Sci USA，2003，100（11）：6843-6848.

[97]CAO J，BARBOSA J M，SINGH N K，et al.GABA shunt mediates thermotolerance in Saccharomyces cerevisiae by reducing reactive oxygen production[J].Yeast，2013，30（4）：129-144.

[98]FAIT A，YELLIN A，F(xiàn)ROMM H.GABA shunt deficiencies and accumulation of reactive oxygen intermediates：Insight from Arabidopsis mutants[J].FEBS Lett，2005，579（2）：415-420.

[99]INKHAM C，SUEYOSHI K，OHTAKE N，et al.Effects of temperature and nitrogen sources on growth and nitrogen assimilation of Curcuma alismatifolia Gagnep[J].Thai journal of agricultural science，2011，44（3）：145-153.

[100]BARBOSA J M，SINGH N K，CHERRY J H，et al.Nitrate uptake and utilization is modulated by exogenous γ-aminobutyric acid in Arabidopsis thaliana seedlings[J].Plant Physiol Biochem，2010，48（6）：443-450.

[101]TURANO F J，F(xiàn)ANG T K.Characterization of two glutamate decarboxylase cDNA clones from Arabidopsis[J].Plant Physiol，1998，117（4）：1411-1421.

[102]WANG Y S，LUO Z S，MAO L C，et al.Contribution of polyamines metabolism and GABA shunt to chilling tolerance induced by nitric oxide in cold-stored banana fruit[J].Food Chem，2016，197：333-339.

[103]SERRAJ R，SHELP B J，SINCLAIR T R.Accumulation of γ-aminobutyric acid in nodulated soybean in response to drought stress[J].Physiol Plantarum，1998，102（1）：79-86.

[104]FAES P，NIOGRET M F，MONTES E，et al.Transcriptional profiling of genes encoding GABA-transaminases in Brassica napus reveals their regulation by water deficit[J].Environ Exp Bot，2015，116：20-31.

[105]FAROOQ M，WAHID A，KOBAYASHI N，et al.Plant drought stress：Effects，mechanisms and management[J].Agron Sustain Dev，2009，29（1）：185-212.

[106]GUO P，BAUM M，GRANDO S，et al.Differentially expressed genes between drought-tolerant and drought-sensitive barley genotypes in response to drought stress during the reproductive stage[J].J Exp Bot，2009，60（12）：3531-3544.

[107]KRISHNAN S，LASKOWSKI K，SHUKLA V，et al.Mitigation of drought stress damage by exogenous application of a non-protein amino acid γ-aminobutyric acid on perennial ryegrass[J].J Amer Soc Hort Sci，2013，138（5）：358-366.

[108]TEMPLER S E，AMMON A，PSCHEIDT D，et al.Metabolite profiling of barley flag leaves under drought and combined heat and drought stress reveals metabolic QTLs for metabolites associated with antioxidant defense[J].J Exp Bot，2017，68（7）：1697-1713.

[109]YONG B，XIE H，LI Z，et al.Exogenous Application of GABA improves PEG-induced drought tolerance positively associated with GABA-shunt，polyamines，and proline metabolism in white clover[J].Front Physiol，2017，8：1107.

[110]REZAEI-CHIYANEH E，SEYYEDI S M，EBRAHIMIAN E，et al.Exogenous application of γ-aminobutyric acid （GABA） alleviates the effect of water deficit stress in black cumin （Nigella sativa L.）[J].Ind Crop Prod，2018，112：741-748.

[111]SH H S，ABOU ZEID S T，SIAM H S，et al.Effect of waterlogging and organic matter addition on water soluble Si，pH and Eh values[J].Int J Chem Tech Res，2015，8（4）：1557-1562.

[112]KULKARNI S S，CHAVAN P D.Study of some aspects of anaerobic metabolism in roots of finger millet and rice plants subjected to waterlogging stress[J].Int J Bot，2013，9（2）：80-85.

[113]SCHMIDT S，STEWART G R.Waterlogging and fire impacts on nitrogen availability and utilization in a subtropical wet heathland （wallum）[J].Plant Cell Envi，1997，20（10）：1231-1241.

[114]JACKSON M B，HALL K C.Early stomatal closure in waterlogged pea plants is mediated by abscisic acid in the absence of foliar water deficits[J].Plant Cell Envi，1987，10（2）：121-130.

[115]SUBBARAYAN K，ROLLETSCHEK H，SENULA A，et al.Influence of oxygen deficiency and the role of specific amino acids in cryopreservation of garlic shoot tips[J].BMC Biotechnol，2015，15（1）：1-9.

[116]夏慶平，高洪波，李敬蕊.γ-氨基丁酸（GABA）對低氧脅迫下甜瓜幼苗光合作用和葉綠素熒光參數(shù)的影響[J].應用生態(tài)學報，2011，22（4）：999-1006.

[117]王春燕，李敬蕊，夏慶平，等.外源γ-氨基丁酸（GABA）對低氧脅迫下甜瓜幼苗根系GABA代謝及氨基酸含量的影響[J].應用生態(tài)學報，2014，25（7）：2011-2018.

[118]ZHANG X C，SHABALA S，KOUTOULIS A，et al.Waterlogging tolerance in barley is associated with faster aerenchyma formation in adventitious roots[J].Plant soil，2015，394（1/2）：355-372.

[119]ROCHA M，LICAUSI F，ARAUJO W L，et al.Glycolysis and the tricarboxylic acid cycle are linked by alanine aminotransferase during hypoxia induced by waterlogging of Lotus japonicus[J].Plant Physiol，2010，152（3）：1501-1513.

[120]JAEGER C，GESSLER A，BILLER S，et al.Differences in C metabolism of ash species and provenances as a consequence of root oxygen deprivation by waterlogging[J].J Exp Bot，2009，60（15）：4335-4345.

[121]SHABALA S，SHABALA L，BARCELO J，et al.Membrane transporters mediating root signalling and adaptive responses to oxygen deprivation and soil flooding[J].Plant Cell Environ，2014，37（10）：2216-2233.

[122]ZHANG J T，ZHANG Y，DU Y，et al.Dynamic metabonomic responses of tobacco （Nicotiana tabacum） plants to salt stress[J].J Proteome Res，2011，10（4）：1904-1914.

[123]XING S G，JUN Y B，HAU Z W，et al.Higher accumulation of γ-aminobutyric acid induced by salt stress through stimulating the activity of diamine oxidases in Glycine max （L.） Merr.roots[J].Plant Physiol Biochem，2007，45（8）：560-566.

[124]DIMLIO G^LU G，DA S Z A，BOR M，et al.The impact of GABA in harpin-elicited biotic stress responses in Nicotiana tabaccum[J].J Plant Physiol，2015，188：51-57.

[125]CHEVROT R，ROSEN R，HAUDECOEUR E，et al.GABA controls the level of quorum-sensing signal in Agrobacterium tumefaciens[J].Proc Natl Acad Sci USA，2006，103（19）：7460-7464.

[126]WEI Z M，BEER S V.hrpL activates Erwinia amylovora hrp gene transcription and is a member of the ECF subfamily of sigma factors[J].J Bacteriol，1995，177（21）：6201-6210.

[127]LINDGREN P B.The role of hrp genes during plant-bacterial interactions[J].Annu Rev Phytopathol，1997，35（1）：129-152.

[128]KATHIRESAN A，TUNG P，CHINNAPPA C C，et al.γ-aminobutyric acid stimulates ethylene biosynthesis in sunflower[J].Plant Physiol，1997，115（1）：129-135.

[129]VOESENEK L A C J，VAN DER VEEN R.The role of phytohormones in plant stress：Too much or too little water[J].Acta Bot Neerl，1994，43（2）：91-127.

[130]KOIKE S，MATSUKURA C，TAKAYAMA M，et al.Suppression of γ-aminobutyric acid （GABA） transaminases induces prominent GABA accumulation，dwarfism and infertility in the tomato （Solanum lycopersicum L.）[J].Plant Cell Physiol，2013，54（5）：793-807.

[131]CAPITANI G，DE BIASE D，AURIZI C，et al.Crystal structure and functional analysis of Escherichia coli glutamate decarboxylase[J].EMBO J，2003，22（16）：4027-4037.

[132]ROOHINEJA S，MIRHOSSEINI H，SAARI N，et al.Evaluation of GABA，crude protein and amino acid composition from different varieties of Malaysian's brown rice[J].Aust J Crop Sci，2009，3（4）：184-190.

[133]YU G H，ZOU J，F(xiàn)ENG J，et al.Exogenous γ-aminobutyric acid （GABA） affects pollen tube growth via modulating putative Ca2+-permeable membrane channels and is coupled to negative regulation on glutamate decarboxylase[J].J Exp Bot，2014，65（12）：3235-3248.

[134]BU D F，ERLANDER M G，HITZ B C，et al.Two human glutamate decarboxylases，65-kDa GAD and 67-kDa GAD，are each encoded by a single gene[J].Proc Natl Acad Sci USA，1992，89（6）：2115-2119.

[135]SMITH D K，KASSAM T，SINGH B，et al.Escherichia coli has two homologous glutamate decarboxylase genes that map to distinct loci[J].J Bacteriol，1992，174（18）：5820-5826.

[136]SUKHAREVA B S，MAMAEVA O K.Glutamate decarboxylase：Computer studies of enzyme evolution[J].Biochemistry （Mosc），2002，67（10）：1180-1188.

[137]DUTYSHEV D I，DARII E L，F(xiàn)OMENKOVA N P，et al.Structure of Escherichia coli glutamate decarboxylase （gadAlpha） in complex with glutarate at 2.05 angstroms resolution[J].Acta Crystallogr D Biol Crystallogr，2005，61（3）：230-235.

[138]BAZHULINA N P，DARII E L，LOBACHEV V M，et al.Structure of glutamate decarboxylase from E.coli：Spectral studies[J].J Biomol Struct Dyn，2002，19（6）：999-1006.

[139]UENO H.Enzymatic and structural aspects on glutamate decarboxylase[J].J Mol Catal B：Enzym，2000，10（1/2/3）：67-79.

[140]GUT H，DOMINICI P，PILATI S，et al.A common structural basis for pH- and calmodulin-mediated regulation in plant glutamate decarboxylase[J].J Mol Biol，2009，392（2）：334-351.

[141]HUANG J，F(xiàn)ANG H，GAI Z C，et al.Lactobacillus brevis CGMCC 1306 glutamate decarboxylase：Crystal structure and functional analysis[J].Biochem Bioph Res Co，2018，503（3）：1703-1709.

[142]郁凱.以計算機輔助分子設(shè)計方法改造谷氨酸脫羧酶的研究[D].杭州：浙江大學，2013.

[143]TRAMONTI A，JOHN R A，BOSSA F，et al.Contribution of Lys276 to the conformational flexibility of the active site of glutamate decarboxylase from Escherichia coli[J].Eur J Biochem，2002，269（20）：4913-4920.

[144]MARTIN D L，WU S J，MARTIN S B.Glutamate-dependent active‐site labeling of brain glutamate decarboxylase[J].J Neurochem，1990，55（2）：524-532.

[145]畢金麗，劉婭，王建平，等.大腸桿菌L-谷氨酸脫羧酶定點突變及其酶學性質(zhì)初步研究[J].食品工業(yè)科技，2014，35（19）：162-167.

[146]高翠娟.定向突變谷氨酸脫羧酶及其生物合成γ-氨基丁酸的研究[J].中國農(nóng)業(yè)科技導報，2016，18（2）：59-64.

[147]林玲.利用定向進化及半理性設(shè)計提高谷氨酸脫羧酶催化活性的研究[D].杭州：浙江大學，2013.

[148]田健.計算機輔助分子設(shè)計提高蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性的研究[D].北京：中國農(nóng)業(yè)科學院，2011.

[149]梁恒宇，鄧立康，林海龍，等.新資源食品--γ-氨基丁酸（GABA）的研究進展[J].食品研究與開發(fā)，2013，34（15）：119-123.

[150]γ-氨基丁酸（GABA）在食品工業(yè)中的應用研究[J].飲料工業(yè)，2012，15（1）：11-14.

[151]戴鳳燕，繆冶煉，陳介余，等.兩步酶法生產(chǎn)γ-氨基丁酸的研究[J].中國食品學報，2012，12（2）：46-52.

[152]楊晶晶，劉英，崔秀明，等.高效液相色譜法測定三七地上部分γ-氨基丁酸的含量[J].中國中藥雜志，2014，39（4）：606-609.

[153]HAYISAMAAE W，KANTACHOTE D，BHONGSUWAN D，et al.A potential synbiotic beverage from fermented red seaweed （Gracilaria fisheri） using Lactoba cillus plantarum DW12[J].Int Food Res J，2014，21（5）：1789-1796.

[154]宋偉，馬霞，張柏林. γ-氨基丁酸的生理功效及其在乳品中的強化途徑[J].乳業(yè)科學與技術(shù)，2008，31（6）：297-302.

[155]KIM S H，SHIN B H，KIM Y H，et al.Cloning and expression of a full-length glutamate decarboxylase gene from Lactobacillus brevis BH2[J].Biotechnol Bioproc E，2007，12（6）：707-712.

[156]SEO M J，NAM Y D，LEE S Y，et al.Expression and characterization of a glutamate decarboxylase from Lactobacillus brevis 877g producing γ-aminobutyric acid[J].B Chem Soc Jpn，2013，77（4）：853-856.

[157]SEO MJ，NAM YD，PARK SL，et al.γ-aminobutyric acid production in skim milk co-fermented with Lactobacillus brevis 877G and Lactobacillus sakei 795[J].Food Sci Bio Technol，2013，22（3）：751-755.

[158]LI H X，QIU T，HUANG G D，et al.Production of gamma-aminobutyric acid by Lactobacillus brevis NCL912 using fed-batch fermentation[J].Microb Cell Fact，2010，9（1）：1-9.

[159]HUANG J，MEI L H，SHENG Q，et al.Purification and characterization of glutamate decarboxylase of Lactobacillus brevis CGMCC 1306 isolated from fresh milk[J].Chinese J Chem Eng，2007，15（2）：157-161.

[160]PENG C L，HUANG J，HU S，et al.A two-stage ph and temperature control with substrate feeding strategy for production of gamma-aminobutyric acid by Lactobacillus brevis CGMCC 1306[J].Chinese J Chem Eng，2013：1190-1194.

[161]LIN L，HU S，YU K，et al.Enhancing the activity of glutamate decarboxylase from Lactobacillus brevis by directed evolution[J].Chinese J Chem Eng，2014，22（11/12）：1322-1327.

[162]龔福明，柳陳堅 李曉然.植物乳桿菌 ym-4-3 發(fā)酵合成γ-氨基丁酸的條件優(yōu)化[J].昆明理工大學學報（自然科學版），2017，42（4）： 63-72.

[163]李杰.生物合成γ-氨基丁酸酵母菌谷氨酸脫羧酶基因的克隆及表達[D].金華：浙江師范大學，2009.

[164]趙安琪.微生物發(fā)酵法高效生產(chǎn) γ-氨基丁酸的研究[D].無錫：江南大學，2017.