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來源：生物谷原創(chuàng) 2022-12-12 10:20 基于寡核苷酸的基因治療(OGT)是一種基因治療的變體，它使用短的合成DNA、RNA或它們的化學(xué)類似物與特定的RNA或DNA靶標(biāo)雜交，然后將其滅活。 基于寡核苷酸的基因治療(OGT)是一種基因治療的變體，它使用短的合成DNA、RNA或它們的化學(xué)類似物與特定的RNA或DNA靶標(biāo)雜交，然后將其滅活。人們認(rèn)為，OGT具有將小分子藥物的低免疫原性與蛋白質(zhì)藥物(如抗體)識別靶點的特異性和有效性相結(jié)合的潛力。 OGT已經(jīng)發(fā)展了40多年。它的目的是抑制導(dǎo)致人類疾病發(fā)展或干擾常規(guī)治療(例如抗藥性)的基因。OGT藥物包括反義寡核苷酸(ASO試劑)、小干擾RNA(SiRNA)、核酶(Rz)、脫氧核酶(DZ)和CRISPR/Cas。到目前為止，全球藥品市場提供了10種ASO制劑和4種siRNAs用于治療遺傳疾病和巨細(xì)胞病毒感染。然而，盡管在臨床前和臨床研究中取得了重大進(jìn)展，但還沒有一種抗癌OGT藥物被批準(zhǔn)用于臨床。
圖片來源：https://pubmed.ncbi.nlm./36276652/ 近日，來自ITMO大學(xué)的研究者們在Theranostics雜志上發(fā)表了題為“Specificity of oligonucleotide gene therapy (OGT) agents”的綜述性文章，該綜述總結(jié)了寡核苷酸基因治療(OGT)藥物的特異性。 寡核苷酸基因治療(OGT)藥物(如反義、脫氧核酶、siRNA和CRISPR/Cas)是很有前途的治療工具。盡管進(jìn)行了廣泛的努力，但只有幾種OGT藥物被批準(zhǔn)用于臨床。除了有效傳遞到靶細(xì)胞的問題外，雜交特異性是OGT試劑的一個潛在限制。 為了確保緊密結(jié)合，一個典型的OGT試劑與一個獨特的靶向序列的15-25個核苷酸片段雜交。然而，這種長度的雜交種在生理條件下可以容忍一個或多個錯配，這一問題被稱為親和力/特異性困境。 在本研究中，研究者通過在體外、動物模型和臨床研究中分析OGT雜交依賴的脫靶效應(yīng)(HD OTE)來評估這個問題的規(guī)模。除脫氧核酶外，所有OGT試劑在體外都表現(xiàn)出HD OTE，最全面的證據(jù)表明siRNA和CRISPR/Cas9的特異性很差。 值得注意的是，siRNA抑制非靶向基因的原因是：(1)與mRNA3'-非翻譯區(qū)(3’-UTR)部分互補(bǔ)，(2)正義鏈的反義活性。由于引導(dǎo)RNA的低特異性，CRISPR/Cas9系統(tǒng)可能導(dǎo)致數(shù)百個非預(yù)期的dsDNA斷裂，這可能限制CRISPR/Cas9通過體外形式的治療應(yīng)用。這種效應(yīng)對觀察到的OGT制劑的體內(nèi)毒性的貢獻(xiàn)尚不清楚，需要進(jìn)一步研究。鎖定或多肽核酸可提高OGT核酸酶的抗性，但不能提高特異性。使用依賴于RNA標(biāo)記的(有條件的)激活OGT試劑的方法可能會提高特異性，但需要在細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)進(jìn)行額外的驗證。
反義寡核苷酸(ASO)發(fā)揮作用 圖片來源：https://pubmed.ncbi.nlm./36276652/ 本文討論的OGT試劑采用核酸雜交原理進(jìn)行目標(biāo)識別，這些試劑已被廣泛用于雜交探針的研究。傳統(tǒng)的雜交探針只有在與目標(biāo)物形成不穩(wěn)定的雜交體時才能獲得高特異性。然而，OGT試劑必須緊密結(jié)合他們的靶標(biāo)才能解開mRNA二級結(jié)構(gòu)或dsDNA(在CRISPR/CAS的情況下)。 OGT試劑/目標(biāo)雜交物可以通過與RNaseH、RISC和Cas9形成絡(luò)合物來額外穩(wěn)定。這種緊密的結(jié)合性質(zhì)使OGT代理容易患上HD OTE。有趣的是，直到2014年，ASO試劑的這種影響才被報道，或者在引入后大約40年才報告。最近的例子表明，多組分ASO和DZ試劑具有解決HD OTE問題的潛力。然而，需要努力將報道的藥物轉(zhuǎn)化為治療技術(shù)。（生物谷 Bioon.com） 參考文獻(xiàn)   |
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