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PacBio全長擴(kuò)增子測序發(fā)現(xiàn)酵母益生菌可提高黑山羊免疫力

 凌恩生物 2022-10-28 發(fā)布于陜西

論文題目

Grazing and Supplementation of Dietary Yeast Probiotics Shape the Gut Microbiota and Improve the Immunity of Black Fattening Goats (Capra hircus)

期刊

Frontiers in Microbiology

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研究背景

食物來源是腸道微生物組成和功能最有效的調(diào)節(jié)因素之一,腸道微生物菌群也會影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收、代謝和儲存,并對宿主的生理表現(xiàn)出潛在的深遠(yuǎn)影響,本研究旨在探討不同飼喂方式對黑山羊生長特性、腸道微生物菌群和免疫力的影響。此外,使用PacBio單分子實時(SMRT)測序在種水平上識別了重要的腸道微生物,并對其在不同攝食模式下與多個免疫指標(biāo)的相關(guān)性展開了深入討論。

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實驗設(shè)計

  • 樣本情況

30只健康黑山羊分為3組:放牧組,舍飼組舍飼加益生菌組,益生菌的主要活性成分包括釀酒酵母和甘露聚糖。經(jīng)過2周的適應(yīng)期后,進(jìn)行生長性能試驗,并分三次采集血液和糞便樣本。血液通過elisa檢測IgA、IgG、IgM、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10,糞便樣本通過PacBio三代測序儀進(jìn)行16S rRNA全長測序。

組別

0

53

100

放牧組

PG

10

10

10

舍飼組

BF

10

10

10

益生菌組

BF + P

10

10

10

主要結(jié)果

1.生長性能與免疫指標(biāo)

隨著飼喂時間的延長,在相同的飼喂方式下,山羊的體重、身高、體長和胸圍均有顯著的上升趨勢(P<0.05)。PG組山羊的體重和胸圍分別在53天和100天顯著低于BF組(P<0.05),而BF+P組山羊的生長指標(biāo)與BF組無顯著差異(P>0.05)。通過雙向重復(fù)測量的綜合分析,隨著飼養(yǎng)時間的延長,IgA、IgG和IgM顯著增加(P<0.05),而TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10在BF+P組(P<0.05)中呈下降趨勢。PG組和BF+P組在第100天的IgA和IgG濃度最高(P<0.05)。

2.α多樣性指數(shù)分析
分析糞便樣品多個α多樣性指數(shù),PG組在各時間點的ACE、Chao1和Shannon-Wiener指數(shù)都顯著高于其他組(P<0.05),PG和BF組在不同時間點均無顯著變化,而BF+P組有顯著增加趨勢(P<0.05)。

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A:ACE指數(shù)  B:Chao1指數(shù)  C:香農(nóng)指數(shù)  D:辛普森指數(shù)

 3.不同分類學(xué)水平下的微生物物種組成分析

如下圖所示,在門水平上,所有樣品中厚壁菌門(Firmicutes)和擬桿菌門(Bacteroidetes)分別是最主要的兩個門,占總序列的70%以上。隨著取食時間的增加,厚壁菌門呈增加趨勢,而變形菌門呈下降趨勢。BF+P組在第100天,厚壁菌門的相對豐度最高。所有糞便樣本共鑒定出28個相對豐度超過0.1%的科。瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)和擬桿菌科(Bacteroidaceae)最為豐富。PG組在第100天Ruminococcaceae相對豐度最高(P<0.05),而BF+P組在第100天Lachnospiraceae相對豐度最高(P<0.05)。在種水平上,共鑒定出13個豐度超過0.1%的物種,BF+P組在第0天大腸桿菌(Escherichia coli)的相對豐度最高,但隨著益生菌的攝入E. coli豐度顯著降低。PG組在第0天的嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila)豐度最高(P<0.05)。瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)在各時間點均出現(xiàn)。在進(jìn)食后期,R. flavefaciens在各組中占據(jù)相同的位置。

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4. 細(xì)菌與免疫指數(shù)的相關(guān)性研究

在種水平上,糞便微生物群與免疫指標(biāo)之間存在顯著的相關(guān)性。A. muciniphila IgG(0.176)、IgM(0.173)、IgA(0.223)、IL-10(0.211)呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。琥珀酸纖維桿菌(Fibrobacter succinogenes)、大腸梭狀芽孢桿菌(Clostridium colinum)和R. flflavefaciensIgA、IgM和IL-10呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。另一方面,E. coliIgM(?0.203)、IgA(?0.199)和IL-10(?0.252)之間存在顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。球擬桿菌(Bacteroides caccae)、卵形擬桿菌(Bacteroides ovatus)、丁酸梭菌(Clostridium butyricum)和遠(yuǎn)副擬桿菌(Parabacteroides distasonis)與IgG、IgM、IgA、IgA、IL-10呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)。

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結(jié) 論

飲食方式可以改變黑山羊的腸道微生物群結(jié)構(gòu)。BF處理有利于山羊的生長性能,而PB和BF+P處理可通過正向調(diào)節(jié)A.muciniphila R.flavefaciens等有益腸道菌群的增殖來提高山羊的免疫力。這些結(jié)果表明,BF每天添加5g益生菌有增強黑山羊生長和免疫的潛力。

文章鏈接:
DOI: 10.3389/fmicb.2021.666837

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