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CpG ODN選擇,點(diǎn)這里不迷路

 長江鳥人 2022-06-17 發(fā)布于江蘇

  Toll 樣受體 9 (TLR9) 可識別微生物而非脊椎動物基因組 DNA 中普遍存在的特定未甲基化 CpG 基序,從而引起先天性和獲得性免疫反應(yīng)。CpG ODN 是含非甲基化CpG基序的寡聚脫氧核苷酸( Oligodeoxynucleotides containing CpG motifs) ,合成的CpG ODN具有和細(xì)菌DNA類似的免疫刺激作用。CpG ODN廣泛應(yīng)用于細(xì)胞的刺激和活化、動物體內(nèi)注射、佐劑等方面,但是你真的了解CpG ODN嗎?不同的種類的CpG ODN的免疫刺激性不同,你使用的CpG ODN選對了嗎?


CpG ODN的區(qū)分

與基因組細(xì)菌DNA中發(fā)現(xiàn)的天然磷酸二酯(PO)骨架相反,CpG ODN具有部分或完全硫代磷酸化(PS)骨架?;谄浣Y(jié)構(gòu)特征和對人外周血單核細(xì)胞( PBMC ) ,特別是B細(xì)胞和pDC細(xì)胞的刺激活性,將其分為A、B、C三類。

A類ODN 的特點(diǎn)是含有PO中心CpG 的回文基序和 PS 修飾的 3’端poly-G。能夠誘導(dǎo)pDC細(xì)胞產(chǎn)生大量IFN-α,但它們是TLR9 依賴性NF-κB信號傳導(dǎo)和促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生的弱刺激劑。

B類ODN 包含帶有一個或多個CpG二核苷酸的完整PS主鏈能夠,強(qiáng)烈激活 B 細(xì)胞和TLR9 依賴性NF-κB信號傳導(dǎo),刺激IFN-α分泌的效果微弱。

C類ODN 結(jié)合了A類和B類的結(jié)構(gòu)特征,包含一個完整的PS主干和一個包含 CpG的回文基序。在功能上,具有誘導(dǎo)pDC產(chǎn)生IFN-α以及B細(xì)胞刺激的活性,但是其效果分別弱于單獨(dú)使用A類或B類ODN 。


 · 圖1 ·   CpG ODN結(jié)構(gòu)圖解


 · 圖2 ·   CpG ODN功能圖解

ODN不僅有刺激活性上的區(qū)分,還有種屬之分,你敢信嗎?工欲善其事,必先利其器。選對了ODN,做實驗也能“事半功倍”。

A類ODN

名稱

種屬特異性

描述

ODN 1585

小鼠

文獻(xiàn)引用最多小鼠A類ODN

ODN 2216

文獻(xiàn)引用最多人A類ODN

ODN 2336

應(yīng)用:

1. 抑制HUVEC細(xì)胞IL-8分泌,ODN 2336

2. 誘導(dǎo)pDC細(xì)胞產(chǎn)生IFN-α、TNF-α,ODN 2216

3. 誘導(dǎo)PBMC細(xì)胞產(chǎn)生IFN-α、IFN-γ,ODN 2216

4. 誘導(dǎo)Mincle介導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞活化,ODN 1585

5. RAW 264.7細(xì)胞NLRP3激活Priming,ODN 1585

B類ODN

名稱

種屬特異性

描述

ODN 1668

小鼠

ODN 1826

小鼠

文獻(xiàn)引用最多小鼠B類ODN

ODN 2006

文獻(xiàn)引用最多人B類ODN

ODN 2007

牛/豬

ODN BW006

人/鼠

ODND-SL01

人/大鼠/小鼠/兔/豬/狗

應(yīng)用:

1. 注射小鼠體內(nèi)可以激活kupffer細(xì)胞,ODN 1668

2. 誘導(dǎo)小鼠骨髓來源的巨噬細(xì)胞 , ODN 1826

3. 瘤內(nèi)注射上調(diào)腫瘤內(nèi)T細(xì)胞OX40表達(dá), ODN 1826

4. 誘導(dǎo)小鼠DC細(xì)胞成熟, ODN 1826

5. 增強(qiáng)腫瘤內(nèi)T細(xì)胞浸潤(提高T細(xì)胞數(shù)量、增強(qiáng)T細(xì)胞活化), ODN 1826

6. 誘導(dǎo)BMDM細(xì)胞分泌TNF-α, ODN 1826

7. 誘導(dǎo)人CLL細(xì)胞分泌IL-10,ODN 2006

8. 刺激PBMC細(xì)胞表達(dá)CD19、pSTAT3,ODN 2006

9. 誘導(dǎo)PBMC細(xì)胞產(chǎn)生IL-10,ODN 2006

10. 刺激兔B細(xì)胞分泌免疫球蛋白,ODN D-SL01

C類ODN

名稱

種屬特異性

描述

ODN 2395

人/小鼠

文獻(xiàn)引用最多C類ODN

ODN M362

人/小鼠

ODN D-SL03

人/大鼠/小鼠/兔/豬/狗

應(yīng)用:

1. 作為納米佐劑注射C57BL6小鼠,ODN 2395

2. 誘導(dǎo)原代人CLL細(xì)胞極化和遷移,ODN 2395/ODN 2006

ODN 2088 —TLR 9拮抗劑

通過破壞CpGODNs與TLR9在內(nèi)涵體囊泡中的共區(qū)域化而發(fā)揮作用,而不影響細(xì)胞結(jié)合和攝取。

應(yīng)用:

1. TLR9抑制劑治療大鼠疾病模型,ODN 2088

CpG ODN的選擇你明白了嗎?


InvivoGen 1977年成立于法國,是法國第一家生物科技公司。公司成立的初期階段主要提供細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,如抗支原體、細(xì)菌、真菌污染的抗生素以及基因篩選抗生素(Blasticidin, Puromycin, HygromycinB,G418, Zeocin)。隨著天然免疫研究熱點(diǎn)的興起,InvivoGen于2000年開始致力于天然免疫相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn),并成為全世界最優(yōu)質(zhì)、最專業(yè)的天然免疫相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn)商。InvivoGen為天然免疫研究提供一整套研究方案,包括不斷更新的模式識別受體(PRRs)激動劑和拮抗劑,PRRs報告基因細(xì)胞以及天然免疫信號通路的誘導(dǎo)劑和抑制劑等。 

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