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一、標本采集
（一）標本采集
采集標本前應禁欲3～5d，采前排凈尿液；將一次射出的全部精液直接排入潔凈、干燥的容器內(nèi)（不能用乳膠避孕套）。采集微生物培養(yǎng)標本須無菌操作。
?。ǘ?/span>標本運送
精液采集后應立即保溫送檢（＜1h）。溫度低于20℃或高于40℃影響精子活動。
?。ㄈ吮静杉螖?shù) 一般應間隔1～2周檢查一次，連續(xù)檢查2～3次。
二、理學檢查
?。ㄒ唬?/span>精液外觀和氣味
1.正常
剛射出的精液一般為微混濁的灰白色，有一股腥味，自行液化后為半透明的乳白色。
2.異常
?。?）紅色：前列腺和精囊腺炎癥、結核、腫瘤或結石等。
?。?）黃色：前列腺炎、精囊炎等。
（二）精液量
1.方法
通常用規(guī)格為10ml刻度吸管測定精液全量。
2.正常
一次排精量為2～6ml，平均3.5mL。
3.異常
精液量少于1ml或大于8ml，為異常，不利于生育。
（三）精液液化時間
新排出的精液從膠凍狀轉(zhuǎn)變?yōu)榱鲃訝顟B(tài)所需的時間，室溫下正常精液排出后30分鐘內(nèi)自行液化。
●觀察凝固
●37℃水浴
●5min查1次至液化
精液超過60min仍未液化為異常，常見于前列腺炎。
（四）精液黏稠度
系指完全液化后的精液黏度。
檢測方法
1.直接玻棒法：將玻棒插入精液標本，提棒時可拉起黏絲，正常精液黏絲長度不超過2cm。黏稠度增加時，精液懸滴可形成長于2cm的長絲。
2.黏度計法：測定0.5ml精液通過黏度計所需的時間即為精液黏稠度。
3.臨床意義
?。?）黏稠度增加：精液常伴不液化，影響精子活力。
?。?）黏稠度下降：見于先天性無精囊腺及精子濃度太低或無精子癥。
（五）精液酸堿度（pH）
1.檢測方法
用精密pH試紙或酸度計測定，應在射精后1h內(nèi)完成。
2.臨床意義
正常精液pH為7.2～7.8。
（1）pH值＜7.0，伴少精癥，常反映輸精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睪病變。
?。?）pH值＞7.8，常見于急性前列腺炎、精囊炎或附睪炎。
三、化學檢査
（一）精漿果糖測定
1.測定方法及評價
?、匍g苯二酚比色法（國內(nèi)常用）：9.11～17.67mmol/L；
?、谶胚犸@色法：每次射精≥13μmol/1次射精，本法為WHO推薦方法。
2.臨床意義
?、傧忍煨?/span>精囊腺缺如，果糖為陰性。
?、诰蚁傺讜r，果糖含量減低。
③在無精癥和射精量少于1ml者，若精漿中無果糖為精囊阻塞；有果糖，則為射精管阻塞。
（二）精漿α-葡糖苷酶測定
1.測定方法及評價
比色法可測定精漿中α-葡糖苷酶的活性。葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖的生成量，反映α-葡糖苷酶的活性。國內(nèi)臨床上較為常用。
2.臨床意義
α-葡糖苷酶活性下降，見于阻塞性無精子癥，具有肯定性診斷價值。 （三）精漿乳酸脫氫酶同工酶X（LD-X）測定
1.測定方法及評價
LD-X的電泳位置在LD3-LD4之間。活性測定多采用聚丙烯酰胺凝膠電泳、酶聯(lián)染色及光度計掃描法，求得其相對百分率。國內(nèi)臨床上較為常用。
2.參考值 LD-X相對活性≥42.6%。
3.臨床意義
精子發(fā)生缺陷時無LD-X形成。少精或無精者可致LD-X活性減低。
（四）精漿酸性磷酸酶測定（ACP）
1.參考值
80～1000U/ml（速率法）；＞200U/1次射精
?。é?硝基酚法）。
2.臨床意義
前列腺炎時ACP活性減低；前列腺癌和前列腺肥大時，ACP活性增高。
四、顯微鏡檢查
?。ㄒ唬┩科瑱z查
精液液化后，取1滴混勻的精液置于載玻片上，通常在低倍鏡下粗略觀察有無精子，是活動還是不活動。若遇無精子癥，應將標本在600g下離心15min后取沉淀物重復檢查。
（二）檢測指標
1.精子活動率 對精子活力的定性檢查
?。?）方法：取液化均勻的精液1滴置載玻片上，加蓋玻片放置片刻，在高倍鏡下觀察100個精子，計數(shù)活動精子與不活動精子的比例即為精子的活動率。
（2）參考值：正常人精液在排精30～60min內(nèi)，精子活動率80%～90%，應至少＞60%。
2.精子存活率 對精子存活率的觀察。
?。?）檢測方法：取液化均勻的精液1滴置載玻片上，加等量染色液（伊紅Y、臺盼藍等）混勻，放置片刻，推成薄片，在高倍鏡下觀察計數(shù)100個精子中不著色精子與著色精子的比例，即為精子存活率。一般精子死亡后，細胞膜完整性受損，失去屏障功能，易于著色。
（2）參考值：有生育力男性精子存活率應≥58%。 3.精子活動力
指精子向前運動的能力，是直接反映精子質(zhì)量的一項指標。
?。?）檢測方法：取液化均勻精液1滴置載玻片上，蓋上蓋玻片，放置片刻，在高倍鏡下觀察5～10個視野，計數(shù)100個精子并進行活動力分級，以百分率表示。
?。?）結果判斷：WH0建議將精子活動力分為4級：a.快速前向運動（Ⅲ級：直線運動）；b.慢或呆滯的前向運動（Ⅱ級：運動緩慢）；c.非前向運動（Ⅰ級：原地運動）；d.不動（0級：不活動）。
（3）參考值：WHO規(guī)定正常生育者精子活動力：射精后60min內(nèi)，Ⅲ級精子應＞25%；或Ⅲ和Ⅱ級精子的總和＞50%。
?。?）臨床意義：精子活動力減低，精子存活率減低，0級、Ⅰ級精子40%以上，見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系感染如前列腺炎等及使用某些藥物如抗瘧藥、雌激素等。 （三）精子計數(shù)
指單位體積中精子數(shù)，即精子濃度。精子計數(shù)乘以1次射精量，即1次射精精子總數(shù)。
測定方法及評價：
1.粗略估計法：取液化均勻的精液1滴置載玻片上，蓋上蓋玻片，放置片刻，在高倍鏡下觀察5個視野，取每個視野的精子平均數(shù)×109，即為大概精子數(shù)。該法操作簡便，但只能作粗略估計。
2.精確計數(shù)法：
?、傺毎嫈?shù)板計數(shù)：只能用于精子數(shù)量觀察，不能同時進行精子活動率和活動度、運動軌跡和速度的檢查等。
?、贛akler精子計數(shù)板：簡便、快速，精液不需要稀釋，一次加樣不但可計數(shù)精子密度，還可分析精子的活動力和活動率。
?、塾嬎銠C輔助精液分析（CASA）：CASA系統(tǒng)是利用圖像和計算機視屏技術來進行精子計數(shù)，利用CASA計數(shù)精子簡單、快速，但易受精液中細胞成分和非精子顆粒物質(zhì)的影響。
3.參考值
精子總數(shù)≥39×106/次
精子濃度≥15×109/L
4.臨床意義
精子數(shù)量減低可見于：①精索靜脈曲張；②先天性或后天性睪丸疾病，如睪丸畸形、萎縮、結核、淋病、炎癥等；③輸精管或精囊缺如；④重金屬損害，如鉛、鎘中毒或放射性損害；⑤某些藥物，如抗癌藥等或長期服用棉酚；⑥50歲以上男性精子數(shù)逐年減少。 （四）精子形態(tài)檢查
1.正常形態(tài)：正常精子形似蝌蚪狀，由頭、體（頸、中段）、尾三部分構成。頭部正面呈卵圓形，側面呈扁平梨形；體部輪廓直而規(guī)則，長約5～7μm，寬1μm；尾部細長，一般長約50～60μm。
2.異常形態(tài)：①頭部異常：包括大頭、小頭、錐形頭、梨形頭、無定形頭等；②體部異常：主要指腫脹和不規(guī)則；③尾部異常：包括短尾、多尾、發(fā)夾狀尾及斷尾等。
3.臨床意義
正常精液中異常精子應＜20%，超過40%，即影響精液質(zhì)量，超過50%?？蓪е虏挥?/span>。感染、外傷、高溫、放射線、酒精中毒、藥物和精索靜脈曲張均可使畸形精子數(shù)量增加。 （五）其他細胞
1.未成熟生殖細胞
參考值：未成熟生精細胞＜1%。
臨床意義：曲細精管受損（如藥物或其他因素），精液中可出現(xiàn)較多的未成熟生精細胞。
2.紅細胞、白細胞、上皮細胞
（1）紅細胞（偶見）和白細胞：正常＜5/HP。在生殖道炎癥、結核、惡性腫瘤時，精液中紅、白細胞數(shù)可增高。
?。?）上皮細胞：正常偶爾可見前列腺上皮細胞，增多見于前列腺增生。
3.癌細胞
精液中查見癌細胞對生殖系惡性腫瘤的診斷將提供重要依據(jù)。
五、免疫學檢查
抗精子抗體檢查方法
1.混合抗免疫球蛋白試驗（MAR）
2.免疫珠試驗
3.精子凝集試驗（SAT）
六、微生物學檢查
七、精子功能檢查 精子低滲腫脹試驗（HOS）
1.檢查方法
將精子置入低滲溶液中，計算100～200個精子中出現(xiàn)腫脹的百分率。結果判斷：a、b、c、d、e及f型（部分尾部腫脹）；g型（全尾部腫脹）。
2.參考值
g型腫脹精子率＞50%。
3.臨床意義
精子尾部低滲腫脹試驗可作為體外精子膜功能及完整性的評估指標，預測精子潛在的受精能力。有研究表明，不育癥的精子尾部腫脹率明顯減低。
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