|
細胞橋接 細胞橋接雙特異性抗體（Bispecific antibodies，BsAbs）結合兩個不同細胞的表面抗原，一個在效應細胞表面，另一個在靶細胞/腫瘤細胞表面，導致下游信號網(wǎng)絡的激活和靶細胞的殺傷。 目前依舊最熱的研究管線是T細胞依賴性BsAbs（T-cell dependent BsAb，TDBs），包括一個CD3抗體臂和一個靶細胞表面的腫瘤特異性抗原抗體臂。也有一些BSAbs通過結合其他表位，如CD5或CD28等共刺激受體來激活T細胞。BsAbs對靶細胞和T細胞的連接導致免疫突觸的形成，誘導T細胞激活，并導致穿孔裂解靶細胞的酶和顆粒的釋放。 TDBs作用機制（Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 5350） TDBs利用患者自身的免疫系統(tǒng)，無需MHC-復合物的激活，不依賴于TCR表位特異性來殺傷腫瘤細胞。雖然TDBs通常比標準的單克隆抗體藥物更復雜、生產(chǎn)和表征更困難，但它們目前比CAR-T治療更便宜，后者必須為每個患者單獨生產(chǎn)。此外，與CAR-T療法相比，TDBs可以具有更有利的安全性，其不良事件越少，如全身細胞因子釋放綜合征（這是與免疫療法相關的最常見不良事件）。 除了TDBs之外，還有一些雙特異性抗體，通過同時結合CD16(FcγaRIII)和腫瘤特異性抗原來招募和激活NK細胞；通過靶向CD89來招募和激活巨噬細胞。。 生物測定方法 1.結合實驗：任何基于抗體技術的藥物，結合實驗都是基礎。通常使用ELISA法和SPR法。檢測雙特異性抗體和相應抗原的結合能力。 2.生物活性測定：橋接法雙特異性抗體，其主要活力是效應細胞和靶細胞形成免疫突觸，進而活化，殺傷靶細胞。因而報告基因法檢測效應細胞激活，以及細胞殺傷實驗檢測靶細胞的殺傷效果，是主要生物活性測定實驗。 3.其他功能測定：通過流式細胞術檢測細胞清除，細胞因子釋放，或者細胞表面marker變化 4.效應功能：主要檢測ADCC和ADCP。 配體-受體阻斷或激活 這類雙特異性抗體，具有靶向多個受體的能力，在特定的細胞環(huán)境下靶向和激活一個受體，尤其是單獨一個抗體無法特異性激活的受體。如抗成纖維細胞生長因子受體(aFGFRI)/抗Klotho(aKLB)BsAb激活FGFRI/KLB受體復合體，導致體重減輕和減少臨床前模型中與肥胖相關的疾病。 FGFR1受體（J. Clin. Invest. 115, 1627–1635） 通過選擇性地靶向FGFRI/KLB，該分子在與KLB結合時激活FGFRI，從而避免廣泛的FGFRI激活（FGFRI受體在組織中廣泛的表達），減少單克隆抗體FGFRI激動劑相關的副作用。 除了作為受體激動劑外，BsAbs還可以是有效的受體拮抗劑。對于HER-2（曲妥珠單抗）治療耐藥的患者，HER2雙抗是一個好的選擇。HER2XCD3雙抗可以通過橋接T細胞進行細胞殺傷，HER2XHER3雙抗則阻止配體激活HER3，并抑制HER2高表達腫瘤中的PI3K信號，從而克服腫瘤對于HER2單抗的耐藥。 HER2單抗和雙抗作用機制（Exp. Hematol. Oncol. 2017, 6, 31.） BsAb有時與mAb的聯(lián)合治療的目的相同，但在某些情況下，BsAb提供了一種特殊的優(yōu)勢。經(jīng)典的案例是PD-1XCTLA4雙抗（如下圖MEDI5752），通過優(yōu)先抑制PD1+細胞上的CTLA-4，導致與免疫激活相關的不良事件比傳統(tǒng)聯(lián)合治療更少。單價CTLA-4抗體臂對CTLA-4的抑制降低，但是不影響PD-1抗體臂對于PD-1的抑制。因此，BsAb能夠在PD1+細胞上飽和CTLA-4受體，而不廣泛抑制CTLA-4，從而導致更少的不良事件。使用該BsAb對CTLA-4和PD1的雙特異性靶向也會導致PD1的內化和降解，這是通過CTLA-4和PD1mAbs的組合沒有觀察到的效果。 MEDI5752作用機制（Cancer Discov. 2021.） 生物測定方法 1.結合實驗：使用ELISA和SPR法進行單靶點和雙靶點的結合實驗，檢測雙特異性抗體和抗原的結合能力等。 2.生物活性：受體激活或阻斷后的細胞活性變化，如增殖，凋亡，細胞因子釋放等。 3.其他功能研究：如激活或阻斷受體后，下游激酶活性改變，鈣流變化等 4.效應功能：CDC、ADCC、ADCP、FcγR結合等 輔助因子模擬 Emicizumab (marketed name Hemlibra?)，是一種用于治療A型血友病的BsAb。BsAb與凝血因子X和IX結合，因此能夠發(fā)揮凝血因子XIII的作用（在許多血友病A患者中缺少的凝血因子）。 Emicizumab 作用機制（Thromb. Haemost. 2017, 117, 1348–1357） 生物測定方法 1.結合實驗：使用ELISA和SPR法進行單靶點和雙靶點的結合實驗 2.生物活性：FXa活性 3.其他功能研究：凝血酶生成分析 歸巢雙抗 歸巢BsAbs的一個抗體臂負責將分子帶到很難抵達的位置。比如一些BsAbs已經(jīng)被開發(fā)出來，能夠通過靶向轉移酶受體（transferase receptor，TFR）來跨越血腦屏障，一旦穿過屏障，非轉移酶受體臂就可以靶向感興趣的治療靶點（比如淀粉樣蛋白和其他阿爾茨海默病靶點 BACE1）。 TfR-BACE1雙抗結構示意圖（Sci. Transl. Med. 2014, 6, 261ra154.） 此外，還有串聯(lián)scFv 的BsAb的例子，它針對激活的血小板和SCA-1，幫助將干細胞帶到損傷的位置；它正在探索用于治療心肌梗死。 生物測定方法 1.結合實驗：BLI及競爭法ELISA。 2生物活性：歸巢抗體之外分子的生物活性。 3.其他功能研究：熒光示蹤檢測雙特異性抗體在體內和細胞內分布等 。 小編總結 雙抗或者多特異性抗體的多重作用機制，是克服腫瘤耐藥，豐富腫瘤治療策略重要途徑。但雙抗的多重作用如何測定，才能充分驗證其作用機制及表征有效性，也是雙抗開發(fā)的難點。 參考文獻 |
|
|
來自： 劉得光3p6n6zqq > 《雙抗》
