多肽的制備方法有生物組織提取法、基因重組表達法和化學合成法，目前已上市的多肽藥物有90%以上可通過化學合成法制備。多肽藥物主要由氨基酸或者氨基酸衍生物組成，可以通過氨基酸逐步連接或者多個肽鏈片段縮合，再經(jīng)過較復(fù)雜的純化工藝得到。目前化學合成多肽主要包括液相法、固相法、液相固相結(jié)合法。

要研究多肽合成中雜質(zhì)的產(chǎn)生，其實最容易想到的就是工藝缺失雜質(zhì)，因為固相合成的話，不可每一步都是百分之百的縮合，難免會有某些氨基酸的缺失，而且多肽鏈本身有可能會發(fā)生斷裂，有些結(jié)構(gòu)可能被修飾。

還有一類是降解雜質(zhì)，比如說有的氨基酸容易發(fā)生水解，或被氧化，甚至形成聚合。ICHQ3還要求對溶劑殘留與元素雜質(zhì)、基因毒進行研究和控制。目前申報多肽產(chǎn)品的話，除了前兩類雜質(zhì)以外，后面的溶劑殘留，元素雜質(zhì)，基因毒雜質(zhì)都要考慮。

起始物料的控制中，最先想的就是氨基酸，因為氨基酸里邊的雜質(zhì)有可能會傳遞到多肽的產(chǎn)品里邊去，那怎么來控制？

多肽合成用到的氨基酸種類比較多，這里舉一個例子，比如經(jīng)常用的雙保護賴氨酸。L型的賴氨酸，它有可能包含D型的雜質(zhì)。另外，這個雙保護氨基酸的制備過程當中，它可能會缺失一個保護基，還有形成一個二聚體，還有也可能引入貝塔丙氨酸，甚至這兩個保護劑的位置互換，或者兩個保護基都掉了。這些雜質(zhì)都有可能會帶入到產(chǎn)品里去，所以在起始物料控制的時候，需要分析這幾類雜質(zhì)。

剛才只是以一個氨基酸為例，但是多肽合成里面，往往會用到幾種甚至十多種的保護氨基酸，那么起始物料的控制對于分析部門來說，QC就要做大量工作。

多肽合成除了從物料的源頭氨基酸去控制雜質(zhì)以外，還有更重要的是在合成過程中的控制。如何確保在多肽合成過程當中每一個氨基酸的縮合都完全？用的最多的是茚三酮檢測法，這個反應(yīng)非常靈敏的，作為一個定性的中控方法，目前是大家普遍采用的。還有其它的方法，比如TNBS法，四氯苯醌法。如果要控制更好的話，國外有用LC-MS法的，每一步的縮合反應(yīng)，包括脫保護基（Fmoc）都可以得到更精確的控制。但是考慮到這個生產(chǎn)周期等方面的原因，國內(nèi)的中控方法還是比較弱的，一般就用茚三酮檢測法，或者是在關(guān)鍵控制點，也用LC-MS來跟蹤反應(yīng)是否縮合完全。正是由于在中控的地方不是那么完善，所以導致后期的純化及在產(chǎn)品質(zhì)量上往往面臨不小的挑戰(zhàn)。

參考資料：藥融圈