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骨髓稀釋標本,一個隱藏的“小偷”

 板橋胡同37號 2021-04-21

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我是一名基層醫(yī)院的檢驗師,骨髓細胞形態(tài)識別對于我們來說既陌生又神秘。工作后為了提高自己的實踐技能,在科室領(lǐng)導(dǎo)的支持下,我?guī)е鴮撬杓毎螒B(tài)的好奇和敬畏,來到了四川省人民醫(yī)院檢驗科血液病組骨髓室進修學(xué)習(xí)。

在骨髓室老師們的悉心指導(dǎo)和幫助下,我們在骨髓細胞形態(tài)識別上有了深刻的認識和體會。在剛開始接觸骨髓分片時,我們都帶著一絲抗拒,因此看見只用分類100個或50個有核細胞(正常分類200個有核細胞)的骨髓稀釋標本都是無比熱愛。

但是通過不斷的學(xué)習(xí),我才發(fā)現(xiàn)骨髓稀釋標本并不是看上去那么簡單,雖然看似平淡無奇,其中卻是風(fēng)起云涌。我親切的稱呼它為“小偷”,它將“偷竊”的細胞進行隱藏,然后裝作人畜無害的樣子欺騙我們,讓我們放松警惕,尤其對于我們初學(xué)者來說,更加地容易被它欺騙,造成漏撿。

紅細胞“小偷”
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ART.01

患者,女,44歲,臨床癥狀貧血。血常規(guī)結(jié)果 WBC:4.69×109/L,RBC:4.06×1012/L↓,HGB:88g/L↓,MCV:72.1fl↓,MCH:21.8pg↓,MCHC:302g/L↓,RDW-CV:43.2%↑,PLT:390×109/L↑,外周血象提示為小細胞低色素性貧血。

低倍鏡判斷標本取材發(fā)現(xiàn),骨髓有核細胞增生減低,尾部無骨髓小粒,全片無巨核細胞,此時心中大喜,就是一個稀釋骨髓標本。初步分類結(jié)果顯示中晚幼紅比例增高,當(dāng)時并沒有注意,認為是符合稀釋骨髓象。

第二天骨髓室老師閱片,該稀釋骨髓片成熟紅細胞形態(tài)異常,大小不均,嗜多色性紅細胞增多,查見碎片、靶形紅細胞、豪焦小體,并且骨髓象存在紅系增生,以中晚幼紅為主,外周血細胞結(jié)果提示該患者存在貧血,建議做網(wǎng)織紅細胞、coombs、血紅蛋白電泳。

后續(xù)查看病歷和其他檢驗檢查結(jié)果,網(wǎng)織紅細胞:6.54%↑,coombs試驗陰性,紅細胞CD55百分比0.26、紅細胞CD59百分比0.50,G6PD:64536U/L↑,血紅蛋白電泳:HBA:95.9%↓、HbF:1.1%、HbA2:2.4%,患者未做進一步基因檢查,臨床考慮地中海貧血?(圖A-C)

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A 低倍鏡

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B 油鏡

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C 油鏡

【領(lǐng)悟】

骨髓稀釋標本并不是想象的那么簡單,我們要改變錯誤觀念,明白骨髓稀釋標本不代表沒有問題,其中還隱藏著許多細節(jié)。

在觀察骨髓稀釋標本時,我們可能更加注意有核細胞的形態(tài),往往忽略了我們最熟悉的成熟紅細胞,然而它們也能給我們提供更多重要提示,因此我們不要被骨髓稀釋標本的外表所欺騙。

原始細胞“小偷”
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ART.02

患者,男,81歲,急性髓系白血病經(jīng)阿扎胞苷+bcl-2抑制劑第三次化療后,復(fù)查血常規(guī)結(jié)果WBC:0.99×109/L↓,RBC:2.15×1012/L↓,HGB:62g/L↓,MCV:86.5fl,MCH:28.8pg,MCHC:333g/L,RDW-CV:16.7%↑,PLT:44×109/L↓,外周血三系減少,骨髓處于抑制狀態(tài)。

低倍鏡下觀察有核細胞增生減低,尾部無骨髓小粒,全片觀察無巨核細胞,判斷為骨髓稀釋標本,初步分類結(jié)果未見明顯異常。

第二天骨髓室老師再次分類發(fā)現(xiàn),雖然有核細胞增生減低,但是原始粒細胞仍占4%ANC,建議做白血病微小殘留病變(minimalresidual dis-ease,MRD)檢測。

后續(xù)查看流式MRD可見7.3%異常免疫表型髓系原始幼稚細胞,表達CD34、CD17、HLA-DR、CD33、CD7,部分表達CD13,不表達CD19、CD56,證實該患者存在白血病微小殘留病。(圖D-F)

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D 低倍鏡

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E 高倍鏡

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F 油鏡

【領(lǐng)悟】

骨髓稀釋標本尤其是急性白血病患者的稀釋標本,哪怕只有一個原始細胞也應(yīng)該引起我們的重視,并且急性白血病患者治療后,其原始細胞核染色質(zhì)有變粗糙的現(xiàn)象[1]。

漿細胞“小偷”
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ART.03

患者,男,48歲,主訴為左側(cè)肋骨疼痛半月。外周血常規(guī)WBC:5.04×109/L,RBC:4.02×1012/L↓,HGB:134g/L,MCV:97.6fl,MCH;33.3pg,MCHC:341g/L,RDW-CV:12.5%,PLT:238×109/L,外周血象大致正常。

低倍鏡下觀察有核細胞增生減低,尾部無骨髓小粒,全片無巨核細胞。初步判斷為骨髓稀釋標本,分類結(jié)果未見明顯異常。

第二天老師重新分類,漿細胞比例增高占13%ANC,其中幼稚漿細胞占4.5%ANC,查見雙核漿細胞和核畸形漿細胞,提示可能是異常漿細胞,考慮是一個多發(fā)性骨髓瘤(Multiplemyeloma,MM)待排。

后續(xù)查看病歷和檢驗檢查結(jié)果,骨ECT結(jié)果顯示左第二肋和右第八肋輕骨連接處放性濃聚灶。

免疫固定電泳:輕鏈k型M蛋白陽性(+),免疫球蛋白:游離輕鏈k型5100mg/L↑,尿免疫球蛋白k鏈236mg/L↑,24h尿蛋白定量6.82g/h↑,

流式結(jié)果:存在7.02%的異常免疫表型漿細胞,表達CD38、CD13,少部分表達CD56,不表達CD20、CD19,限制性表達cKappa,臨床診斷為輕鏈k型,DSⅢ期,ISSⅠ期MM。(圖G-I)

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G 低倍鏡

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H 此高倍鏡下無漿細胞

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I 此高倍鏡下漿細胞較多

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J 油鏡下異常漿細胞

【領(lǐng)悟】

對于骨痛標本應(yīng)觀察尾部有無成團腫瘤細胞,有無異常漿細胞。稀釋標本不同視野可能存在漿細胞差異,因此我們需要多視野下進行分類綜合評價。

初學(xué)者的我們在觀察骨髓標本時,應(yīng)注意臨床相關(guān)癥狀,明確思考和觀察方向。并且稀釋標本可能存在視野差異,很容易導(dǎo)致我們漏檢,因此不要被表象所迷惑,應(yīng)該在低或高倍鏡下全片掃描,油鏡驗證,有異常細胞增多時,可以進行多次重復(fù)分片,達到一個綜合評價的目的。

腫瘤細胞“小偷”
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ART.04

患者,男,68歲,主訴腰疼1周。外周血常規(guī)WBC:7.44×109/L,RBC:2.7×1012/L↓,HGB:80g/L↓,MCV:91.5fl,MCH:29.6pg,MCHC:324g/L,RDW-CV:15.0%↑,PLT:239×109/L,外周血象提示正細胞正色素性貧血。

低倍鏡下觀察骨髓有核細胞增生減低,全片無巨核細胞,尾部無骨髓小粒,有疑似“凝塊”物質(zhì),妥妥的骨髓稀釋標本。

轉(zhuǎn)為油鏡觀察發(fā)現(xiàn)這個“凝塊”不簡單,原來是一個細胞團,該類細胞大小不均,中等大小,核染色質(zhì)細致,核成類圓形或成不規(guī)則,核仁隱浮,胞漿較少或中等,呈深藍或灰藍,可見空泡。

果斷請教老師,才知道這一團分類不明的細胞可能是腫瘤細胞,它們成團存在,融合生長,考慮骨轉(zhuǎn)移?

查閱相關(guān)文獻發(fā)現(xiàn)大多數(shù)腫瘤細胞具有“三大三深”特點,“三大”指胞體大、胞核大、核仁大;“三深”指胞質(zhì)深、胞核深、核仁深[2]

對照本例細胞,符合“三大三深”特點。后續(xù)查看相關(guān)實驗室檢查,SF:1392.02 ng/mL↑,PSA:343.14 ng/mL↑,考慮是一個前列腺癌?骨轉(zhuǎn)移?(圖K-M)

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K 低倍鏡

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L 疑似“凝塊”的腫瘤細胞

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M 油鏡下的腫瘤細胞

【領(lǐng)悟】

骨髓稀釋標本我們應(yīng)該重視海岸線上有無可疑細胞、腫瘤細胞和凝塊,初期在識別不明的情況下更應(yīng)該進行低倍鏡和油鏡相互切換印證,不要和凝塊和腫瘤細胞等混淆。

總  結(jié)

骨髓稀釋標本作為一個偽裝的“小偷”,更需要我們有敏銳的目光來抓捕,熟練的掌握骨髓基礎(chǔ)細胞形態(tài),同時不要忽略患者的相關(guān)診斷和檢驗檢查結(jié)果。實際分片過程中,不止我所提到的情況,還有更多隱藏的細節(jié)等我們發(fā)現(xiàn),所謂事無巨細,認認真真,腳踏實地是我們每一個檢驗人應(yīng)有的態(tài)度。

【參考文獻】

[1]張素寧,趙秀生.急性粒細胞白血病化療后細胞形態(tài)的改變[J].黑龍江醫(yī)學(xué),1999,(9):22.

[2]陳樸,王蓓麗,郭瑋,等.106例骨髓轉(zhuǎn)移癌臨床及細胞形態(tài)學(xué)特點分析[J].檢驗醫(yī)學(xué),2013,28(7):595-598.

END

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