PCR實(shí)驗(yàn)室的功能用房有試劑配制室、樣品處理室、核酸擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室（也可擴(kuò)增與分析同為一室）。各室在物理空間上必須完全獨(dú)立、在使用中應(yīng)當(dāng)始終處于完全的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。因此每一個(gè)房間都會(huì)設(shè)置緩沖間，用于維持主主操作間的壓差和隔絕各室的空氣。

試劑準(zhǔn)備室（一區(qū)）：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的準(zhǔn)備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。

樣品處理室（二區(qū)）：核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管。對(duì)于涉及臨床樣本的操作，應(yīng)符合生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室防護(hù)設(shè)備、個(gè)人防護(hù)和操作規(guī)范的要求。

核酸擴(kuò)增室（三區(qū)）：cDNA合成、DNA擴(kuò)增及檢測。

產(chǎn)物分析室（四區(qū)） ：擴(kuò)增片段的進(jìn)一步分析測定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。

一般情況下，房間的壓差有正壓和負(fù)壓兩種，房間維持正壓，主要是為了防止外部的污染源侵入，氣流的方向是由內(nèi)向外；房間維持負(fù)壓，主要是為了防止內(nèi)部污染源的擴(kuò)散，氣流的方向是由外向內(nèi)。

關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)室的功能用房環(huán)境設(shè)計(jì)參數(shù)，在《疾病預(yù)防控制中心建筑技術(shù)規(guī)范》GB50881-2013中這樣要求：

“—”表示不做要求

從原理上講，所有防止污染源的房間均應(yīng)設(shè)置為正壓，以避免外部污染源的入侵。比如常規(guī)的無菌檢測室、超凈工作臺(tái)等遵循的就是正壓原則；所有產(chǎn)生污染源的房間均應(yīng)設(shè)置為負(fù)壓，以防止內(nèi)部污染源的擴(kuò)散，如特殊的生物安全實(shí)驗(yàn)室、PCR擴(kuò)增室等都應(yīng)設(shè)置為負(fù)壓。通風(fēng)柜和生物安全柜遵循的就是負(fù)壓原則。

對(duì)于集中布置的PCR實(shí)驗(yàn)室：

試劑準(zhǔn)備主操作間和緩沖間設(shè)置為正壓，

樣品處理主操作間和緩沖間設(shè)置為微負(fù)壓，

核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析主操作間和緩沖間設(shè)置為負(fù)壓，以防止擴(kuò)增與電泳操作過程中產(chǎn)生的氣溶膠會(huì)在開門過程中擴(kuò)散到走廊，進(jìn)而擴(kuò)散到試劑準(zhǔn)備室和樣品處理室而導(dǎo)致結(jié)果的假陽性。

樣品處理雖是污染操作，但是在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行的，生物安全柜的功能主要通過去除感染性氣溶膠，保護(hù)實(shí)驗(yàn)樣品、操作者本人和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，使其避免暴露于操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物。

PCR實(shí)驗(yàn)室的試劑配制室、樣品處理室、核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室之間不應(yīng)共用空調(diào)回風(fēng)系統(tǒng)。核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室鄰室還應(yīng)維持相對(duì)微負(fù)壓差。

相關(guān)閱讀

1、PCR實(shí)驗(yàn)室清潔區(qū)改造實(shí)例分享

2、專家解讀丨PCR實(shí)驗(yàn)室24個(gè)難點(diǎn)問題，從此再無疑問！

3、PPT+視頻丨PCR實(shí)驗(yàn)室感染控制

4、PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)置和院感管理

5、復(fù)陽患者不具傳染性，PCR無法區(qū)分病毒是死是活

6、核酸檢測PCR實(shí)驗(yàn)室怎么消毒？