4月9日，丹麥國(guó)立血清研究所（Statens Serum Institut）在medRxiv預(yù)印本平臺(tái)發(fā)表研究論文——“Evaluation of nine commercial SARS-CoV-2 immunoassays”（評(píng)價(jià)九種商用的新冠病毒免疫檢測(cè)試劑）。

文中展示了丹麥國(guó)立血清研究所對(duì)丹麥?zhǔn)袌?chǎng)上的包括萬(wàn)泰在內(nèi)的9種商用的新冠病毒抗體試劑的評(píng)價(jià)結(jié)果，包括3種酶聯(lián)免疫法和6種膠體金法的檢測(cè)試劑。數(shù)據(jù)顯示，萬(wàn)泰新冠病毒總抗體（Total Ab）檢測(cè)試劑的靈敏度（93%）、特異性（100%）、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值（100%）、陰性預(yù)測(cè)值（98%）均為最高，整體檢測(cè)性能優(yōu)于其他被評(píng)估試劑，且無(wú)交叉反應(yīng)。

該評(píng)價(jià)研究選取的30例病例血清樣本全部來自丹麥Hiller?d醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)病房經(jīng)核酸檢測(cè)確診的新冠肺炎患者（n=30）。

對(duì)照血清樣本共82例，包括健康獻(xiàn)血者存檔血清樣本（n=10）、其他冠狀病毒（n=5）或非冠狀病毒（n=45）引起的急性病毒性呼吸道感染患者血清、登革熱病毒抗體陽(yáng)性血清（n=9）、巨細(xì)胞病毒（CMV）抗體陽(yáng)性血清（n=2）、EBV病毒抗體陽(yáng)性血清（n=10），另有1例CMV和EBV均為抗體陽(yáng)性的血清樣本（n=1）。

結(jié)論一：萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑的靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值在9種評(píng)估試劑中均為最高

數(shù)據(jù)顯示，在9種檢測(cè)試劑中，萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑的靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值均為最高。

在3種檢測(cè)試劑中，除萬(wàn)泰外，另外兩個(gè)檢測(cè)試劑來自同一廠家（以下簡(jiǎn)稱對(duì)比廠家）。

萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑與對(duì)比廠家的IgA抗體檢測(cè)試劑均為最高的靈敏度（93%），高于對(duì)比廠家IgG抗體檢測(cè)試劑67%的靈敏度；而在特異性方面，萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑特異性為100%，高于對(duì)比廠家IgA抗體檢測(cè)試劑93%的特異性和IgG抗體檢測(cè)試劑96%的特異性。

在陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值方面，與對(duì)比廠家IgA抗體檢測(cè)試劑（分別為82% 和97%）和 IgG（分別為87%和89%）相比，萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為100%和98%。

結(jié)論二：萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑在交叉反應(yīng)評(píng)價(jià)中未與其他病毒抗體出現(xiàn)交叉反應(yīng)

在交叉反應(yīng)評(píng)價(jià)中，未發(fā)現(xiàn)萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑與測(cè)試的非新冠病毒抗體發(fā)生交叉反應(yīng)。而對(duì)比廠家的IgA抗體檢測(cè)試劑與一種以上呼吸道病毒抗體（4/6 [67%]）的血清有交叉反應(yīng)，并受腺病毒抗體（5/6 [83%]）和登革熱病毒抗體影響（表2）。對(duì)比廠家的IgG抗體檢測(cè)試劑與人冠狀病毒HKU1抗體陽(yáng)性的樣本和兩個(gè)腺病毒抗體陽(yáng)性的樣本存在交叉反應(yīng)。

結(jié)論三：ROC分析表明萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑對(duì)新冠的診斷價(jià)值最大

利用ROC分析評(píng)估了不同ELISA試劑盒間的診斷能力（圖1B）。結(jié)果表明萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑的診斷價(jià)值最大，為0.973（95%CI：0.921-1.000），其次是對(duì)比廠家的IgA抗體檢測(cè)試劑和IgG抗體檢測(cè)試劑，其數(shù)值分別為0.954（95%CI：0.897-1.000）和0.887（95%CI：0.810-0.964）。

圖1 新冠病毒抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)性能

結(jié)論四：利用不同病程樣本對(duì)各檢測(cè)試劑進(jìn)行靈敏度評(píng)估，結(jié)果表明萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑靈敏度優(yōu)于其他被評(píng)估試劑，且針對(duì)發(fā)病10天后樣本的靈敏度穩(wěn)定在100%

為了評(píng)估各檢測(cè)試劑在新冠肺炎不同病程樣本中的靈敏度，該研究將樣本按疾病進(jìn)程分組：早期階段，發(fā)病后7至13天；中期階段，發(fā)病后14至20天；后期階段，發(fā)病后≥21天。各檢測(cè)試劑的靈敏度范圍為早期樣本40%-86%、中期樣本67%-100%、后期樣本78%-89%（圖2）。

針對(duì)早期階段樣本，萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑的靈敏度為71%，在發(fā)病10天后的樣本中，靈敏度穩(wěn)定在100%。對(duì)比廠家IgG抗體檢測(cè)試劑在三個(gè)階段的靈敏度均最低，早期43%，中期67%，后期78%。

圖2 各廠家新冠病毒抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)性能

在討論部分，研究人員還對(duì)萬(wàn)泰新冠病毒總抗體檢測(cè)試劑性能表現(xiàn)優(yōu)異的原因進(jìn)行了分析。

原因一：萬(wàn)泰新冠病毒抗體檢測(cè)試劑采用新冠病毒S1亞基的RBD區(qū)域作為包被蛋白

對(duì)比廠家兩種檢測(cè)試劑均檢測(cè)針對(duì)新冠病毒刺突蛋白S1亞基的特異性IgA抗體或IgG抗體，而萬(wàn)泰檢測(cè)試劑僅檢測(cè)針對(duì)S1亞基的RBD區(qū)域的特異性總抗體（含IgM、IgG、IgA）。RBD區(qū)域約占S1亞基的33％，不存在可被該區(qū)域外部的交叉反應(yīng)識(shí)別的表位。此外，新冠病毒與其他β-冠狀病毒（hCoV-OC43和hCoV-HKU1）之間的RBD差異很大，這可能進(jìn)一步降低與其他β-冠狀病毒發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性。

原因二：萬(wàn)泰新冠病毒抗體檢測(cè)試劑在方法學(xué)上采用雙抗原夾心法

萬(wàn)泰總抗體檢測(cè)試劑采用雙抗原夾心法，而對(duì)比廠家采用間接法。雙抗原夾心法可實(shí)現(xiàn)雙邊特異性，而間接法在方法學(xué)上易受非特異性抗體影響，從而產(chǎn)生一定的非特異性。

新冠病毒肺炎疫情暴發(fā)后，廈門大學(xué)國(guó)家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心第一時(shí)間聯(lián)合養(yǎng)生堂旗下北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司、廈門萬(wàn)泰凱瑞生物技術(shù)有限公司開展應(yīng)急攻關(guān)。在國(guó)家科技部應(yīng)急攻關(guān)項(xiàng)目等多方支持下，聯(lián)合研制出10種新冠病毒檢測(cè)試劑，獲得了1項(xiàng)中國(guó)注冊(cè)證、6項(xiàng)歐盟CE認(rèn)證、1項(xiàng)澳大利亞ARTG注冊(cè)證和1項(xiàng)菲律賓FDA認(rèn)證，有效支持了國(guó)內(nèi)外的抗疫工作。

參考文獻(xiàn)：

Evaluation of nine commercial SARS-CoV-2 immunoassays

doi:https:///10.1101/2020.04.09.20056325