1. 分光光度法氨基酸檢測：主要是利用氨基酸與衍生劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物，該化合物在某一波長處有最大吸收峰，根據(jù)吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生劑為茚三酮。分光光度法具有操作方便、儀器要求簡單、成本低、應(yīng)用范圍廣以及適用于芳香族氨基酸檢測等特點(diǎn)。

2. 毛細(xì)管電泳法氨基酸檢測：根據(jù)分離原理的不同，可分為毛細(xì)管區(qū)帶電泳、毛細(xì)管凝膠電泳、毛細(xì)管等電電泳、毛細(xì)管等速電泳以及膠束電動(dòng)力學(xué)毛細(xì)管電泳。其中，毛細(xì)管區(qū)帶電泳和膠束電動(dòng)力學(xué)毛細(xì)管電泳可用于氨基酸檢測。毛細(xì)管電泳法具有分離效率高、分析時(shí)間短、溶劑用量少、無須梯度洗脫以及適用于氨基酸的手性分離等特點(diǎn)，但該方法分析結(jié)果重現(xiàn)性較差。

3. 近紅外光譜法氨基酸檢測：利用有機(jī)化合物的含氫基團(tuán)在特定波長區(qū)域躍遷，產(chǎn)生光譜的變化，結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)方法間接地實(shí)現(xiàn)氨基酸的定量檢測。近紅外光譜法具有高效、無污染、無破壞性以及可同時(shí)檢測多組分等特點(diǎn)。

4. 氣相色譜法氨基酸檢測：將氨基酸衍生化處理變?yōu)槿菀讱饣奈镔|(zhì)，根據(jù)氣態(tài)樣品中各組分在流動(dòng)相和固定相中的分配系數(shù)的不同，實(shí)現(xiàn)對(duì)氨基酸的定量分析。GC法不僅能檢測氨基酸含量，還可以發(fā)現(xiàn)新氨基酸，但缺點(diǎn)在于操作復(fù)雜、干擾因素多，專一性差。

5. 高效液相色譜法氨基酸檢測：是最常用的一種氨基酸檢測方法。由于大多數(shù)氨基酸本身沒有紫外吸收和熒光反應(yīng)，因此需要對(duì)樣品進(jìn)行衍生化處理將其轉(zhuǎn)化為有紫外吸收和發(fā)射熒光的物質(zhì)，衍生可分為柱前衍生和柱后衍生。

1) 柱前衍生：是樣品在進(jìn)入色譜柱之前，氨基酸經(jīng)衍生化轉(zhuǎn)變?yōu)檫m合反相高效液相色譜檢測的物質(zhì)，常用的衍生劑有丹酰氯、鄰苯二甲醛、萘二甲醛等。實(shí)驗(yàn)常用的色譜柱有C8柱、C18柱和CN柱，檢測方法有HPLC-UV、HPLC-ELSD、HPLC-FLD、HPLC-MS等。

2) 柱后衍生：是樣品經(jīng)離子交換柱分離，分離后的氨基酸再進(jìn)行衍生化處理。常用的柱后衍生化試劑有茚三酮和熒光胺，其中熒光胺的靈敏度比茚三酮高大約3個(gè)數(shù)量級(jí)。柱后衍生主要用于食品、蛋白質(zhì)水解液、生理體液等樣品中氨基酸含量的檢測。

以上由迪信泰檢測平臺(tái)(Biotech-Pack-Analytical)編輯整理

迪信泰檢測平臺(tái)基于高效液相色譜、液質(zhì)聯(lián)用及氣質(zhì)聯(lián)用等多種分析技術(shù)，建立了高效且成熟的氨基酸檢測體系，可檢測甘氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺等近50種氨基酸及其衍生物。

資料來源：

(1) 于泓等. 氨基酸分析方法的研究進(jìn)展. 2005.

(2) 原創(chuàng)力文檔