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1．小明欲從土壤中分離尿素分解菌，請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)土壤中的有些細(xì)菌能分解尿素，是因?yàn)槠淠芎铣?/span>_________。 (2)選取土樣后進(jìn)行一系列稀釋，吸取0.1 mL的106倍稀釋的菌液在滅菌板上進(jìn)行____接種，采用該種接種方法的目的是___________________________。該實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，還設(shè)置了一個(gè)空白平板，空白平板可起____作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：平板上的菌落數(shù)為123、119、130，則每毫升土樣溶液中的活菌數(shù)為____個(gè)。 (3)其他同學(xué)認(rèn)為小明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏大，可能原因是操作出現(xiàn)錯(cuò)誤。為了排除其他同學(xué)的質(zhì)疑，你給小明的建議是________。 (4)為了鑒定分離出來(lái)的菌種是否為尿素分解菌，需要在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，根據(jù)顏色是否變____來(lái)鑒定。 (點(diǎn)擊空白處查看答案) ▼ 【答案】（1）脲酶 (2)涂布 將聚集的細(xì)菌分散成單個(gè)細(xì)胞，從而獲得單個(gè)的菌落 對(duì)照 1.24×109 （3）選取同樣的土樣重復(fù)實(shí)驗(yàn)，吸取菌液時(shí)注意充分搖勻，若兩次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果基本相同，則說(shuō)明沒(méi)有出現(xiàn)操作錯(cuò)誤 （4）紅 2．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但不能被農(nóng)作物直接吸收，土壤中有一種好氧型細(xì)菌能把尿素分解成氨。欲從土壤中篩選出能分解尿素的細(xì)菌并予以純化計(jì)數(shù)，采用了如圖所示的基本操作流程。 請(qǐng)回答下列問(wèn)題： （1）有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生______________。 （2）能在該選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌______________（填“一定”或“不一定”）都能分解尿素，若在平板中加入酚紅，目的菌落出現(xiàn)的變化是_______________。 （3）篩選得到的菌落可以采用平板劃線法進(jìn)一步純化,每次劃線后接種環(huán)必須____________，才能再次用于劃線。純化獲得的菌種可以保存在試管中，塞上棉塞或蓋上封口膜，不能密封，原因是_____________________。 （4）用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有__________________。（答出兩點(diǎn)） (點(diǎn)擊空白處查看答案) ▼ 【答案】（1）脲酶 （2）不一定 周圍指示劑變紅(或周圍出現(xiàn)紅圈) （3）灼燒并冷卻 細(xì)菌有氧呼吸需要?dú)怏w流通 （4）為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中PH穩(wěn)定 3．微生物培養(yǎng)與分離技術(shù)是生物學(xué)中重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。根據(jù)有關(guān)微生物的知識(shí)，分析回答問(wèn)題： （1）培養(yǎng)基的制備需要經(jīng)過(guò)計(jì)算→稱量→溶化→ _________→倒平板，若所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，則應(yīng)該加入_________，熔化時(shí)需要邊加熱邊攪拌，原因是_________________________。 （2）分離純化后對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，一般采用__________________（方法）接種，此種方法估算值往往比實(shí)際值偏_______。 （3）微生物純化培養(yǎng)過(guò)程中，無(wú)菌操作至關(guān)重要，操作是否符合無(wú)菌要求，可以通過(guò)觀察_______________。 （4）為達(dá)到篩選土壤中分解尿素細(xì)菌的目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以尿素作為唯一的________，培養(yǎng)基中加入________指示劑培養(yǎng)后，若變紅則其中含有所需細(xì)菌。 (點(diǎn)擊空白處查看答案) ▼ 【答案】（1）滅菌 瓊脂 防止瓊脂糊底，使燒杯破裂 （2）稀釋涂布平板法 小 （3）培養(yǎng)基上生長(zhǎng)菌落的顏色、形狀、大小、隆起程度是否一致 （4）氮源 酚紅 4．為了從土壤中分離獲得尿素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了A、B兩種培養(yǎng)基其成分如下表所示。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：
注：“＋”表示有，“－”表示無(wú) （1）培養(yǎng)基中的葡萄糖能為細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖提供___________和___________，通常情況下，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)微生物的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是______________________。 （2）據(jù)表判斷，培養(yǎng)基A___________（填“能”或“不能”）用于分離獲得尿素分解菌的單菌落，原因是___________；培養(yǎng)基B不能用于分離尿素分解菌，原因是______________________。 （3）若要統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，可選用___________法進(jìn)行計(jì)數(shù)。 (點(diǎn)擊空白處查看答案) ▼ 【答案】（1）能量 碳源 不同微生物生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不同 （2）不能 該培養(yǎng)基缺少氮源，尿素分解菌不能獲得氮源而無(wú)法生長(zhǎng)繁殖 該培養(yǎng)基沒(méi)有凝固劑，是液體培養(yǎng)基，不能將目的菌分散成單個(gè)細(xì)菌而無(wú)法獲得單菌落 （3）稀釋涂布平板 5．小明欲從土壤中分離尿素分解菌，請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)分離并計(jì)數(shù)尿素分解菌時(shí)，需要配制以尿素為唯一氮源的__________ (填“固體選擇”“液體鑒別”“固體鑒別”或“液體選擇”)培養(yǎng)基。 (2)選取10g土樣后進(jìn)行一系列稀釋，分別吸取0.1mL的104、105、106倍稀釋的菌液在滅菌板上進(jìn)行__________接種，接種前至少要準(zhǔn)備__________個(gè)滅菌平板。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：106倍稀釋的菌液對(duì)應(yīng)平板上的菌落數(shù)為124、118、109，則每克土樣中的活菌數(shù)為________個(gè)。 (3)其他同學(xué)認(rèn)為小明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏大，可能原因是操作出現(xiàn)錯(cuò)誤。為了排除其他同學(xué)的質(zhì)疑，你給小明的建議是______________________________。 (4)為了鑒定分離出來(lái)的菌種是否為尿素分解菌，需要在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入__________，根據(jù)顏色變化判別。 (點(diǎn)擊空白處查看答案) ▼ 【答案】（1）固體選擇 （2）涂布 10 1.17×108 （3）選取同樣的土樣重復(fù)實(shí)驗(yàn)，吸取菌液時(shí)注意充分搖勻，若兩次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果基本相同，則說(shuō)明沒(méi)有出現(xiàn)操作錯(cuò)誤 （4）酚紅指示劑 溫馨提示 |
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