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IP實(shí)驗(yàn)解析--一文讓你徹底明白免疫沉淀的真相?。贵w-蛋白)

 tysdne 2019-11-28

IP 是利用抗體特異性反應(yīng)富集純化目的蛋白的一種方法,可用于目的蛋白的定性和定量分析。


1
IP 研究基礎(chǔ)

2
IP原理

① IP 結(jié)合原理

IP是利用抗原蛋白質(zhì)和抗體的特異性結(jié)合以及細(xì)菌蛋白質(zhì)的“protein A/G”特異性的結(jié)合到抗體(免疫球蛋白)的Fc片段的現(xiàn)象開發(fā)出來的方法。

② IP 分離原理


3
IP 實(shí)驗(yàn)流程

4
IP 實(shí)驗(yàn)實(shí)施

5
IP 定性結(jié)果

①蛋白質(zhì)譜檢測


②蛋白WB檢測


③考馬斯亮藍(lán)檢測


④電鏡晶體結(jié)構(gòu)分析


6
IP 定量結(jié)果

①WB檢測蛋白表達(dá)量


②考馬斯亮藍(lán)檢測


7
IP 拓展

①Co-IP

證明兩個(gè)蛋白在胞內(nèi)有相互作用,但是這個(gè)作用可以是直接相互作用,也可以是形成復(fù)合物后的間接相互作用。

②ChIP

即染色質(zhì)免疫沉淀,是一項(xiàng)研究蛋白質(zhì)與DNA相互結(jié)合的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。

③RIP

又稱為RNA-IP,即RNA免疫共沉淀,是研究蛋白質(zhì)與RNA互作結(jié)合的經(jīng)典技術(shù)方法。   

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