2019年7月18日/醫(yī)麥客 eMedClub/--如何使用其他T細(xì)胞選擇性地靶向和摧毀癌性T細(xì)胞？這個(gè)問題一直困擾著希望將CAR-T細(xì)胞療法應(yīng)用于T細(xì)胞癌的研究人員。

總部位于圣路易斯的生物技術(shù)公司W(wǎng)ugen正在通過開發(fā)針對(duì)T細(xì)胞癌癥的第一種同種異體CAR-T療法來填補(bǔ)這一治療缺口。

據(jù)美國癌癥協(xié)會(huì)稱，有許多類型的T細(xì)胞癌，但它們都相對(duì)罕見，例如，T細(xì)胞癌占非霍奇金淋巴瘤的比例不到15％。

一種類型的T細(xì)胞癌是T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血?。═細(xì)胞ALL），是癌的不常見形式，其中癌細(xì)胞是前體T細(xì)胞。T細(xì)胞ALL占所有類型ALL的15-25％，僅占所有淋巴瘤的1％（淋巴系統(tǒng)的癌癥，包括稱為淋巴細(xì)胞的某些白細(xì)胞）。雖然T細(xì)胞ALL存活率一直在攀升，現(xiàn)在與B細(xì)胞ALL率（約85％）相當(dāng)，但對(duì)于復(fù)發(fā)性疾病來說，T細(xì)胞ALL仍然具有較高的復(fù)發(fā)率和較低的存活率（低于25％）。

目前T細(xì)胞ALL的治療選擇包括化療、放射治療和骨髓移植（也稱為干細(xì)胞移植），骨髓移植是最好的治療選擇。目前還沒有FDA批準(zhǔn)的針對(duì)T細(xì)胞癌的靶向治療。

開發(fā)用于T細(xì)胞癌癥的CAR-T治療平臺(tái)具有其自身獨(dú)特的挑戰(zhàn)。無論是健康的T細(xì)胞還是癌T細(xì)胞，所有T細(xì)胞都表達(dá)相同的表面蛋白，稱為抗原。為了開發(fā)針對(duì)T細(xì)胞癌的CAR-T療法，將CAR-T細(xì)胞重編碼以靶向這些T細(xì)胞特異性抗原中的一種。

因?yàn)镃AR-T細(xì)胞是T細(xì)胞的修飾類型，它們也表達(dá)與它們靶向的癌性T細(xì)胞相同的抗原。這將導(dǎo)致CAR-T細(xì)胞識(shí)別并相互靶向，導(dǎo)致CAR-T細(xì)胞的自殺，這會(huì)使CAR-T細(xì)胞過少而無法殺死患者的癌細(xì)胞，從而限制了CAR-T療法的有效性。

為了產(chǎn)生針對(duì)癌性T細(xì)胞的CAR-T細(xì)胞，必須從CAR-T細(xì)胞本身除去CAR-T細(xì)胞靶向的T細(xì)胞抗原，使它們不會(huì)相互攻擊。通過去除CAR-T細(xì)胞彼此識(shí)別為敵人的能力，這使得CAR-T細(xì)胞能夠持續(xù)更長時(shí)間并且對(duì)抗癌性T細(xì)胞更具活性。

自體（或患者衍生的）CAR-T細(xì)胞對(duì)于抗T細(xì)胞癌具有挑戰(zhàn)性。當(dāng)從病人的血液中提取T細(xì)胞來制造CAR-T細(xì)胞時(shí)，要從健康細(xì)胞中完全純化癌細(xì)胞是非常困難的。這就有可能在CAR-T細(xì)胞治療中無意中留下一些癌變T細(xì)胞，這可能會(huì)將癌變T細(xì)胞重新引入病人體內(nèi)，并產(chǎn)生耐治療細(xì)胞。

事實(shí)上，這種情況發(fā)生在一個(gè)B細(xì)胞ALL的病人身上，他接受了自體抗CD19 CAR-T治療Kymriah，但9個(gè)月后因表達(dá)抗CD19 CAR的癌性B細(xì)胞復(fù)發(fā)。在Kymriah的制造過程中被無意中植入了一個(gè)癌性B細(xì)胞，并在治療過程中被重新引入病人體內(nèi)。這些表達(dá)CAR- 19的抗癌B細(xì)胞躲過了CAR-T細(xì)胞的攻擊，因?yàn)樵诿恳粋€(gè)癌細(xì)胞上，抗CD19的細(xì)胞都與表面的CD19結(jié)合，這使得CAR- T細(xì)胞無法結(jié)合并摧毀表達(dá)CAR-19的癌細(xì)胞。不幸的是，這個(gè)病人死于CAR-T耐藥癌細(xì)胞的增殖。

因此，靶向T細(xì)胞癌癥的唯一可行方法是使用同種異體（或健康供體衍生的）CAR-T療法，其中來自健康供體的T細(xì)胞被修飾以用于多個(gè)患者。

▲ 健康的T細(xì)胞和惡性T細(xì)胞具有相同的表面蛋白（靶抗原）

然而，同種異體療法需要克服自身的一系列挑戰(zhàn)，即危及生命的副作用，稱為移植物抗宿主?。℅vHD）。當(dāng)供體CAR-T細(xì)胞將患者的細(xì)胞識(shí)別為外來并攻擊它們時(shí)，發(fā)生GvHD。

大多數(shù)其他針對(duì)B細(xì)胞癌的CAR-T療法，以及所有針對(duì)T細(xì)胞癌的CAR-T療法都是自體的，這使得針對(duì)T細(xì)胞癌的CAR-T療法成為一個(gè)待填補(bǔ)的理想的治療方式。

Wugen的聯(lián)合創(chuàng)始人兼CSO Matthew Cooper受到啟發(fā)，專注于那些患有T細(xì)胞ALL的患者，當(dāng)他們聽說患有罕見T細(xì)胞癌的患者接受治療沒有治療方案時(shí)，他們決定開發(fā)這種療法。

Wugen的CAR-T細(xì)胞被基因編輯以去除T細(xì)胞特異性靶抗原（降低自殺能力并使其更有效）和T細(xì)胞受體（降低GvHD風(fēng)險(xiǎn)）。

到目前為止，Wugen正在開發(fā)兩種同種異體CAR-T療法：WU-CART-007，其靶向T細(xì)胞抗原CD7; 和WU-CART-002，其靶向T細(xì)胞抗原CD2。從CAR-T細(xì)胞中除去靶抗原：從WU-CART-007細(xì)胞中除去CD7，從WU-CART-002細(xì)胞中除去CD2。

WU-CART-007 正在開發(fā)用于治療復(fù)發(fā)和難治性T細(xì)胞ALL和其他非霍奇金T細(xì)胞淋巴瘤。選擇CD7作為靶標(biāo)，是因?yàn)樗谠S多類型的T細(xì)胞癌上表達(dá)。它也在大多數(shù)自然殺傷（NK）非霍奇金淋巴瘤和白血病中表達(dá)，以及約25％的急性髓性白血病（AMLs）中表達(dá)，這意味著它可用于靶向其他類型的T細(xì)胞和NK癌癥。

為了產(chǎn)生WU-CART-007細(xì)胞，使用CRISPR / Cas9以高精度去除CD7抗原和T細(xì)胞受體（特別是α鏈）-約95％的所得CAR-T細(xì)胞缺乏這兩種受體。Wugen的靈感來自于成功的UCART19(由Allogene和Servier開發(fā))的首次人體試驗(yàn)，這是一種通過移除T細(xì)胞受體的α鏈而產(chǎn)生的CAR-T基因療法。

在多個(gè)T細(xì)胞ALL細(xì)胞系中，WU-CART-007以特定靶點(diǎn)的方式平均殺死了95%的T細(xì)胞。在患有T細(xì)胞ALL的小鼠中，首先測(cè)試不含T細(xì)胞受體的T細(xì)胞，以評(píng)估它們誘導(dǎo)GvHD的能力。這些T細(xì)胞沒有誘導(dǎo)GvHD；通過移除T細(xì)胞受體，信號(hào)被停止，CAR-T細(xì)胞不再能識(shí)別為外來的，有效地預(yù)防了GvHD。

在接受WU-CART-007的T細(xì)胞ALL小鼠中，他們的血液中未檢測(cè)到T細(xì)胞ALL細(xì)胞。令人興奮的是，注射后6周，血液中仍可檢測(cè)到WU-CART-007細(xì)胞。這種在小鼠中長期存在的現(xiàn)象可以歸因于去除CD7靶抗原和防止CAR-T細(xì)胞的自我殺傷。

CAR-T治療的主要嚴(yán)重副作用預(yù)計(jì)是T細(xì)胞再生障礙，患者的T細(xì)胞數(shù)量較低或沒有T細(xì)胞，因?yàn)槭褂肳U-CART-007治療的小鼠出現(xiàn)了T細(xì)胞再生障礙。CAR-T針對(duì)的是特定的T細(xì)胞特異性抗原，健康的T細(xì)胞和癌變的T細(xì)胞都表達(dá)了目標(biāo)抗原，因此CAR-T細(xì)胞會(huì)不加選擇地殺死患者的所有T細(xì)胞。T細(xì)胞再生障礙也是骨髓移植后常見的嚴(yán)重副作用。長期的T細(xì)胞發(fā)育不良問題的一個(gè)潛在解決方案是在CAR-T中設(shè)置所謂的“自殺基因”，其可以被打開并使CAR-T細(xì)胞在特定時(shí)間死亡。

到目前為止，臨床前研究表明，Wugen的平臺(tái)是同種異體T細(xì)胞治療T細(xì)胞癌癥臨床可行的方法。雖然到目前為止所有的工作都是臨床前的，但Wugen目前正在計(jì)劃一項(xiàng)WU-CART-007的臨床試驗(yàn)，治療復(fù)發(fā)和難治的CD7 T細(xì)胞ALL，預(yù)計(jì)將于明年年初開始。

據(jù)Cooper評(píng)論說，Wugen的同種異體CAR-T策略是“T細(xì)胞惡性腫瘤唯一臨床可行的策略”。這種治療方法可以為沒有其他選擇的患者提供治療選擇。望明年年初將要開展的臨床試驗(yàn)可以提供最新的數(shù)據(jù)來填補(bǔ)這一缺口。