血凝試驗(yàn)是臨床工作中常用的檢測(cè)項(xiàng)目，血凝試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性是指導(dǎo)臨床正確治療的保障。作為血凝功能異常的篩查試驗(yàn)，在出血性疾病的診斷、抗凝治療監(jiān)測(cè)，術(shù)前檢查中具有重要作用，且應(yīng)用廣泛。由于凝血試驗(yàn)與一般的檢驗(yàn)項(xiàng)目測(cè)定不同，其影響因素具有特殊性。當(dāng)其啟動(dòng)因子被某些因素激活后，就會(huì)發(fā)生一系列連鎖反應(yīng)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的極大誤差。因此，對(duì)于檢驗(yàn)人員和臨床醫(yī)生掌握和了解影響血凝試驗(yàn)相關(guān)因素顯得尤為重要。血凝試驗(yàn)的因素有以下幾個(gè)方面。

　　1 血樣的采集與處理

　　1.1 采血技術(shù)

　　1.1.1 患者應(yīng)處于平靜狀態(tài)。因?yàn)榍榫w緊張，劇烈運(yùn)動(dòng)會(huì)激活或干擾血小板、凝血因子和纖溶酶原等成分。

　　1.1.2 患者應(yīng)空腹。進(jìn)餐后，血中的乳糜微粒等將對(duì)血凝試驗(yàn)結(jié)果造成干擾。

　　1.1.3 采血前不應(yīng)拍打采血部位，必須順利“一針見(jiàn)血”，避免混入組織液或發(fā)生溶血。因?yàn)榻M織液中會(huì)有豐富的因子Ⅲ，可激活外源性凝血途徑，加速凝血酶源的消耗，使試驗(yàn)結(jié)果偏低。

　　1.1.4 壓脈帶不應(yīng)扎的太緊，壓迫時(shí)間不應(yīng)過(guò)長(zhǎng)。壓力大及束縛時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可影響局部的濃縮和內(nèi)皮細(xì)胞釋放T-PA，后者可引起纖溶活動(dòng)增強(qiáng)。

　　 1.1.5 采血速度要適當(dāng)，若太快易產(chǎn)生氣泡，使纖溶蛋白原、因子V、因子Ⅲ變性。因此，建議使用定量真空采血管。

1.1.6 采血后要立即與抗凝劑混合，但不要用力震蕩。NCCLS推薦使用帶塞塑料或聚乙烯試管采血，因不帶蓋，血漿pH值升高，影響試驗(yàn)結(jié)果。

　　1.1.7 采血順序?qū)υ囼?yàn)結(jié)果也有影響。朱忠勇報(bào)道［１］：PT血樣采集順序第二管、第三管與第一管比較差異有顯著性(Ｐ＜0.01)，APTT的差異則無(wú)顯著性(P＞0.05)。這可能與采血時(shí)壓脈帶壓迫時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有關(guān)。因此，采多管血樣時(shí)，血凝試驗(yàn)標(biāo)本應(yīng)取第一管。

　　1.2 標(biāo)本運(yùn)輸、保存與處理 標(biāo)本應(yīng)隨采隨測(cè)，如需運(yùn)輸，標(biāo)本應(yīng)在室溫下運(yùn)送，因低溫會(huì)損傷血小板活化因子使PT、APTT結(jié)果降低，血漿標(biāo)本原則上應(yīng)立即檢測(cè)，血液一旦離體后即開(kāi)始變化，隨離體的時(shí)間不同凝血因子逐漸消耗，從而檢測(cè)出的結(jié)果也不同。在原血漿管置室溫2h測(cè)得的結(jié)果與立即測(cè)定的PT、APTT結(jié)果差異無(wú)顯著性(P＞0.05)而分離出血漿的試管置室溫2h所測(cè)結(jié)果與立即測(cè)定PT、APTT結(jié)果有明顯差異(P＜0.01)［２］，因此，凝血試驗(yàn)應(yīng)在室溫保存4h內(nèi)完成，不能完成4℃冰箱保存，24h內(nèi)完成。-20℃保存標(biāo)本需1周內(nèi)完成，否則會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響［３］。血液離心是凝血試驗(yàn)標(biāo)本處理的關(guān)鍵步驟，離心的目的就是盡可能地除去血漿中的血小板，使標(biāo)本成為乏血小板血漿，以便排除血小板數(shù)量和功能對(duì)試驗(yàn)的影響，有報(bào)道認(rèn)為［４］標(biāo)本離心的相對(duì)離心力RCF≥2000g，離心時(shí)間不少于15min為宜。

　　1.3 抗凝劑的選擇 抗凝劑的選擇對(duì)結(jié)果起著重要作用，根據(jù)ICSH及ICTH推薦0.019mol/L的枸櫞酸鈉，作為凝血因子檢測(cè)的首選抗凝劑。因枸櫞酸鈉對(duì)Ⅴ、Ⅷ因子有一定的保護(hù)作用，因不受肝素影響還適用于接受肝素治療的病人的監(jiān)測(cè)。而草酸鹽能與鈣離子形成不溶性沉淀物，影響的光電終點(diǎn)。肝素可與AT-Ⅲ作用抑制凝血因子的反應(yīng)，EDTA能抑制或干涉纖維蛋白凝塊形成纖維蛋白原單體聚合，且對(duì)Ⅴ因子保護(hù)性差。

　　血液與抗凝劑的比例必須相當(dāng)準(zhǔn)確，應(yīng)按9∶1比例混合，9份血液準(zhǔn)確地講是指9份紅細(xì)胞壓積正常血液中血漿的量而言，抗凝劑只對(duì)血漿起作用，如抗凝劑加入不準(zhǔn)確和由于貧血或紅細(xì)胞增多癥血漿量的變化而引起抗凝劑在血漿中絕對(duì)含量改變，進(jìn)而影響試驗(yàn)結(jié)果。因此在日常工作中要注意紅細(xì)胞壓積的變化，當(dāng)HCT超出或低于正常范圍時(shí)，應(yīng)用計(jì)算公式隨時(shí)調(diào)整抗凝劑的用量，以保證抗凝劑有血漿中的絕對(duì)含量不變［５］。公式：抗凝劑用量(ml)=0.00185×全血量(ml)×(1-HCT%)