、 火山圖是大家在閱讀文獻(xiàn)時(shí)經(jīng)常看到的圖,主要用于展示基因的差異表達(dá),在前期篩選課題的時(shí)候常用,且常與熱圖搭配出現(xiàn)。因?yàn)槔L制出來(lái)的差異表達(dá)的基因形如火山,故得名火山圖。 火山圖主要用于展示顯著差異表達(dá)的基因。通常對(duì)顯著的定義是:p0.05且兩組表型的基因表達(dá)差異/Fold Change在兩倍以上,即FC>=2。但在文獻(xiàn)中我們常見的火山圖橫縱坐標(biāo)分別是log2FC與-log10Pvalue。以2為底數(shù),取基因表達(dá)變化的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)使得結(jié)果更容易讀懂:比如,某基因在實(shí)驗(yàn)組中的表達(dá)是對(duì)照組中的4倍,log24=2,若基因在實(shí)驗(yàn)組中的表達(dá)是對(duì)照組的2倍,log22=1。在火山圖中,橫坐標(biāo)每增加一個(gè)單位,則說明基因在兩組表型中呈兩倍的差異,。在火山圖中取10為底數(shù)p值的負(fù)對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)主要兩個(gè)考慮:一,可以使得縱坐標(biāo)的刻度更合理,因?yàn)閜值間的差異可能非常大,可以取值正無(wú)窮小到1之間;二,對(duì)數(shù)處理后的原p值越小對(duì)應(yīng)的縱坐標(biāo)值越大,即越顯著。 火山圖的本質(zhì)是散點(diǎn)圖,理論上可以畫散點(diǎn)圖的工具都可以用來(lái)畫火山圖。比如在線網(wǎng)站NetworkAnalyst,SangerBox里面的火山圖繪制工具都可以做火山圖。工具雖然方便但是自己可操作的空間少了,本文先向大家介紹人人都可以快速掌握的excel繪制火山圖的方法。 數(shù)據(jù): 65例病人的正常組織與對(duì)應(yīng)的直腸癌中的基因表達(dá)數(shù)據(jù)(GEO accession: GSE20842) Excel繪制火山圖主要分為以下幾個(gè)步驟: 打開下載的原始數(shù)據(jù)集,選中表格中P.Value,logFC兩列復(fù)制到新的excel1中(原始數(shù)據(jù)中l(wèi)ogFC即默認(rèn)的底數(shù)為2,即log2FC) 在新的表格中C2單元格中輸入=-LOG10(A2) 后Enter鍵,得到單元格結(jié)果。再點(diǎn)雙擊擊單元格右下角則會(huì)以同樣的函數(shù)生成這一列相應(yīng)的值 從數(shù)據(jù)中篩選出p<=0.05且|log2fc|>=2的數(shù)據(jù)到新列(E,F(xiàn),G)中得到如下excel1表格(自此我們得到了繪制火山圖所需要完整的數(shù)據(jù),excel1中A,B,C三列為原始數(shù)據(jù)中p ,log2FC及對(duì)應(yīng)的-log10(P.Value)值。E,F(xiàn),G則為篩選后的數(shù)據(jù)值) 依次選中B/C兩列-插入-圖標(biāo)散點(diǎn)圖,生成火山圖 自定義火山圖參數(shù)更改圖表樣式 選中圖片-圖表工具-設(shè)計(jì)-圖表樣式(自由搭配滿意的圖片樣式) 在生成火山圖后,我們需要從所有數(shù)據(jù)中篩選出差異表達(dá)的基因,即篩選出p<=0.05且|log2fc|>=2的數(shù)據(jù) 單擊選中圖標(biāo)數(shù)據(jù)任意一個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)-右鍵選擇“選擇數(shù)據(jù)”-“添加” 在添加的數(shù)據(jù)系列中填寫合適的系列名稱與橫縱坐標(biāo)軸值(此處系列名稱我們填 p<>,即我們之前篩選出來(lái)的E,G,F(xiàn)三列數(shù)據(jù);X,Y軸填寫數(shù)據(jù)對(duì)應(yīng)的單元格范圍,此處我們都是2:500)。自此,我們就在火山圖中標(biāo)記出了我們感興趣的差異表達(dá)的基因。 我們可以為火山圖加坐標(biāo)軸標(biāo)題,圖例,圖表標(biāo)題,數(shù)據(jù)標(biāo)簽等元素 ![]() 單機(jī)選中圖表中任意一個(gè)數(shù)據(jù)-右鍵選擇“設(shè)置數(shù)據(jù)系列格式” 通過此菜單欄,可以自定義圖表中的任一元素參數(shù) ![]() 選中你感興趣的數(shù)據(jù)點(diǎn)-右鍵選擇“添加數(shù)據(jù)標(biāo)簽”,顯示該數(shù)據(jù)對(duì)應(yīng)的值,然后在原始數(shù)據(jù)中匹配相應(yīng)的genesymbol添加就好啦(同時(shí)可以在設(shè)置數(shù)據(jù)系列格式中自定義參數(shù)) ![]() 本文我們向大家演示如何通過excel繪制自己滿意的火山圖。Excel繪制火山圖主要分為數(shù)據(jù)的處理(篩選你感興趣的數(shù)據(jù)到新列),選擇數(shù)據(jù)并作標(biāo)記,添加圖表元素(坐標(biāo)軸與標(biāo)題名,圖例等參數(shù)),修改元素參數(shù),添加數(shù)據(jù)標(biāo)簽(可以添加對(duì)應(yīng)的gene symbol)等內(nèi)容。Excel操作簡(jiǎn)單普遍,相信大家都可以繪制自己滿意的火山圖?。ㄈ粝肜L制更美觀的火山圖,請(qǐng)關(guān)注下周推文:用R語(yǔ)言繪制火山圖) |
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