點(diǎn)擊上方藍(lán)色小字↑↑↑----“干細(xì)胞者說(shuō)”,加星標(biāo),長(zhǎng)期關(guān)注本科普號(hào)。 人生小哲理干細(xì)胞者說(shuō) 不貶不褒 如實(shí)陳述 方為科普之道 正文
來(lái)源:賽默飛 什么是干細(xì)胞? 入門者可以自學(xué)下圖 進(jìn)階版可學(xué)習(xí)下圖 圖1.誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞 (iPSC) 和胚胎干細(xì)胞 (ESC)的自我更新和分化形成的新細(xì)胞類型 目前鑒定干細(xì)胞的主要方法有哪些呢? 一般有三種:傳統(tǒng)AP 染色鑒定形態(tài)、核酸方法鑒定(qPCR 檢測(cè)基因表達(dá)、染色體核型分析、轉(zhuǎn)座因子分析、DNA 甲基化分析),還有基于抗體的蛋白鑒定方法(如免疫熒光、免疫印跡、流式細(xì)胞術(shù)等應(yīng)用)。 每種干細(xì)胞的經(jīng)典標(biāo)志物有哪些? 鑒定每種類型的干細(xì)胞,首先要知道對(duì)應(yīng)的標(biāo)志物有哪些。以下整理出每種類型細(xì)胞對(duì)應(yīng)的經(jīng)典marker和部分抗體。 為了維持未分化的干細(xì)胞狀態(tài),iPSC和ESC均需要關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá),如Nanog和OCT4,它們會(huì)調(diào)節(jié)對(duì)細(xì)胞分裂、分化和發(fā)育至關(guān)重要的基因。除了這些轉(zhuǎn)錄因子之外,通常PSC還會(huì)表達(dá)一組特定的細(xì)胞表面蛋白(如TRA-1-60、TRA-1-81、SSEA3和SSEA4)。對(duì)這些標(biāo)志物的檢測(cè)是鑒定iPSC和ESC的第一步。一般使用抗體對(duì)這些多能性marker進(jìn)行免疫熒光染色。左:DyLight 488標(biāo)記的抗SSEA5(貨號(hào)MA1-144-D488,綠色)和DyLight 650標(biāo)記的抗SSEA4(貨號(hào)MA1-021-D650,紅色)。中:DyLight 488標(biāo)記的抗Lin28(MA1-016-D488)。右:DyLight 650標(biāo)記的抗Sox20 (MA1-014-D650)。細(xì)胞核DNA使用Invitrogen DAPI(貨號(hào)D1306)。表1: 常用多能干細(xì)胞標(biāo)志物的抗體PSC有可能分化成以下三個(gè)胚胎胚層的細(xì)胞:外胚層、中胚層和內(nèi)胚層,這些胚層可以進(jìn)一步發(fā)育成各種分化的細(xì)胞類型。表2:代表性內(nèi)胚層、中胚層、外胚層標(biāo)志物 多能干細(xì)胞會(huì)分化成神經(jīng)譜系細(xì)胞,包括神經(jīng)干細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突細(xì)胞和神經(jīng)元。 圖3. PSC分化為神經(jīng)譜系的路徑 表3.神經(jīng)干細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元標(biāo)志物 造血干細(xì)胞(HSC)是多能細(xì)胞,可以生成血液中的所有細(xì)胞類型,包括B和T淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、樹突細(xì)胞、單核細(xì)胞、血小板和紅細(xì)胞。HSC非常小并且是非貼壁細(xì)胞,這使得它們很難純化或通過(guò)顯微鏡觀察。靜止?fàn)顟B(tài)時(shí),HSC可見于紅骨髓。通常用流式細(xì)胞術(shù)鑒定HSC表面抗原,一般要用10至14個(gè)抗體配色組合。重編程技術(shù)和人PSC的造血分化的最新進(jìn)展為研究造血發(fā)育和模擬血液疾病創(chuàng)造了全新的機(jī)會(huì)。 圖4. 造血干細(xì)胞分化示意圖 表4.代表性造血干細(xì)胞標(biāo)志物 間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是多能細(xì)胞,可以分化成許多細(xì)胞類型,包括骨骼、脂肪、軟骨、肌肉和皮膚。MSC最初是從骨髓樣本中分離出來(lái)的,但最近它們已經(jīng)在許多其他類型的組織中被發(fā)現(xiàn),生成一個(gè)具有高分化可能性的異質(zhì)且豐富的細(xì)胞群。MSC在治療各種疾病(比如心血管疾病和克羅恩?。┲械目赡苄允悄壳案杉?xì)胞研究的一個(gè)熱門課題。 圖5.間充質(zhì)干細(xì)胞的分化可能性 根據(jù)國(guó)際細(xì)胞治療協(xié)會(huì)(ISCT)提出的基于體外培養(yǎng)細(xì)胞特征的標(biāo)準(zhǔn),MSC不表達(dá)CD34、CD45、CD14、HLA-DR、CD11b和CD79a,表達(dá)表面標(biāo)記物CD73、CD90和CD105。 體內(nèi)研究表明,MSC的陽(yáng)性指標(biāo)是CD146、Stro-1、CD90、CD105、CD44和CD73,陰性指標(biāo)是CD45、CD11b和CD14。 表5.間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)志物 圖6. 體外PSC分化以產(chǎn)生β細(xì)胞和肝細(xì)胞樣細(xì)胞的示意圖 表6. 胰腺和肝臟細(xì)胞系標(biāo)志物 查看完整干細(xì)胞標(biāo)志物,輸入網(wǎng)址:www.thermofisher.com /stemcellabs,即可瀏覽,或免費(fèi)下載干細(xì)胞研究抗體海報(bào)。 污染的細(xì)胞:我覺得自己可以這么搶救 相關(guān)科普 科普:人體2萬(wàn)億免疫細(xì)胞與衰老、疾病的關(guān)系 細(xì)胞守護(hù)者:一組妙趣橫生的表情包 免疫細(xì)胞神奇動(dòng)圖 精彩科普:人體免疫細(xì)胞是如何追殺腫瘤細(xì)胞的? 精彩科普:關(guān)于免疫細(xì)胞,看完這篇你就全懂了 精彩神文!一文告訴你糖尿病到底有什么危害? 精彩科普:關(guān)于干細(xì)胞,或許看完這篇你就全懂了 — END — 干細(xì)胞者說(shuō) - 科普 情懷 責(zé)任 - |
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