![]() diewisch歷史唯物主義者昨天 14:25
CRISPR-Cas9是一種多功能的rna引導的基因組編輯工具。 在這里,我們證明了在CRISPR RNA (crRNA)中用DNA核苷酸部分替換RNA核苷酸可以在人類細胞中實現(xiàn)有效的基因編輯。當同時使用crRNA和sgRNA以及多個引導序列時,這種部分DNA替換策略可以保持目標活性。部分DNA置換也適用于另一個CRISPR系統(tǒng)Cpf1的crRNA。 我們發(fā)現(xiàn),通過對離靶點裂解的聚焦分析、錯配耐受性的測量以及對離靶點的全基因組譜分析,引導序列中的部分DNA置換顯著減少了離靶點基因組的編輯。以Cas9-sgRNA復合物的結構為指導,crRNA的3 '端大部分可以被DNA核苷酸取代,而5 '和3 ' -DNA取代的crRNA可以實現(xiàn)高效的基因組編輯。 Cas9在DNA-RNA嵌合體的引導下,可以提供一種通用的策略來降低人類細胞和非目標基因組編輯的成本。 |
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