以昨天的第三篇文章為例,在文章中作者使用質(zhì)譜的方法鑒定出了stat3的可能糖基化位點,隨后通過驗證發(fā)現(xiàn)OGT誘導(dǎo)stat3的T717位點發(fā)生糖基化。這種找位點的方式比較傳統(tǒng),耗時費力,隨著生物信息學(xué)的發(fā)展,當(dāng)然是由網(wǎng)站可以預(yù)測糖基化發(fā)生位點的,下面為大家講解一下這些好用的網(wǎng)站。 1. YinOYang 1.2 Server 進(jìn)入該網(wǎng)站,網(wǎng)址是http://www.cbs./services/YinOYang/. 在主頁可以看到該網(wǎng)站相當(dāng)簡潔,這也便于大家使用,在搜索欄中輸入目的蛋白序列,我在這里輸入stat3的蛋白序列(注意是FASTA格式)。 在threshold欄中,可以修改閾值,這里我選擇0.5,點擊submit后,可以看到以下界面。 在這里,網(wǎng)站首先顯示該預(yù)測蛋白的完整序列,隨后會出現(xiàn)一些可能被糖基化的位點,圖中用“G”標(biāo)注的,為了更加清楚的顯示結(jié)果,在網(wǎng)頁的下方,會出現(xiàn)具體位點的分值和對于的展示圖。 點擊Graphics in postScript可以直接下載圖片的矢量圖,可直接用于文章中。 2. GPP 進(jìn)入GPP網(wǎng)站,網(wǎng)址為http://comp.chem./glyco/。 在網(wǎng)站首頁,選擇WEB services下方的GlycoPred,隨后按照提示點擊Calculation。 點擊進(jìn)入后,在搜索欄中輸入stat3的蛋白序列(FASTA格式),隨后在下方輸入自己的郵箱地址,預(yù)測后的結(jié)果會通過郵件的形式發(fā)送給你。 糖基化修飾主要分為兩種類型,分別為O-連接的糖基化和N-連接的糖基化,前者主要發(fā)生在ser和thr,后者主要發(fā)生在Asn氨基酸上。上面兩個網(wǎng)站主要預(yù)測O-連接的糖基化,下面給大家介紹一下預(yù)測N-連接的糖基化的網(wǎng)站。 3. NetNGlyc 1.0 Server 進(jìn)入該網(wǎng)站,網(wǎng)址為http://www.cbs./services/NetNGlyc/. 該網(wǎng)站和YinOYang 1.2 Server比較類似,進(jìn)入首頁后,在搜索欄輸入蛋白序列。 點擊submit,獲得預(yù)測結(jié)果,其中糖基化修飾主要發(fā)生在Asn(N)氨基酸上,“+”表示可能發(fā)生糖基化的位點,“-”表示該位點不能發(fā)生糖基化。 4.GlycoMine 網(wǎng)址為http://glycomine.erc./Lab/GlycoMine/。 進(jìn)入該網(wǎng)站,在搜索欄中輸入stat3的蛋白序列,在類型type欄中可以看到,該網(wǎng)站提供三種糖基化修飾方式,分別為W-linked,O-linked和N-linked,在這里選擇N-linked。 點擊submit后,獲得預(yù)測結(jié)果(這一步需要耐心等待較長時間)。在結(jié)果中,按照糖基化修飾的可能性從高到低依次排列。 通過這四個糖基化預(yù)測網(wǎng)站就可以輕松找到你想研究蛋白的可能糖基化位點,之后再通過實驗證明OGT通過預(yù)測位點來調(diào)控目的蛋白的功能,就能輕松的規(guī)劃整個課題。 |
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