概述

藥物中特殊雜質(zhì)(或有關(guān)物質(zhì))的研究是藥物質(zhì)量控制的重要部分。該研究可以為藥物的生產(chǎn)工藝優(yōu)化、質(zhì)量研究與控制、穩(wěn)定性考察、藥理毒理及臨床研究等提供重要的參考依據(jù)。所以，特殊雜質(zhì)研究直接體現(xiàn)創(chuàng)新藥物研究的水平。 

特殊雜質(zhì)研究的規(guī)范

根據(jù)ICH的要求，創(chuàng)新藥物原料和新制劑中的雜質(zhì)，表觀含量在0.1%及其以上的雜質(zhì)，以及表觀含量在0.1%以下的具強(qiáng)烈生物作用的雜質(zhì)或毒性雜質(zhì)，均要求進(jìn)行定性分析、鑒定結(jié)構(gòu)。 這些雜質(zhì)一般包括藥物合成中的有機(jī)雜質(zhì)和穩(wěn)定性試驗中的分降解產(chǎn)物，即藥物中的有關(guān)物質(zhì)。

對藥物中的特殊雜質(zhì)/有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性研究具有重要意義。通過有關(guān)物質(zhì)的研究與鑒定,可以獲得有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，分析其形成機(jī)制；

以便：① 優(yōu)化生產(chǎn)過程(原料藥的合成工藝與精制純化條件，制劑的處方、相容性和加工工藝)，盡量避免有關(guān)物質(zhì)的形成；② 優(yōu)化設(shè)置貯藏條件，減少分降解產(chǎn)物的產(chǎn)生。使它們的含量達(dá)到合理的限度水平要求。

即使是仿制藥品，在其研制和生產(chǎn)過程中，也必須研究其雜質(zhì)譜與原研藥品的一致性。如出現(xiàn)新增雜質(zhì)，應(yīng)按上述ICH的基本要求進(jìn)行全面研究，制訂適宜的檢查控制項目。

多組分藥物中共存的異構(gòu)體，或抗生素多組分，一般不作為雜質(zhì)檢查項目。 必要時,這些共存物質(zhì)可在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定其比例，以保證原料藥的質(zhì)量一致性。

例如： 硫酸慶大霉素中“慶大霉素C組分”(C1、CI,a、C2、C2a)相對比例的檢查:C,應(yīng)為25%~50%，Cu應(yīng)為15%~0%,C2+Ca應(yīng)為20%~50%頭孢泊肟酯中“異構(gòu)體”A和B的檢査，在含量測定項下記錄的供試品溶液色譜圖中，頭孢泊肟酯異構(gòu)體B峰面積與頭孢泊肟酯異構(gòu)體A,B峰面積和之比應(yīng)為0.50~0.60。

但當(dāng)共存物質(zhì)為毒性雜質(zhì)時,該物質(zhì)就不再認(rèn)為是共存物質(zhì)。例如，單一對映體藥物中,可能共存的其他對映體，應(yīng)作為雜質(zhì)檢査，并設(shè)置“比旋度”或“光學(xué)異構(gòu)體”檢查項目;對消旋體藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),必要時,則應(yīng)該設(shè)置旋光度檢査項目。

特殊雜質(zhì)檢查方法的選擇

藥物中特殊雜質(zhì)的檢查分析方法應(yīng)專屬、靈敏。雜質(zhì)檢查通常應(yīng)盡量采用現(xiàn)代色譜分離分析手段，主成分與雜質(zhì)和降解產(chǎn)物均應(yīng)有良好的分離度；其檢測限應(yīng)滿足限度檢查的要求；對于需作定量檢查的雜質(zhì)，方法的定量限應(yīng)滿足檢測的靈敏度和準(zhǔn)確度要求。檢查分析方法均需按要求進(jìn)行方法驗證。

特殊雜質(zhì)檢查研究時，應(yīng)采用多種不同的分離分析方法或不同測試條件，進(jìn)行研究比較，并對測定結(jié)果進(jìn)行比對分析。 以便選擇較佳的方法與條件,滿足藥品質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)中相應(yīng)檢查項目設(shè)置的要求。 

特殊雜質(zhì)檢查分析方法的建立，應(yīng)考慮普遍適用性，所用的儀器和試驗材料應(yīng)容易獲得。對于特殊試驗材料，應(yīng)在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)明確規(guī)定。在特殊雜質(zhì)分析的研究階段,應(yīng)使用可能存在的雜質(zhì)、強(qiáng)制降解的產(chǎn)物，分別或加入主成分中，配制供試溶液,進(jìn)行色譜條件探索、比較和優(yōu)化,并建立相應(yīng)的系統(tǒng)適用性要求,保證方法專屬、靈敏、準(zhǔn)確。

特殊雜質(zhì)研究中，必要時，應(yīng)進(jìn)行雜質(zhì)的分離純化制備或合成制備，以供進(jìn)行安全性和質(zhì)量研究。對確實無法獲得的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物,應(yīng)在藥物質(zhì)量研究資料和藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說明中說明理由。

在采用現(xiàn)代色譜技術(shù)對特殊雜質(zhì)進(jìn)行分離分析的情況下，對特定雜質(zhì)中的已知雜質(zhì)和毒性雜質(zhì)，應(yīng)使用雜質(zhì)對照品進(jìn)行定位;無法獲得對照品時，可用相對保留值進(jìn)行定位；特定雜質(zhì)中的未知雜質(zhì)可用相對保留值進(jìn)行定位。 特殊雜質(zhì)的含量可按照薄層色譜法(ChP2015通則0502)、高效液相色譜法(ChP2015通則0512)等方法進(jìn)行測定。

對于立體異構(gòu)體雜質(zhì)的檢測，可以采用手性的色譜或高效毛細(xì)管電泳等方法。 對于立體異構(gòu)體雜質(zhì)檢查方法的驗證，應(yīng)重點考察立體專屬性(選擇性)和潛在的手性轉(zhuǎn)化行為。 

通常，應(yīng)盡量使立體異構(gòu)體雜質(zhì)的出峰順序在主成分峰之前，以利于兩者的分離和檢測靈敏度的提高。另外，由于手性色譜法不能直接反映手性藥物的光學(xué)活性，需要與比旋度測定相互補(bǔ)充，以有效控制手性藥物的質(zhì)量。

由于色譜法進(jìn)行雜質(zhì)限度檢查時,受色譜參數(shù)設(shè)置值的影響較大，因此,有關(guān)操作注意事項,應(yīng)在起草說明中詳細(xì)闡述,必要時,可在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中予以規(guī)定。

測定法(不加校正因子的主成分自身對照法)：精密量取供試品溶液與對照溶液各20u1,分別注人液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液的色譜圖中如有左旋異構(gòu)體峰，其峰面積不得大于對照溶液主峰面積(1.0%)。 

特殊雜質(zhì)檢查限度的設(shè)置

雜質(zhì)限度的制訂應(yīng)考慮如下因素；

① 雜質(zhì)及含一定限量雜質(zhì)藥品的毒理學(xué)研究結(jié)果;

② 給藥途徑；

③ 每日劑量;

④ 給藥人群;

⑤ 雜質(zhì)藥理學(xué)可能的研究結(jié)果;

⑥ 原料藥的來源;

⑦ 治療周期;

⑧ 在保證安全有效的前提下,藥品生產(chǎn)企業(yè)對生產(chǎn)高質(zhì)量藥品所需成本和消費者對藥品價格的承受能力等。

在綜合考慮上述因素的情況下,制訂合理的限度,保障藥品質(zhì)量可靠、使用安全、療效明確。尤其對于毒性雜質(zhì)和毒性殘留有機(jī)溶劑應(yīng)嚴(yán)格規(guī)定限度。

大多數(shù)雜質(zhì)的限度,均可以參照本章“殘留溶劑的限度要求”中介紹的限度估算方法確定。

特殊雜質(zhì)研究的策略

特殊雜質(zhì)的研究涉及多方面協(xié)調(diào)配合，包括原料和(或)制劑的工藝過程研究、分析方法選擇和開發(fā)、降解過程與產(chǎn)物分析和結(jié)構(gòu)鑒定等。 而結(jié)構(gòu)鑒定或解析工作還需要分離化學(xué)和光譜測定與解析的密切配合才能有效完成。研究策略可參照工作流程圖進(jìn)行。

特殊雜質(zhì)的鑒定

藥物中的微量特殊雜質(zhì)，大都首先使用現(xiàn)代聯(lián)用技術(shù)檢測和分析解析，推測其可能的結(jié)構(gòu)；并結(jié)合藥物的合成工藝路線、化學(xué)反應(yīng)機(jī)制等，分析雜質(zhì)的引人環(huán)節(jié)，推定或確證它們的結(jié)構(gòu)。

當(dāng)然，必要時應(yīng)當(dāng)盡可能制得它們的純凈對照品，進(jìn)行全面的色譜和光譜測定，并解析確證它們結(jié)構(gòu)。 藥物特殊雜質(zhì)(有機(jī)雜質(zhì))的制備,通常有兩種方法:分離純化制備法和合成制備法。在獲得足夠量的情況下,可以對特殊雜質(zhì)進(jìn)一步進(jìn)行安全性評價和質(zhì)量控制研究,為藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)的制定提供參考依據(jù)。

分離純化雜質(zhì)對照品法；當(dāng)藥物中待鑒定雜質(zhì)的含量較大時，可以使用制備色譜法進(jìn)行分離純化，得到特定雜質(zhì),然后再通過色譜和光譜分析確證結(jié)構(gòu)。

合成雜質(zhì)對照品法；當(dāng)樣品中的雜質(zhì)量較小，且雜質(zhì)的分離純化較為困難時,可以合成雜質(zhì)對照品，通過比較雜質(zhì)與對照品的色譜和光譜特征，判斷雜質(zhì)與對照品是否完全一致，從而確證雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)。

References:

[1]《藥品質(zhì)量生產(chǎn)管理規(guī)范》2010修訂版

[2]《藥物分析》