1.如何真正有效的殺死支原體？
       當(dāng)我們在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候，有可能會(huì)出現(xiàn)如下的狀況：細(xì)胞生長緩慢、細(xì)胞變形、碎片增加、懸浮細(xì)胞容易成團(tuán)、培養(yǎng)基提前變色、鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點(diǎn)。
        如果排除了其他試劑選擇不當(dāng)、細(xì)胞株老化、細(xì)菌污染等原因，而仍有上述一種或幾種情況，則高度提示：細(xì)胞可能出現(xiàn)了支原體污染。據(jù)報(bào)道，細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)生支原體污染的機(jī)率較高，會(huì)達(dá)到70%左右，常規(guī)抗生素的使用對支原體幾乎無效。
        那么，支原體污染，對細(xì)胞培養(yǎng)有什么危害呢？
        支原體是最小的自我復(fù)制的微生物，直徑0.2~2μm ，沒有剛性細(xì)胞壁，可通過濾膜，對抗生素不敏感；細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)支原體污染沒有混濁，PH 變化及細(xì)胞病理變化不顯著，沒有明顯可見的污染跡。但是支原體污染能改變被培養(yǎng)細(xì)胞的生長特點(diǎn)、細(xì)胞膜組成以及DNA ，RNA及蛋白表達(dá)等；導(dǎo)致不準(zhǔn)確或者錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；造成珍貴培養(yǎng)細(xì)胞的損失；浪費(fèi)人力、物力及時(shí)間。
         MP公司的支原體去除試劑MRA屬于抗生素喹啉家族的衍生物，它通過抑制DNA促旋酶清除支原體污染，該酶是微生物DNA復(fù)制過程中必不可少的酶類。
該產(chǎn)品特點(diǎn)：
1，超強(qiáng)抑制支原體活性，徹底去除污染：抑制DNA促旋酶（抑制DNA復(fù)制）清除支原體污染
2，活性范圍廣：各支原體株系均可作用
3，工作濃度低，無細(xì)胞毒性：在推薦濃度下使用MRA，細(xì)胞毒性極小，因此也可以作為預(yù)防支原體污染使用的試劑。
4，消除支原體污染后永不復(fù)發(fā)：一旦使用了MRA，培養(yǎng)細(xì)胞就不會(huì)再受到同樣的支原體污染。
5，使用方便：將支原體去除試劑加入污染培養(yǎng)物（工作濃度0.5ug/ml，孵育7天）即可徹底消除支原體污染；也可用于支原體的預(yù)防，預(yù)防濃度0.1ug/ml。
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2.細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)中酚紅的作用？
         酚紅在培養(yǎng)基中用作PH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。
         研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素).為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。在固醇類激素的研究和生產(chǎn)中應(yīng)該選擇無酚紅培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。

3.谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
        L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的，如沒有谷胺酰胺細(xì)胞生長不良而發(fā)生細(xì)胞死亡。脫掉氨基后，可作為能量來源、參與蛋白質(zhì)合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺是一種并不穩(wěn)定的氨基酸，在中性水溶液中會(huì)自發(fā)降解（4℃冰箱內(nèi)放置2周,大部分谷氨酰胺被破壞)；導(dǎo)致氨的形成，而氨對于一些細(xì)胞具有毒性。
        因此，出現(xiàn)了一種谷氨酰胺的替代物，HiGlutaXL是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物，其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽，釋放L-谷氨酰胺供利用。
        HiGlutaXL?二肽非常穩(wěn)定，即使在121磅滅菌20分鐘，HiGlutaXL?二肽溶液有極少的降解，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎完全降解。由于穩(wěn)定性增加，因此無需反復(fù)添加，使用更方便； 可以防止L-谷氨酰胺降解產(chǎn)生有毒性氨的累積，因而有利于細(xì)胞生長。

4.培養(yǎng)級(jí)中丙酮酸鈉的作用？
       丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。

5.培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5 %或10% CO2？
        一般培養(yǎng)基中大都使用HCO^3-/CO₃^2-/H⁺作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO₃的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO₂濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO₃含量為3.7 g/L時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10% CO₂；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO₃為1.5g/L時(shí)，則應(yīng)使用5% CO₂培養(yǎng)細(xì)胞。