【摘要】  　　目的：研究幾種促透劑聯(lián)合使用對(duì)藥物體外經(jīng)皮滲透的影響。方法：在離體透皮吸收裝置上，采用正交試驗(yàn)的設(shè)計(jì)方法研究不同濃度的氮酮、薄荷醇、冰片聯(lián)用對(duì)雙氯芬酸鈉在離體裸小鼠背部皮膚上的透皮行為，以累積透過(guò)量、滲透速率和滯后時(shí)間為藥效指標(biāo)，運(yùn)用topsis法評(píng)價(jià)促透效果。結(jié)果：對(duì)雙氯芬鈉的促透作用，氮酮2%、薄荷醇2%、冰片1%聯(lián)用促透效果最好，其中以氮酮的促透作用最為明顯。結(jié)論：三種促透劑的聯(lián)合使用能有效促進(jìn)雙氯芬酸鈉的透皮吸收，topsis法可客觀、公正地評(píng)價(jià)促透劑的促透效果并選出最優(yōu)方案。

【關(guān)鍵詞】  氮酮　薄荷醇　冰片　雙氯芬酸鈉　透皮吸收　topsis法

　　effect of using several transdermal enhancers together on absorption of diclofenac sodium through skin on nude mice in vitro

　　shen feichen,et al

　　research division of pharmacology, guangdong medical college, zhanjiang 524023

　　abstract  objective: to study the effect of using sevearal transdermal enhancers together on absorption of drugs through skin in vitro. method:we set up an orthogonal experiment, use diclofenac sodium as drug model, detect the pemeate velocity(p), lag time(tlag), and transit dose accumulated in 24 hours(q24) as index of drug action of azone, menthol and camphol using together on skin of back of unde rat on the equipment of percutaneous absorption in vitro, evaluate the contribution of transdermal enhancers by topsis. result:together use of azone 2%,menthol 2% and camphol 1% has the best transdermal enhance effect of the absorption of diclofenac sodium, of which azone has the strongest effect on percutaneous absorption of diclofenac sodium. conclusion:using three transdermal enhancers together promotes the percutaneous absorption of diclofenac sodium in vitro effectively. topsis can evaluate the effect of transdermal enhancers and find the best match objectively.

    key words   azone; menthol; camphol;  diclofenac sodium;  percutaneous absorption;  topsis

　　氮酮是目前應(yīng)用最廣泛的透皮吸收促進(jìn)劑之一，薄荷醇和冰片是近年研究較多的萜類透皮吸收促進(jìn)劑的代表［1］，薄荷醇和氯酮對(duì)雙氯芬酸鈉的促透作用已有研究［2，3］，但三者聯(lián)用的促透效果未見(jiàn)文獻(xiàn)具體報(bào)道。本研究采用正交設(shè)計(jì)法原理探討氮酮、薄荷醇、冰片聯(lián)用作為透皮吸收促進(jìn)劑的促透效果，并采用topsis法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。

　　1  材料與試劑

　　1.1  動(dòng)物

    balb/c裸鼠，spf級(jí)，雌雄各半，體重16～18g，由本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)為2005a025。

　　1.2  藥品與試劑

    雙氯芬酸鈉粉劑由廣東省藥檢所提供；氮酮為福建壽寧美菲斯生物化學(xué)制品廠產(chǎn)品；薄荷醇系上海香料廠生產(chǎn)；合成冰片(龍腦59.9%，異龍腦37.5%)由廣州化工廠生產(chǎn)。

　　1.3  儀器

    zd85型氣浴恒溫振蕩器，深圳國(guó)華儀器廠；752型紫外分光光度計(jì)，上海分析儀器廠。

　　2  方法

　　2.1  離體皮膚的制備

    頸椎脫臼法處死裸小鼠，取背部皮膚，把皮下組織剝離干凈，用生理鹽水反復(fù)沖洗，用稍潤(rùn)有生理鹽水的紗布包裹皮膚，4℃保存，于第2天選擇無(wú)肉眼可見(jiàn)傷痕的皮膚供透皮吸收試驗(yàn)使用。

　　2.2  干擾試驗(yàn)

    按本研究“2.6”項(xiàng)下的透皮試驗(yàn)方法，取12h時(shí)間點(diǎn)的透皮接收液，在200nm～350nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，最大吸收峰出現(xiàn)在271nm處，未見(jiàn)有干擾峰出現(xiàn)。

　　2.3  標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

    精密稱取雙氯芬酸鈉50.0mg，置于100ml容量瓶中，用生理鹽水溶解定容，制成1mg·ml-1的貯備液。精密量取貯備液，用生理鹽水稀釋成系列濃度(c)：45.0、40.0、35.0、30.0、25.0、20.0、15.0、10.0、5.0μg·ml-1，分別在271nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度(a)。以吸光度(a)為縱坐標(biāo)，以濃度(c)為橫坐標(biāo)，求得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：a=0.0218c+0.0651,r=0.9921,線性范圍為5.00～45.00ug·ml-1。

　　2.4  釋放液的制備

    參照l(shuí)9(34)正交表［4］，將氮酮(a)、薄荷醇(b)、冰片(c)三個(gè)因素每個(gè)因素三個(gè)水平進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。見(jiàn)表1。表1  因素水平表（略）

    稱取適量的雙氯芬酸鈉，用70%的乙醇溶解成250mg·ml-1的溶液，每個(gè)組分別參照l(shuí)9(34)正交表的前三列(第四列用作空白列)添加適當(dāng)促透劑及適量70%乙醇配制成釋放液，其中每組均含雙氯芬酸鈉12.5mg·ml-1，各組釋放液中促透劑成分及含量見(jiàn)表2。表2  各組促透劑濃度配比（略）

　　2.5  接收液的制備

    生理鹽水作為接收液。

　　2.6  透皮實(shí)驗(yàn)

    常溫下解凍皮膚，在雙室擴(kuò)散池［5］上進(jìn)行體外透皮實(shí)驗(yàn)研究。皮膚固定于樣品池與接受池之間，角質(zhì)層面向樣品池，接受池注入5ml接收液，樣品池注入0.1ml釋放液，實(shí)驗(yàn)溫度為32℃，擴(kuò)散面積為0.502cm2。在2、4、8、12、24h分別取接收液4ml，同時(shí)補(bǔ)回4ml生理鹽水，經(jīng)生理鹽水稀釋適當(dāng)倍數(shù)后，在271nm測(cè)a值，將測(cè)得a值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求得濃度。

　　2.7  結(jié)果處理

    將測(cè)定的濃度結(jié)果代入下式，計(jì)算累計(jì)透過(guò)量q：q(μg·cm-2)=cn×5+∑n-1i=1ci×4a其中，cn為第n個(gè)取樣點(diǎn)的藥物濃度(μg/ml),ci為第i個(gè)取樣點(diǎn)的藥物濃度(μg/ml)，a為擴(kuò)散面積。以累積透過(guò)量q對(duì)時(shí)間t進(jìn)行作圖，取曲線前端的直線部分進(jìn)行線性回歸，所得方程的斜率即為透皮速率p；增滲倍數(shù)為用藥組透皮速率與對(duì)照組透皮速率之比；雙氯芬酸鈉滯后時(shí)間(tlag)的計(jì)算參照文獻(xiàn)方法進(jìn)行［6］。數(shù)據(jù)使用excel 2003 for windows軟件進(jìn)行處理，并使用sas8.0 for windows進(jìn)行方差分析［7］。

　　3  結(jié)果

　　3.1  各組促透劑對(duì)雙芬酸鈉經(jīng)皮滲透的影響

    透皮實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。表3  促透劑對(duì)雙氯芬酸鈉經(jīng)皮滲透的影響(略) ......(未完，請(qǐng)點(diǎn)擊下方“在線閱讀”)