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作者：黃賽林 單位：廣東三九腦科醫(yī)院 我們都知道變形桿菌營養(yǎng)要求不高，在普通瓊脂上就可以呈擴散生長，一個菌落在平板上培養(yǎng)24小時就可以形成以接種部位為中心的波紋狀菌落，有典型的遷徙生長現(xiàn)象。那么當我們的變形桿菌瘋狂生長的時候，同時平板上還有我們的其他細菌，我們該怎樣解救他們呢？下面我們來一起看看痰液標本里的金葡菌是怎么在波浪中解救出來的。 患者，男，58歲，因“間斷頭痛伴記憶力下降2月余，頭昏1天”于2019-01-06入院。診斷為：1、左側(cè)蝶骨嵴內(nèi)側(cè)占位性病變：腦膜瘤？2、高血壓病3級。 入院后完善術(shù)前相關(guān)檢查，于1月9日在手術(shù)室全麻下行“左側(cè)蝶骨嵴內(nèi)側(cè)占位性病變切除術(shù)”，術(shù)程順利，術(shù)后各項生命體征穩(wěn)定，進行臨床對癥及支持治療。 術(shù)后1月18日患者痰增多，發(fā)熱，臨床考慮肺部感染，進行影像學CT檢查和送檢痰液培養(yǎng)，加用頭孢噻肟鈉舒巴坦針抗炎治療，抗生素使用2天，經(jīng)驗治療效果不佳。 詢問微生物培養(yǎng)結(jié)果，因我們痰涂片可見吞噬陽性球菌，并且奇異變形菌落培養(yǎng)中可見金黃色葡萄球菌可能，我們提示考慮MRSA可能性大，建議臨床加用萬古霉素，臨床改為萬古霉素針聯(lián)合頭孢噻肟鈉舒巴坦針抗炎治療。 由于變形桿菌的干擾，無法選擇菌落鑒定和藥敏，于是我們想辦法加快菌落的分離，22號痰培養(yǎng)結(jié)果回報：MRSA及奇異變形桿菌。 患者更換抗生素后發(fā)熱癥狀有好轉(zhuǎn)趨勢，肺部CT提示肺部炎癥較前吸收，繼續(xù)抗炎治療，加強翻身拍背。 結(jié)合平板生長情況（圖1）和痰涂片鏡檢（圖2）建議臨床考慮MRSA，同時采用多種方式對奇異變形桿菌分離金黃色葡萄球，圖3為酒精法沒有分離出金葡，兩種細菌并沒有分離好，圖4-6是我們同時選用了實驗室在用的幾種KB法藥敏紙片（TE-四環(huán)素、FOX-頭孢西丁、F-呋喃妥因），四環(huán)素和頭孢西丁藥敏法分離出金葡，呋喃妥因沒有分離出金葡。圖7是我們在接種6小時后再次挑出金葡分離一次后長出了純的金葡。 圖1 平板生長情況 圖2 痰涂片鏡檢 圖3 酒精法未分離出金葡 圖4 圖5 圖6
圖7 圖8 之前在丁香園論壇和微信群上看到老師介紹過多種解決奇異變形桿菌和其他細菌混合生長時的單菌落分離方法，如用麥康凱平板分離、接種高鹽肉湯、貼藥敏紙片、時間差的方挑、配制平皿時混入少許95%的酒精等。 我個人覺得藥敏法比較靠譜，但是需要考慮金葡和奇異的耐藥性問題，多選擇幾種兩種細菌藥物敏感性不一致的可能性多貼一些藥敏，避免同時出現(xiàn)耐藥。 用時間差的方法來分純的話，這要看變形桿菌的遷徙速度了，一般4-6h可以分離到目標菌，分離過程需要多次到實驗室進行分離，操作比較麻煩，并且金葡菌落太小，可能無法挑到。 有老師介紹的酒精法：配制平皿時混入少許95%的酒精，混勻后倒平板；或者在血平板上倒入95%酒精后，把剩余酒精倒掉，平板表面干后即可，我按后者操作并沒有分離出金葡，可能跟我酒精操作的方式不對，酒精并沒有抑制變形桿菌的遷徙作用。 因此在臨床實際工作中，我們應(yīng)該加強學習一些微生物技巧，為臨床提供更快速準備的報告。  |
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