本周小編為大家挑選了6篇文獻。第一篇講述了差異miRNA支持動脈粥樣硬化形成細胞外囊泡的雙重有害和保護作用。第二篇是關(guān)于從Weibel-Palade小體內(nèi)刺激釋放管腔內(nèi)囊泡。第三篇介紹了金外泌體選擇性地靶向神經(jīng)退行性和神經(jīng)發(fā)育障礙中的腦病理學。第四篇研究了FLI1外顯子環(huán)狀RNA作為一種新的致癌驅(qū)動因子，可促進小細胞肺癌的腫瘤轉(zhuǎn)移。第五篇是體內(nèi)內(nèi)源性外泌體的器官間通訊實時跟蹤。第六篇是利用斑馬魚胚胎研究腫瘤細胞外囊泡在高時空分辨率下的命運

1、Differential miRNA Loading Underpins Dual Harmful and Protective Roles for Extracellular Vesicles in Atherogenesis

差異miRNA支持動脈粥樣硬化形成細胞外囊泡的雙重有害和保護作用

《Circulation Research》IF=15.211

摘要：本文為一篇社論，主要講述隨著冠狀動脈疾?。–AD）患者的血漿微囊泡水平增加并預測未來的心血管事件，已經(jīng)出現(xiàn)了大量證據(jù)表明他們參與了心血管疾病。循環(huán)EV相關(guān)的miR已成為生物標志物發(fā)現(xiàn)的焦點。EV脂質(zhì)雙層保護miR免受細胞外核糖核酸酶降解并顯著增加其血漿半衰期。 實際上，多個EV包裝的miR（miR-126和miR-199a）的表達水平與具有穩(wěn)定CAD的患者中較低的主要不良心血管事件風險相關(guān)，這意味著存在保護性EV表型。然而，到目前為止，尚不清楚動脈粥樣硬化是否會引起EV的改變，以及這些改變是否與疾病進展在機理上相關(guān)。

PS：Liu等人的當前研究代表了我們理解循環(huán)EV miR在調(diào)節(jié)動脈粥樣硬化條件下的內(nèi)皮和血管SMC表型中所起作用的重要且實質(zhì)性的進步，并鑒定了新的循環(huán)生物標志物。臨床實用性仍有待確定；了解miR-92a-3p具有的預后/預測/診斷能力將是有趣的。通過研究組織包埋的EV的復雜亞群的起源和功能，可以更直接地獲得病理生物學理解和治療途徑。

2、Stimulated release of intraluminal vesicles from Weibel-Palade bodies

從Weibel-Palade小體內(nèi)刺激釋放管腔內(nèi)囊泡

《Blood》IF=15.132

摘要：Weibel-Palade體（WPBs）是分泌顆粒，含有von Willebrand因子和P-選擇素，分別調(diào)節(jié)止血和炎癥。在WPB的限制性膜中存在CD63 / LAMP3導致它們被分類為溶酶體相關(guān)的細胞器。許多溶酶體相關(guān)的細胞器包含富含CD63的腔內(nèi)囊泡（ILV），其在細胞活化期間分泌到細胞外環(huán)境中以介導細胞間通訊。到目前為止，還沒有WPB包含或發(fā)布ILV的報告。通過光學顯微鏡和活細胞成像，我們顯示CD63富含WPB內(nèi)的微域。細胞外抗體再循環(huán)研究表明，WPB微區(qū)中的CD63可以源自質(zhì)膜。通過冷凍水合內(nèi)皮細胞的冷凍電子斷層掃描，我們將內(nèi)部囊泡識別為WPB腔的新結(jié)構(gòu)特征。通過活細胞熒光顯微鏡，我們直接觀察到EGFP-CD63 ILV的胞吐釋放為來自單個WPB的離散顆粒。WPB胞吐作用提供了在內(nèi)皮細胞刺激期間釋放ILV的新途徑。

PS：Weibel-Palade小體（WPB）含有CD63陽性的腔內(nèi)囊泡，這些囊泡在促分泌素誘發(fā)的胞吐作用過程中釋放。完整玻璃化內(nèi)皮細胞的冷凍電子顯微鏡顯示腔內(nèi)囊泡是WPB的新結(jié)構(gòu)特征。文章證明了從細胞中特化的亞細胞結(jié)構(gòu)中釋放CD63陽性的囊泡。

3、Golden Exosomes Selectively Target Brain Pathologies in Neurodegenerative and Neurodevelopmental Disorders

金外泌體選擇性地靶向神經(jīng)退行性和神經(jīng)發(fā)育障礙中的腦病理學

《Nano Letters》IF=12.08

摘要：外泌體，由不同細胞類型分泌的納米囊泡，使得能夠在局部或遠處位點進行細胞間通訊。盡管已經(jīng)發(fā)現(xiàn)它們穿過血腦屏障，但它們在大腦內(nèi)的遷移和歸巢能力仍未被研究。我們最近開發(fā)了一種基于經(jīng)典X射線計算機斷層掃描（CT）的優(yōu)越可視化能力，結(jié)合金納米粒子作為標記劑，用于體外縱向和定量體內(nèi)神經(jīng)成像的方法。在這里，我們使用這種技術(shù)來追蹤鼻腔管理的外泌體的遷移和歸巢模式，這些外泌體源自不同腦病理的骨髓間充質(zhì)干細胞（MSC-exo），包括中風，自閉癥，帕金森病和阿爾茨海默病。我們發(fā)現(xiàn)MSC-exo在給藥后96小時內(nèi)在病理相關(guān)的小鼠模型腦中特異性靶向和積累，而在健康對照中，它們顯示出擴散的遷移模式并且在24小時后清除。病理性腦中的神經(jīng)炎癥信號與MSC-exo積累高度相關(guān)，表明歸巢機制是炎癥驅(qū)動的。此外，在病理區(qū)域中，MSC-exo被神經(jīng)元細胞選擇性攝取，而不是神經(jīng)膠質(zhì)細胞?？傊@些發(fā)現(xiàn)可以顯著促進外泌體在各種腦病理中用于治療和靶向藥物遞送的應(yīng)用。

PS：本實驗的基于納米粒子的成像技術(shù)可實現(xiàn)無創(chuàng)，縱向神經(jīng)成像和跟蹤大腦中的外泌體分布。數(shù)據(jù)表明MSC-exo對神經(jīng)病理學的特定區(qū)域，特別是神經(jīng)元具有顯著的遷移和歸巢能力，并且炎癥在這些歸巢機制中起作用。未來的研究將檢查MSC-exo的治療效果，無論是否有額外的藥物囊泡。我們的研究結(jié)果表明，MSC-exo的體內(nèi)神經(jīng)成像可用于診斷神經(jīng)元缺陷并進一步促進靶向藥物遞送。因此，MSC-exo在各種病理學中的特定遷移和歸巢能力的揭示可以為它們作為多功能治療劑使用鋪平道路。

4、FLI1 Exonic Circular RNAs as a Novel Oncogenic Driver to Promote Tumor Metastasis in Small Cell Lung Cancer

FLI1外顯子環(huán)狀RNA作為一種新的致癌驅(qū)動因子，可促進小細胞肺癌的腫瘤轉(zhuǎn)移

《Clinical Cancer Research》IF=10.199

摘要：目的：異常上調(diào)的Friend白血病病毒整合1（FLI1）與小細胞肺癌（SCLC）的惡性表型密切相關(guān)。值得注意的是，靶向FLI1編碼區(qū)的Cas9 gRNA的CRISPR基因敲除和靶向FLI1 mRNA 的3'區(qū)域的shRNA的轉(zhuǎn)錄后敲低在SCLC細胞中產(chǎn)生了明顯的抗轉(zhuǎn)移作用。本研究試圖檢測FLI1外顯子環(huán)狀RNA（FECR）是否作為決定SCLC轉(zhuǎn)移表型的新的惡性驅(qū)動因子起作用。實驗設(shè)計：在56個原發(fā)性SCLC組織和50個非小細胞肺癌（NSCLC）組織中檢查FECR的臨床相關(guān)性。通過在SCLC患者的縱向隊列中測量血清外泌體FECR來檢查FECR的預后價值。在SCLC細胞系和動物異種移植研究中研究了FECR的致癌活性。最后，我們探索了這些非編碼RNA作為惡性驅(qū)動因子的分子機制。結(jié)果： CRISPR Cas9敲除和FLI1 shRNA敲低的治療比較確定FECR是SCLC中新的非典型惡性驅(qū)動因子。使用RNA FISH和定量PCR，我們發(fā)現(xiàn)FECR1（外顯子4-2-3）和FECR2（外顯子5-2-3-4）在SCLC組織中異常上調(diào)（P <0.0001），并且與淋巴結(jié)呈正相關(guān)。轉(zhuǎn)移（P <0.01）。值得注意的是，血清外泌體FECR1與不良生存率（P = 0.038）和臨床對化療的反應(yīng)相關(guān)。FECR的沉默顯著抑制兩種高度侵襲性SCLC細胞系中的遷移并減少體內(nèi)腫瘤轉(zhuǎn)移。在機理上，我們發(fā)現(xiàn)FECR螯合并隨后使腫瘤抑制因子miR584-3p失活，導致含有Rho相關(guān)卷曲蛋白激酶1基因（ROCK1）的活化。結(jié)論：本研究將FLI1外顯子環(huán)狀RNA 鑒定為一種新的致癌驅(qū)動因子，通過miR584-ROCK1途徑促進腫瘤轉(zhuǎn)移。重要的是，血清外泌體FECR1可作為跟蹤SCLC疾病進展的有希望的生物標志物。

PS：FLI1編碼包含ETS DNA結(jié)合域的Friend白血病整合1轉(zhuǎn)錄因子。在第22號染色體上，F(xiàn)LI1可以與Ewing肉瘤基因進行T（11；22）（q24；q12）易位，從而產(chǎn)生一個融合基因，該基因存在于大多數(shù)Ewing肉瘤病例中。一個急性淋巴母細胞白血病相關(guān)的T（4；11）（q21；q23）易位涉及這個基因也被確認。

5、Live Tracking of Inter-organ Communication by Endogenous Exosomes In Vivo

體內(nèi)內(nèi)源性外泌體的器官間通訊實時跟蹤

《Developmental Cell》IF=9.616

摘要：大多數(shù)細胞釋放細胞外囊泡（EV），但由于缺乏適當?shù)哪Ｐ蜕?，提供其生理相關(guān)性的證據(jù)仍然具有挑戰(zhàn)性。在這里，我們開發(fā)了一種體內(nèi)模型，通過在斑馬魚胚胎中表達CD63-pHluorin來研究EV功能。成像方法和蛋白質(zhì)組學分析的結(jié)合使我們能夠研究個體內(nèi)源性EV的生物發(fā)生，組成，轉(zhuǎn)移，攝取和命運。我們確定了具有外泌體特征的EV亞群，以蛋白質(zhì)依賴性方式從卵黃合胞體層釋放到血液循環(huán)中。這些外泌體通過以清道夫受體和發(fā)動蛋白依賴性方式巡回尾靜脈叢（CVP）中的巨噬細胞和內(nèi)皮細胞而被捕獲，內(nèi)吞和降解。對外泌體生物發(fā)生的干擾影響CVP生長，表明在營養(yǎng)支持中的作用?？偠灾?，我們的工作代表了一種用于研究體內(nèi)內(nèi)源性EV功能的系統(tǒng)，具有高時空準確性，展示了外泌體的功能性器官間通信。

PS：循環(huán)EV如何在遠處靶向特定細胞類型仍有待解決，主要是因為此步驟之前無法可視化，但此處呈現(xiàn)的體內(nèi)模型為在生理和病理條件下揭示此類機制鋪平了新的途徑。斑馬魚與人類之間的遺傳和結(jié)構(gòu)同源性開辟了新的視角，以驗證生物體復雜結(jié)構(gòu)中外泌體介導的細胞間通訊，特別是器官間通訊及其跨越生物屏障的能力。與外泌體相關(guān)的表達斑馬魚胚胎的熒光蛋白（例如，CD63-pHluorin）是研究體內(nèi)內(nèi)源性EV以揭示EV生理學中的基本方面并評估其臨床應(yīng)用的相關(guān)模型?？傊?，本實驗展示了可能在模型生物中研究的各種問題，以驗證迄今為止對EV的生物學和功能的大量體外研究。

6、Studying the Fate of Tumor Extracellular Vesicles at High Spatiotemporal Resolution Using the Zebrafish Embryo

利用斑馬魚胚胎研究腫瘤細胞外囊泡在高時空分辨率下的命運

《Developmental Cell》IF=9.616

摘要：腫瘤細胞外囊泡(EVs)介導腫瘤與基質(zhì)細胞之間的通訊，主要是為了促進腫瘤的進展。值得注意的是，腫瘤EVs在血液中傳播，到達遙遠的器官，并在局部改變微環(huán)境。然而，在活體中可視化這些事件仍然面臨重大障礙。在此，我們描述一種在活體中追蹤循環(huán)腫瘤EVs的方法:我們將化學和基因編碼的探針與斑馬魚胚胎結(jié)合作為動物模型。我們首先描述腫瘤EVs的血流動力學行為并記錄其血管內(nèi)阻滯。我們發(fā)現(xiàn)循環(huán)腫瘤EVs被內(nèi)皮細胞和巡邏的巨噬細胞迅速吸收，然后儲存在降解室中。最后，我們證明腫瘤EVs激活巨噬細胞并促進轉(zhuǎn)移生長。綜上所述，我們的研究證明了斑馬魚胚胎追蹤腫瘤EVs并解剖其在體內(nèi)轉(zhuǎn)移龕形成中的作用的有效性和前景。

PS：目前大量的研究集中于體外培養(yǎng)的細胞產(chǎn)生外泌體再回輸進入實驗動物體內(nèi)并觀察其作用。Thery在兩年前就提出應(yīng)該開展一定的實驗來驗證內(nèi)源性外泌體的行為和作用。腫瘤來源的外泌體對腫瘤促進作用相關(guān)報道十分常見，但是目前并沒有實時追蹤這一促進過程發(fā)生機制的相關(guān)報道，這主要限制在于研究技術(shù)手段的缺乏。這篇文章是基于斑馬魚開發(fā)了相關(guān)實時在體研究技術(shù)。