???一、前言

2002年，研究人員鑒定出一種名為塞內(nèi)卡病毒的新病毒，并被列為塞內(nèi)卡病毒屬中唯一的代表性病毒。此后至2014年底，關(guān)于該病毒的流行病學(xué)、發(fā)病機制、病理、臨床體征和診斷仍未取得任何進(jìn)展。塞內(nèi)卡病毒病是由A型塞內(nèi)卡病毒引起的動物傳染病，主要感染豬，對不同年齡階段的豬都易感。這種疾病起初被認(rèn)為具有地域性，地域分布有限。北美研究人員或世界范圍的研究團(tuán)隊并未廣泛的研究該病，盡管這是一種水皰性疾病，可能是由于感染頻率低，僅有北美國家報道病例。

在2015年初，巴西、泰國和中國首次暴發(fā)了由塞內(nèi)卡病毒引起的水皰性疾病。同年，研究發(fā)現(xiàn)病毒感染與新生仔豬死亡率相關(guān)。與此同時，美國也出現(xiàn)了同樣的病例。這一系列病例的報道引起了學(xué)者的關(guān)注，因此，近期關(guān)于塞內(nèi)卡病毒的研究越來越多。

二、歷史分類和分子特征

2002年，在美國馬里蘭州學(xué)者從PER.C6（人胚胎視網(wǎng)膜細(xì)胞）細(xì)胞系中偶然分離出塞內(nèi)卡谷病毒。研究人員推測該病毒可能是通過使用受污染的胎牛血清或豬胰蛋白酶引入細(xì)胞培養(yǎng)物中。由于該病毒是在位于蓋瑟斯堡（Seneca Creek State Park）附近的Neotropix公司的實驗室中分離的，因此，被命名為Seneca Valley virus（SVV）。

直到2014年，在NCBI數(shù)據(jù)庫中僅有三個完整的塞內(nèi)卡病毒病毒全基因組序列（GenBank登錄號NC_011349，DQ641257，KC667560）。因此，很少有基于病毒基因組的研究，其原型毒株為SVV-001（GenBank登錄號DQ641257）。通過構(gòu)建種系發(fā)育樹，明確了該病毒的分類學(xué)地位——屬于小核糖核酸病毒科（Picornaviridae），與心病毒屬（Cardiovirus）的親緣關(guān)系較近。2015年，國際病毒分類委員會（ICTV）將SVV更名為“A型塞內(nèi)卡病毒（Senecavirus A，SVA）”，其所在的屬命名為“塞內(nèi)卡病毒屬（Senecavirus）”。

SVV-001具有微小RNA病毒基因組的典型特征，具有標(biāo)準(zhǔn)的L-4-3-4布局，即先導(dǎo)蛋白（L）、P1（裂解VP1、VP2、VP3和VP4四種結(jié)構(gòu)蛋白）、P2（裂解成2A、2B和2C三種非結(jié)構(gòu)蛋白）、P3（裂解成3A、3B、3C和3D四種非結(jié)構(gòu)蛋白）。SVV基因組RNA由大約7200個核苷酸（nt）組成，其中在5’UTR部分中有666 nt，在3’UTR部分中有71nt和poly（A）尾部。該病毒基因組僅有一個開放閱讀框（open reading frames，ORF），編碼約2180個氨基酸的多聚蛋白。

圖1 A型塞內(nèi)卡病毒基因組結(jié)構(gòu)

對SVV-001的5’UTR序列分析，揭示其有高水平的二級結(jié)構(gòu)。在5’UTR區(qū)域具有內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點（Internal ribosome entry site，IRES），其功能是通過抑制細(xì)胞RNA的翻譯來獨立翻譯病毒RNA。406～625 nt序列與丙型肝炎病毒（黃病毒科）的相似性為57.3%，提示該病毒的IRES是IV型。SVA的基因組特征與心病毒屬的成員非常相似，特別是與多肽P1，2C，3C和3D相關(guān)。其中，2A蛋白的C端存在小RNA病毒科病毒的核糖體跳躍基序NPG↓P，3B蛋白（即VPg蛋白）作為病毒RNA合成的引物，3D蛋白構(gòu)成RNA依賴性RNA聚合酶（RdRp），參與病毒復(fù)制。然而，SVV-001與心病毒屬的2B、3A和IRES類型不同。SVV-001的基因組區(qū)2A，2B，3A和3B與所有其它小微RNA病毒科的差異很大。

隨著中國，美國，加拿大和泰國不斷爆發(fā)由SVA引起的水皰性疾病，目前已測定出42株病毒的全基因組序列和15株病毒的部分基因組序列（截至到2017年6月8日）。因此，目前在病毒分子流行病學(xué)方面可取得一些進(jìn)展。結(jié)果顯示，2015～2016年間，共檢測到42個完整的病毒基因組序列，與參考毒株SVV-001具有較高的同源性（93.8%～99.9%）?；赩P1基因，我們可將SVA分為三個拓?fù)湫停ㄒ妶D2）：進(jìn)化枝I包括最初確定的病毒株，包括SVV-001；進(jìn)化枝II包括1988年至1997年間鑒定的美國病毒株；進(jìn)化枝III包含2001年至2016年在巴西、加拿大、中國、泰國和美國鑒定的毒株。值得注意的是，在進(jìn)化枝III內(nèi)SVA毒株具有明顯的地理隔離（來自同一個國家的毒株聚在同一個大進(jìn)化枝）。盡管原型毒株和目前的SVA毒株之間存在差異，但是在病毒基因組中的遺傳變化是否改變了病毒的不同生物學(xué)特性，和是否導(dǎo)致了塞內(nèi)卡病毒感染的出現(xiàn)仍然是未知的。

圖2 基于VP1基因構(gòu)建SVA種系發(fā)育樹

三、致病性

最初，研究人員認(rèn)為塞內(nèi)卡病毒與任何特定的病理學(xué)沒有關(guān)聯(lián)，對其的研究主要集中在人類癌癥治療中潛在的溶瘤特性。但是，加拿大（2008）和美國（2012）通過RT-PCR在水皰癥狀的豬僅檢測到SVA，提示SVA可能是引起豬水皰病的病原。

2015年之前，研究人員將SVA感染實驗豬，但觀察不到任何水皰性疾病的臨床癥狀，未能滿足科赫法則，因此，研究人員認(rèn)為SVA不是引起豬水皰病的病原。然而，2015年，學(xué)者對9周齡豬感染SVA試驗中并觀察到水皰病變。之后越來越多的研究證明SVA與豬原發(fā)性水皰?。╥diopathic vesicular disease，IVD）有關(guān)。SVA感染引發(fā)的水皰病與口蹄疫（foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD）、豬水皰?。╯wine vesicular disease，SVD）、豬水皰疹（vesicular exanthema of swine，VES）和水皰性口炎（vesicular stomatitis，VS）引起的病變極為類似，根據(jù)臨床癥狀，無法對豬的五種水皰性疾病進(jìn)行鑒別診斷。

早期的SVA分離株對豬無明顯的致病性，感染豬不出現(xiàn)臨床癥狀。近年來，越來越多的SVA分離株可以導(dǎo)致豬發(fā)病，成年豬感染初期出現(xiàn)厭食、嗜睡和發(fā)熱等癥狀，隨后鼻鏡部、口腔上皮、舌和蹄冠等部位的皮膚、黏膜產(chǎn)生水皰，繼而發(fā)生繼發(fā)性潰瘍和破潰現(xiàn)象，嚴(yán)重時蹄冠部的潰瘍可以蔓延至蹄底部，造成蹄殼松動甚至脫落，病豬出現(xiàn)跛行現(xiàn)象。新生仔豬（7日齡以內(nèi)）死亡率顯著增加（高達(dá)30％～70％），偶爾伴有腹瀉癥狀。

四、溶瘤特性研究

SVA不感染人類，但能在具有神經(jīng)內(nèi)分泌功能的腫瘤細(xì)胞中增殖，且其通過RNA中間體復(fù)制，繞過DNA階段，因此不能整合到宿主細(xì)胞基因組中，使得該病毒在腫瘤治療中使用是安全的。SVA是一種天然的溶瘤病毒，對腫瘤的專嗜性高，可以選擇性地感染包括小細(xì)胞肺癌細(xì)胞（Small Cell Lung Cancer，SCLC）在內(nèi)的神經(jīng)內(nèi)分泌特征的腫瘤細(xì)胞以及包括視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤和髓母細(xì)胞瘤在內(nèi)的小兒實體腫瘤細(xì)胞。在I期臨床試驗采用靜脈注射劑量遞增的患者有神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，SVA即使在高劑量（1011病毒顆粒／kg）的給藥時，也不會引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)。目前，Neotropix公司將分離到的SVA開發(fā)成抗癌治療藥物，NTX-010。

五、展望

SVA在巴西、美國和我國幾乎同時發(fā)生，說明其從被發(fā)現(xiàn)至今，或有進(jìn)一步擴大和爆發(fā)的可能，而作為新發(fā)傳染病，其潛在影響是不可估量的，不得不引起足夠的重視。雖然，目前已經(jīng)取得SVA的部分進(jìn)展，但仍有許多問題亟待更多的科學(xué)家去解決：

（1）病毒的具體特征，包括其生物學(xué)和分子進(jìn)化，pH穩(wěn)定性，受體和共受體，細(xì)胞大分子，復(fù)制周期，環(huán)境生存等；

（2）塞內(nèi)卡病毒流行病學(xué)，如病毒如何通過其它非豬儲存宿主或媒介傳播到其他國家；

（3）仔豬的致病性；

（4）宿主免疫應(yīng)答，包括初乳中的保護(hù)性抗體滴度。

研發(fā)部王會寶 編審 祁光宇