先天性黑蒙癥，是發(fā)生最早、最嚴(yán)重的遺傳性視網(wǎng)膜病變, 出生時(shí)或出生后一年內(nèi)雙眼錐桿細(xì)胞功能完全喪失，導(dǎo)致嬰幼兒先天性盲。是導(dǎo)致兒童先天性盲的主要疾病（占10%-20%）。多呈常染色體隱性遺傳，目前已發(fā)現(xiàn)有多個(gè)基因突變導(dǎo)致的不同類型先天性黑蒙癥。

2019年1月23日，Editas Medicine公司（創(chuàng)始人為張鋒）的Morgan L. Maeder等人在頂級(jí)醫(yī)學(xué)期刊 Nature Medicine 雜志發(fā)表題為：Development of a gene-editing approach to restore vision loss in Leber congenital amaurosis type 10 的研究論文。

該研究使用Editas Medicine公司開發(fā)的編號(hào)為EDIT-101的CRISPR/Cas9基因療法，該療法巧妙地去除由CEP290基因中的IVS26突變產(chǎn)生的異常剪接供體，從而恢復(fù)正常的CEP290基因表達(dá)，成功恢復(fù)了Leber先天性黑蒙癥10型的視力。這一成果也表明基于CRISPR的基因編輯療法在治療遺傳疾病方面的可行性。

Leber先天性黑蒙10型（LCA10）是一種常染色體隱性遺傳病，由CEP290基因中的雙等位基因功能喪失突變引起。通常出現(xiàn)在嬰兒早期，患者表現(xiàn)出嚴(yán)重的錐棒營養(yǎng)不良，而且視力低下，甚至完全喪失。由CEP290基因編碼的蛋白質(zhì)定位于連接纖毛的光感受器，并且是外部區(qū)段再生和光轉(zhuǎn)導(dǎo)所必需的。

最常見的LCA10突變位點(diǎn)是IVS26，位于內(nèi)含子26內(nèi)的腺嘌呤至鳥嘌呤點(diǎn)突變，其突變產(chǎn)生新的剪接供體位點(diǎn)，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄提前終止。

2017年12月10日，F(xiàn)DA批準(zhǔn)了Spark公司AAV基因療法，通過AAV病毒載體，將正確的RPE65基因遞送到視網(wǎng)膜細(xì)胞，從而治療Leber先天性黑蒙2型，該療法售價(jià)高達(dá)85萬美元/年。

但目前還沒有針對(duì)Leber先天性黑蒙10型的治療方法被批準(zhǔn)，因?yàn)镃EP290基因的編碼序列長達(dá)7.5kb，遠(yuǎn)超AAV病毒的包裝能力（4.7kb），無法通過AAV遞送正確編碼的CEP290基因的方式來治療。

為克服這一局限，Editas Medicine開發(fā)了一種特異于CEP290 IVS26突變的基因編輯策略，使用AAV5載體通過視網(wǎng)膜下注射將spCas9和CEP290特異性gRNA遞送至感光細(xì)胞，通過雙gRNA分別靶向突變內(nèi)含子區(qū)域的上下游，直接將突變內(nèi)含子區(qū)域整體刪除或倒位，從而恢復(fù)CEP290基因的正常表達(dá)。

Editas Medicine開發(fā)的這一方法，巧妙的避免了AAV病毒包裝能力有限的局限，也為這一類遺傳病的治療帶來了新的思路。

這也是Editas Medicine公司繼Daviad Liu使用CRISPR基因編輯技術(shù)恢復(fù)人類遺傳性耳聾小鼠模型聽力后，在CRISPR基因治療遺傳病領(lǐng)域的有意重磅突破。

據(jù)了解，2018年12月1日，美國FDA已經(jīng)接受Editas Medicine公司為EDIT-101遞交的IND申請(qǐng)，允許該公司開展使用CRISPR基因編輯手段治療Leber先天性黑朦10型患者（LCA10）的臨床試驗(yàn)。EDIT-101有望成為世界上第一款在人體內(nèi)使用的CRISPR療法。

論文鏈接：https://www./articles/s41591-018-0327-9