?丹參酮類化合物及總丹參酮提取物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用的制作方法

專利名稱：：丹參酮類化合物及總丹參酮提取物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用的制作方法

技術領域：

：本發(fā)明為醫(yī)藥領域，尤其是天然藥物領域，具體涉及丹參酮類化合物及總丹參酮提取物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用。

背景技術：

：疼痛已成為影響人們生活和工作的重要疾病之一。調(diào)查顯示，頭痛、牙痛、肌肉和關節(jié)痛是我國居民最常經(jīng)歷的疼痛，其次為受運動損傷導致的疼痛和經(jīng)痛。其中，不同年齡段頭痛的發(fā)生比例都超過了半數(shù)；30歲以下以及30-45歲人群頭痛發(fā)生率均超過70°/。；肌肉關節(jié)痛和牙痛的發(fā)生比例也在提高?，F(xiàn)階段常用的鎮(zhèn)痛藥主要有兩大類阿片類麻醉性鎮(zhèn)痛藥，以嗎啡為代表；非甾體類抗炎藥，以阿斯匹林為代表。阿片類鎮(zhèn)痛藥是中樞神經(jīng)抑制劑，雖效果明顯但易成癮并產(chǎn)生耐受性。非甾體類抗炎藥作用于外周神經(jīng)系統(tǒng)，是以阻斷前列腺素的合成為目的，該類藥物副作用較大，長期服用會引起變態(tài)反應、胃出血和潰瘍。因此，迫切需要尋找有效、安全可靠的鎮(zhèn)痛藥物。隨著人們對中醫(yī)藥獨特優(yōu)勢的日益理解及化學鎮(zhèn)痛藥毒副作用與藥害問題日益突出，中藥鎮(zhèn)痛藥得到了更廣泛的重視和應用。從中草藥中尋找和研制具有良好鎮(zhèn)痛作用的藥物，具有療效好、副作用小、及安全可靠等許多優(yōu)點，而愈來愈引起人們的重視。丹參為唇形科植物丹參(SalviamiltiorrhizaBunge)的干燥根及根莖，己被多版《中華人民共和國藥典》收載。丹參性微寒、味苦。歸心、肝經(jīng)。具有止痛，養(yǎng)心安神，活血祛瘀，涼血，消腫，調(diào)經(jīng)等功能。用于治療失眠，心痛，閉經(jīng)，冠心病，痛經(jīng)，月經(jīng)失調(diào)，心肌梗死，缺血性中風，腦梗死，高血壓，腦缺血等疾病。主要化學成分為兩大類，即水溶性丹參酚酸類和脂溶性丹參酮類。后者主要是以丹參酮IIA為代表的鄰醌結構丹參酮類化合物。丹參酮IIA和其磺化后得到的磺酸鈉臨床上用于心腦血管疾病如缺血性中風，腦梗死，冠心病，高血壓，腦缺血等的治療。但丹參酮類化合物和丹參酮提取物并未有鎮(zhèn)痛作用的報道。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明旨在提供丹參酮類化合物及總丹參酮提取物的新醫(yī)藥用途，即在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用，以獲得療效好、副作用小、安全可靠、能長期服用的鎮(zhèn)痛藥物。利用小鼠醋酸扭體等試驗，對大量天然藥用植物的提取物進行鎮(zhèn)痛活性篩選，并通過活性追蹤的方法發(fā)現(xiàn)了丹參酮類化合物以及總丹參酮提取物具有鎮(zhèn)痛活性，且未顯示出毒副作用。以天然植物或中藥材，如丹參為原料，采用溶劑提取法、溶劑萃取法、樹脂吸附法、二氧化碳超臨界萃取等工藝中的一種或多種工藝，并結合濃縮干燥、減壓干燥或冷凍干燥等常用干燥方法，再利用包括吸附樹脂柱層析、真空液相柱層析、硅膠柱層析、S印hadex凝膠柱層析、中低壓柱層析以及制備型高壓液相(HPLC)柱層析，以及沉淀、結晶等方法獲得丹參酮類化合物或總丹參酮提取物。所采用的溶劑提取法中，可選用水或甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、丙酮、乙酸乙酯、甲酸乙酯、氯仿、二氯甲垸、乙醚、石油醚等有機溶劑或兩種或多種互溶的混合溶劑，在室溫下浸漬提取或用超聲提取或加熱狀態(tài)下的回流提取，提取次數(shù)可為一次，也可為多次。所采用的溶劑萃取法中，可將上述得到的提取物懸浮于水中用適宜溶劑(丁醇、戊醇、乙酸乙酯、甲酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、乙醚、石油醚等)直接進行萃取，萃取次數(shù)可為一次，也可為多次。所采用的樹脂法為大孔吸附樹脂法，水、醇或含水醇提取物可用大孔吸附樹脂進行處理，棄去水洗脫部分，全部或部分收集醇洗脫部分即得。所采用的二氧化碳超臨界萃取法可根據(jù)情況加入適當?shù)膴A帶劑，如環(huán)己垸、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙醇等。本發(fā)明所述丹參酮類化合物包括丹參酮I(tanshinoneI)、丹參酮IIa(tanshinoneIIa)、隱丹參酮(cryptotanshinone)、二氫丹參酮(dihydrotanshinone)和新丹參酮(miltiron)。這些丹參酮類化合物可以是從植物或中草藥中提取的，也可以是化學合成的。所述總丹參酮提取物是指以天然植物或中草藥，如丹參為原料，通過上述提取分離方法得到的含有上述一種或多種丹參酮類化合物的提取物，其中總丹參酮的含量為5090%。本發(fā)明中所述丹參酮類化合物或總丹參酮提取物作為制備鎮(zhèn)痛藥物的有效成份，可單獨應用或者合用或與可接受的賦形劑等結合，按照常規(guī)方法制成口服劑型或非口服劑型的治療疼痛的藥物。試驗結果表明，丹參酮類化合物或總丹參酮提取物具有明顯的鎮(zhèn)痛效果，可用于制備鎮(zhèn)痛藥物；且具有明顯療效，副作用小，安全可靠，適合中輕度疼痛，能夠長期服用。具體實施例方式實施例l:總丹參酮提取物的制備取唇形科鼠尾草屬植物丹參的飲片300g，用90%乙醇提取，濃縮浸提液得乙醇提取物，提取物分散于水中，低溫放置后，過濾，干燥，即得到總丹參酮提取物。其中總丹參酮含量為80%。實施例2:丹參中丹參酮類化合物的提取分離取實施例1中所述總丹參酮提取物，上硅膠柱，石油醚氯仿梯度洗脫，獲得丹參酮I、丹參酮IIa、隱丹參酮和新丹參酮等丹參酮類化合物。實施例3:丹參酮類化合物對小鼠的鎮(zhèn)痛作用試驗取實施例2中得到的丹參酮I、丹參酮IIa、隱丹參酮和二氫丹參酮，口服給藥，應用于小鼠醋酸扭體實驗。操作方法為取1822g小鼠30只，隨機分為三組，分別按體重100mg/kg、30mg/kg和10mg/kg口服給藥，給藥組樣品液0.6ml/只；另設對照組給等體積生理鹽水。60分鐘后，各鼠腹腔注射0.7%醋酸0.1ml/10g，觀察并記錄10分鐘內(nèi)產(chǎn)生扭體反應的動物數(shù)或每組扭體反應的次數(shù)，與對照組比較其鎮(zhèn)痛效果。結果如表l。取丹參酮IIa，口服給藥，應用于小鼠福爾馬林實驗和熱板實驗，結果如表2。小鼠福爾馬林實驗取25g30gICR小鼠30只，分別按體重100mg/kg、30mg/kg和10mg/kg口服給藥，給藥組樣品液0.6ml/只；另設對照組給等體積生理鹽水。60分鐘后注射福爾馬林(2.5%，0.9%生理鹽水)20^1于后足跖部。記錄給福爾馬林后，05分鐘(1相，用PI表示)，20~35分鐘(2相，用PII表示)內(nèi)小鼠舔足的時間。1相(PI)的反應與急性痛有關，2相(PII)的反應與慢性痛有關。熱板實驗取25g30glCR小鼠30只，分別按體重100mg/kg、630mg/kg和10mg/kg口服給藥，給藥組樣品液0.6ml/只；另設對照組給等體積生理鹽水。60分鐘后，將小鼠置于55。C的熱板上，記錄其足底接觸熱板到出現(xiàn)舔足、踢后腿或跳躍的時間，作為痛閾指標。表1.小鼠醋酸扭體實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表2.丹參酮IIa的鎮(zhèn)痛試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實施例4:總丹參酮提取物對小鼠的鎮(zhèn)痛作用試驗取實施例1中得到的總丹參酮提取物，口服給藥，應用于小鼠醋酸扭體實驗、福爾馬林實驗和熱板實驗，結果如表3所示。表3.總參酮提取物鎮(zhèn)痛試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>權利要求1、丹參酮類化合物及總丹參酮提取物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用。2、權利要求1所述丹參酮類化合物及總丹參酮提取物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用，其特征在于，所述丹參酮類化合物為丹參酮I、丹參酮IIa、隱丹參酮、二氫丹參酮或新丹參酮。3、權利要求1所述丹參酮類化合物及總丹參酮提取物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用，其特征在于，所述總丹參酮提取物為從植物或中草藥中提取得到的含有一種或多種丹參酮類化合物的提取物，其中總丹參酮的含量為5090%。4、權利要求1所述丹參酮類化合物及總丹參酮提取物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用，其特征在于，所述總丹參酮提取物為從丹參中提取得到的含有一種或多種丹參酮類化合物的提取物，其中總丹參酮的含量為5090%。5、權利要求1至4任一項所述丹參酮類化合物及總丹參酮提取物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用，其特征在于，所述藥物以一種或多種丹參酮類化合物、或總丹參酮提取物作為活性成分，單獨應用，或者加上藥學上可接受的賦形劑制成的口服或非口服制劑。全文摘要本發(fā)明公開了丹參酮類化合物及總丹參酮提取物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應用。參酮類化合物選自丹參酮類化合物為丹參酮I、丹參酮IIa、隱丹參酮、二氫丹參酮或新丹參酮；總丹參酮提取物是以植物或中草藥，如丹參中提取的含有一種或多種丹參酮類化合物的提取物，其中總丹參酮的含量為50～90％。經(jīng)動物試驗表明，這些物質(zhì)具有鎮(zhèn)痛作用，可以用于制備鎮(zhèn)痛藥物。