2018年7月17日/醫(yī)麥客 eMedClub/--全球首例宮頸癌患者接受TIL細(xì)胞治療后生存超五年，一名晚期乳腺癌患者兩年半無癌生存，一名致命肝癌和另一名晚期結(jié)腸癌患者獲得了驚人的恢復(fù)。而在接受治療之前，用通俗的話說，以上的患者已經(jīng)“無藥可治”。

為何TIL細(xì)胞療法能夠

挽救晚期癌癥患者

TIL是腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞，包含了手術(shù)切除的腫瘤組織，大部分是腫瘤細(xì)胞，也有少部分淋巴細(xì)胞。

科學(xué)家可以通過一些培養(yǎng)方法把這些腫瘤組織中的淋巴細(xì)胞擴(kuò)增起來。簡單說就是從手術(shù)切除的腫瘤組織中分離擴(kuò)增TIL細(xì)胞，擴(kuò)增出來的細(xì)胞主要是CD4和CD8 T細(xì)胞，然后體外培養(yǎng)一段時(shí)間得到足夠多的TIL細(xì)胞，回輸?shù)交颊唧w內(nèi)發(fā)揮抗癌作用?；谶@些想法，TIL細(xì)胞療法正在迅速發(fā)展，而NCI的大牛羅森伯格正是這項(xiàng)技術(shù)的推動(dòng)者。

Steven Rosenberg博士(圖片來源 en.wikipedia.org)

但不可否認(rèn)的是，能夠獲益于這種細(xì)胞療法的癌癥患者并不多。那么為什么同一癌癥類型的患者不能獲得類似的治療效果呢？

其中一個(gè)重要的原因就是：

體內(nèi)數(shù)百種類型的T細(xì)胞，并不是每個(gè)都能成為好的癌癥戰(zhàn)士。回輸?shù)腡IL細(xì)胞是很多細(xì)胞的混合體，并沒有經(jīng)過很特異的篩選。有些TIL細(xì)胞是對(duì)腫瘤特異的，有些并不是特異的。而科學(xué)家們總是喜歡刨根問底，當(dāng)然也是為了提高有效率。

為了探究這些混合的細(xì)胞里到底哪種特定類型的細(xì)胞才是腫瘤特異的，羅森伯格做了很多臨床探索：

1. 通過基因測(cè)序?qū)ふ夷[瘤細(xì)胞特異的突變蛋白，然后篩選針對(duì)這個(gè)突變的特異性TIL細(xì)胞回輸給患者，雖然臨床上顯示出的治療效果很好，但這種方案過于個(gè)性化和繁瑣。

2. 通過篩選，尋找腫瘤特異性TIL細(xì)胞表面特殊的生物標(biāo)志物，但目前相關(guān)的研究進(jìn)展并不多。

最新研究發(fā)現(xiàn)TIL細(xì)胞中出現(xiàn)“旁觀者”

現(xiàn)如今，隨著腫瘤免疫治療領(lǐng)域TIL、CAR-T以及PD-1/PD-L1以及研究的進(jìn)展，科學(xué)家們斷定：免疫治療將會(huì)是未來攻克癌癥的主要方向。但有效率低仍然是免疫療法的痛點(diǎn)，為了獲得更廣泛的成功，近年來，科學(xué)家們一直在深挖其背后的抵抗機(jī)制。作為該領(lǐng)域里的一個(gè)老生常談的話題，醫(yī)麥客也多次報(bào)道過相關(guān)研究進(jìn)展。

大多數(shù)研究主要集中在聯(lián)合治療方案(TIL聯(lián)合PD-1)以及響應(yīng)和抵抗免疫療法的預(yù)測(cè)生物標(biāo)志物的探索，進(jìn)一步了解腫瘤浸潤性免疫細(xì)胞的抗原特異性以提高免疫治療的有效性。

其中腫瘤中存在一類稱為腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)的白細(xì)胞，與大多數(shù)癌癥類型的治療結(jié)果相關(guān)。表達(dá)細(xì)胞表面糖蛋白CD8的TIL(稱為CD8+ TIL)可以在癌細(xì)胞表面發(fā)現(xiàn)腫瘤抗原并將其破壞。

因此，許多免疫治療策略旨在刺激，增強(qiáng)和維持CD8 + TIL細(xì)胞的癌癥殺傷能力。然而，CD8+ TILs是高度異質(zhì)性的細(xì)胞群，不僅僅是在不同患者之間而且還與腫瘤類型相關(guān)，此外，研究人員對(duì)激活它們的抗原知之甚少。

近日，由A * STAR(新加坡科技研究局)領(lǐng)導(dǎo)的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，存在于人肺部和結(jié)腸直腸腫瘤中的一類“旁觀者”T細(xì)胞，跟患者對(duì)免疫療法的應(yīng)答情況緊密相關(guān)，對(duì)包括TIL、CAR-T以及PD-1/L1等在內(nèi)的免疫療法都具有重大影響，相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在了國際著名期刊《Nature》上。

在人肺癌中表達(dá)CD39的綠色和紅色TIL腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(圖片來源 A*STAR)

(肺癌、結(jié)直腸癌)腫瘤特異性和腫瘤不相關(guān)的CD8+ T細(xì)胞浸潤腫瘤組織(圖片來源 nature)

來自新加坡科技研究局(A * STAR)屬下的研究機(jī)構(gòu)——“新加坡免疫學(xué)信息網(wǎng)”(Singapore Immunology Network)的Evan Newell博士及其同事使用大規(guī)模細(xì)胞計(jì)數(shù)法研究了肺癌或結(jié)直腸癌患者腫瘤中CD8 + TIL的抗原特異性。

與之前的報(bào)告一致，他們發(fā)現(xiàn)只有一小部分CD8+ TIL群體能夠識(shí)別腫瘤突變相關(guān)抗原。但與此同時(shí)，該團(tuán)隊(duì)還發(fā)現(xiàn)了大量的CD8 + TIL（旁觀者細(xì)胞)對(duì)腫瘤不敏。

Evan Newell博士(圖片來源 A*STAR)

Newell說：“能夠在人腫瘤中檢測(cè)到腫瘤不相關(guān)的CD8+TILs是非常令人驚訝的，畢竟這類細(xì)胞是針對(duì)其他常見的病毒感染的，所以不應(yīng)該在腫瘤中出現(xiàn)?！?/span>

CD39成為區(qū)分腫瘤相關(guān)性TIL關(guān)鍵分子

患者高表達(dá)對(duì)PD-1治療獲益

研究者發(fā)現(xiàn)了CD39表達(dá)差異是區(qū)分腫瘤相關(guān)性或不相關(guān)CD8 + TIL細(xì)胞的關(guān)鍵分子。

CD39是一種與慢性免疫細(xì)胞刺激有關(guān)的分子，通常在多種惡性實(shí)體瘤中明顯上調(diào)，其表達(dá)水平與疾病的分期和嚴(yán)重程度相關(guān)。

本文中在24名肺癌患者中的9名和42名結(jié)直腸癌患者中的21名中，發(fā)現(xiàn)了兩類對(duì)癌癥不同敏感程度的TIL細(xì)胞，其中一類CD8+ TIL與腫瘤特異性的CD8 + TIL不同，它們不表達(dá)CD39分子。

腫瘤不相關(guān)的CD8+ TIL細(xì)胞表面不表達(dá)CD39(圖片來源 nature)

通過轉(zhuǎn)錄組分析之后，研究人員發(fā)現(xiàn)，CD39+CD8+ TIL表達(dá)相關(guān)基因的水平與細(xì)胞的增殖和耗竭相關(guān)，而這也正是慢性抗原持續(xù)刺激的T細(xì)胞特征。另外，從肺癌和結(jié)直腸癌腫瘤組織中分離出的CD39+ CD8+ TIL，表型和功能上都表現(xiàn)出了耗竭的特點(diǎn)。

這表明這類腫瘤浸潤性T細(xì)胞的活性被抑制了，但抗癌能力依然存在，因此，免疫細(xì)胞和抗癌之間只差一個(gè)解救腫瘤抑制的角色，而免疫檢查點(diǎn)抑制劑(PD-1/L1)當(dāng)仁不讓。

患者在接受PD-1抗體治療后，外周血中CD39+ CD8+ TIL細(xì)胞含量的變化(圖片來源 nature)

一名結(jié)直腸癌患者在接受PD-1抗體Keytruda (pembrolizumab)治療之后，經(jīng)歷了快速的免疫響應(yīng)。

在對(duì)其外周血進(jìn)行分析之后，研究人員發(fā)現(xiàn)，患者外周血的CD8+ TIL高表達(dá)CD39。也就是說，外周血中CD39+ CD8+ TIL細(xì)胞的變化，或能夠預(yù)測(cè)患者是否能夠獲益于PD-1抗體免疫療法。

與EGFR突變型的肺癌患者相比，EGFR野生型患者的CD39+ CD8+ TIL的比例要高出很多(圖片來源 nature)

此外，正如Newell所解釋的那樣，50%的EGFR突變型的肺癌患者體內(nèi)CD8 + TIL的CD39表達(dá)水平非常低，幾乎找不到，這與患者對(duì)PD-1抗體免疫治療的低應(yīng)答率同樣是緊密相關(guān)的。

因此，這項(xiàng)新發(fā)現(xiàn)可能對(duì)這類腫瘤的治療具有重要的意義，而CD39可能是腫瘤特異性CD8 + TIL和患者對(duì)CD8 + TIL定向癌癥免疫療法產(chǎn)生應(yīng)答的預(yù)測(cè)生物標(biāo)記物。

目前，除了測(cè)試CD39是否可以成為有用的生物標(biāo)志物外，Newell及其同事還在研究其他癌癥類型和TILs，如CD4 + T細(xì)胞，以確定是否同樣適用類似的原則。

綜上，CD8+ TIL細(xì)胞是否表達(dá)CD39，或能夠預(yù)測(cè)患者對(duì)PD-1抗體治療的響應(yīng)程度，并對(duì)TIL、CAR-T細(xì)胞治療中，篩選更具潛力的抗癌T細(xì)胞的具有很大的幫助，進(jìn)一步擴(kuò)大免疫療法獲益人群。

參考出處：

https:///news/2018-07-virus-targeting-white-blood-cells-tumors.html

DOI: 10.1038/s41586-018-0130-2