第一章 概論

第一節(jié)微生物(microorganism)

一、定義、特點、分類

特點： 形體微小，結(jié)構(gòu)簡單，種類繁多， 分布廣泛，繁殖迅速，易于變異。

分類：主要分為三大類八種微生物：

1.非細胞型微生物 ：

無典型的細胞結(jié)構(gòu)，含一種類型的遺傳物質(zhì)，專性細胞內(nèi)寄生。例：病毒，亞病毒，朊粒。

2.原核細胞型：

有細胞結(jié)構(gòu)，但細胞器不完善，僅有原始核質(zhì)，含有兩種類型的遺傳物質(zhì)。例：細菌、放線菌、螺旋體、支原體、衣原體、立克次氏體。

3.真核細胞型：

有完整的細胞器，細胞核分化程度高。例：真菌，原蟲。

二、微生物與人類的關(guān)系

(一)、有利方面

參與物質(zhì)循環(huán)生產(chǎn)：(1)工業(yè)上：食品、皮革、紡織、化工等;(2)農(nóng)業(yè)上：制造菌肥、植物生長素、滅蟲等;(3)醫(yī)藥工業(yè)：抗生素的生產(chǎn);生物制品的制備;正常菌群;基因工程。

(二)不利方面

條件致病菌：致病菌：

三、微生物學發(fā)展過程

(一)微生物學的經(jīng)驗時期

(二)實驗微生物學時期

特點：人們將微生物與生產(chǎn)、生活密切聯(lián)系起來，發(fā)現(xiàn)了許多病的病原體，找到了醫(yī)治和預(yù)防方法，并能利用它。

此階段作出貢獻的科學家有：列文虎克(荷蘭)、巴斯德(法國)、李斯特(英國)、郭霍(德國)、伊萬諾夫斯基(俄國)等。

(三)現(xiàn)代微生物學時期

(四)醫(yī)學微生物學的學習任務(wù)與方法

第二章 細菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)

第一節(jié) 細菌的形態(tài)與大小

一.細菌的大小：以um 作為測量單位。

二.細菌的形態(tài)：球、桿、螺(弧菌、螺菌)。

三.細菌的排列： 球菌：雙、鏈、四聯(lián)、八疊、葡萄樣。

桿菌和螺菌：多分散排列，偶呈鏈狀。

第二節(jié) 細菌的結(jié)構(gòu)

一.細菌的基本結(jié)構(gòu)：包括細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核質(zhì)。

(一)細胞壁(cell wall)：

1.G 菌：含有豐富的肽聚糖、大量的磷壁酸。

(1)肽聚糖：由聚糖骨架(N-乙酰葡糖胺及N-乙酰胞壁酸經(jīng) -1、4糖苷鍵交替連接構(gòu)成)、四肽側(cè)鏈、五肽橋組成，形成牢固的三維空間構(gòu)型。

(2)磷壁酸：核糖醇及甘油醇殘基連接而成的多聚物。分為：壁磷壁酸;膜磷壁酸(LTA)。功能：G 菌的主要抗原所在;有的具有粘附功能。

2.G-菌：含有少量的肽聚糖、很厚的外膜。

(1)肽聚糖：量少，缺乏五肽橋，形成疏松的二維平面結(jié)構(gòu)。

(2)外膜：由脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖(脂類A、核心多糖、特異性多糖)構(gòu)成。

脂類A是內(nèi)毒素的毒性成分所在。

3.細胞壁的功能： 維持細菌固有的外形;保護細菌抗低滲;與細菌的抗原性有關(guān);參與細胞內(nèi)外物質(zhì)交換。

4.L型細菌：

定義:細菌L型即細菌細胞壁缺陷型。

特點：①呈高度的多形性;多染為革蘭氏陰性;②高滲、低瓊脂、含血清的平板培養(yǎng);2-7天后形成荷包蛋樣細小菌落;仍有一定的致病力。③可返祖性;④可致病性：細菌L型仍有一定的致病性。因此，當臨床上遇有明顯癥狀而標本常規(guī)細菌檢驗為陰性者，應(yīng)考慮細菌L型感染的可能性。

(二)細胞膜(cell membrane)：

1、結(jié)構(gòu)：液態(tài)脂質(zhì)雙層內(nèi)鑲嵌多種蛋白質(zhì)，但不含膽固醇。

2、功能：物質(zhì)交換，生物合成，呼吸及分泌作用。

3、中介體：(類線粒體)胞膜內(nèi)折形成的囊管狀物，多見于G 菌，EM下可見。分為：橫膈中介體、側(cè)中介體。功能：能量代謝;細菌的分裂。

(三)細胞質(zhì)

1、核蛋白體(核糖體)，是細菌合成蛋白質(zhì)的場所。

2、質(zhì)粒(plasmid)：

定義：是染色體外的遺傳物質(zhì)，為環(huán)狀閉合的雙鏈DNA分子。

特點：具有自我復(fù)制的能力; 控制部分特定的遺傳信息

F質(zhì)粒：制造性菌毛。

R質(zhì)粒：決定細菌耐藥性形成。

Vi質(zhì)粒：參與細菌毒力。

Col質(zhì)粒：決定大腸桿菌能否產(chǎn)生大腸菌素。

非細菌生命活動所必須，可自行丟失或消除;具有轉(zhuǎn)移性、相容性和不相容性。

3、胞漿顆粒：多為營養(yǎng)儲存物，其中的異染顆粒粒，對白喉棒狀桿菌的鑒別有一定的意義。有鑒別意義。

(四)核質(zhì)(nuclear material)

細菌屬于原核細胞，無成形的細胞核，無核膜和核仁等，故稱核質(zhì)、核區(qū)或擬核。

雙股DNA。細菌遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)質(zhì)，控制著細菌的主要遺傳變異性狀。

二、細菌的特殊結(jié)構(gòu)： 包括莢膜、芽胞、鞭毛、菌毛

(一)莢膜

定義：某些細菌細胞壁外包繞著一層黏液性物質(zhì)，當其厚度大于0.2μm時稱為莢膜。

形成條件：機體內(nèi)或營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上。

結(jié)構(gòu)：多糖或多肽。

功能：(1)保護菌體：抗干燥、抗吞噬、抗體液因子的殺菌;

(2)與致病性有關(guān);

(3)與抗原性有關(guān)

(4)鑒定作用

觀察法：莢膜染色或墨汁負性染色。

(二)芽胞

定義：芽胞是某些細菌在一定環(huán)境條件下，細胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體內(nèi)形成一個具有多層膜狀結(jié)構(gòu)、通透性低、折光性強的圓形或橢圓形小體。

形成條件：營養(yǎng)缺乏主要是革蘭陽性桿菌。

特點：①保存了細菌的全部生命活性，②是細菌的休眠狀態(tài)，無新陳代謝(細菌-繁殖體;芽胞-休眠體)③條件適宜，芽胞可萌發(fā)成繁殖體而致病(1個細菌→1個芽胞→1個細菌)④抵抗力強，存活時間長

結(jié)構(gòu)：多層厚膜。

意義：①增強細菌的抵抗力

②可成為潛在病源

③判斷滅菌效果的指標

④鑒定作用

觀察法：芽胞染色。

(三)鞭毛

定義:是某些細菌菌體表面附著的細長呈波狀彎曲的絲狀物。

分類：單(霍亂弧菌)、雙(空腸彎曲菌)、叢(銅綠假單胞菌)、周(沙門菌)。

存在菌：幾乎所有的弧菌和螺菌、約50%的桿菌、少數(shù)球菌有鞭毛。

結(jié)構(gòu)：鞭毛蛋白構(gòu)成，自細胞膜長出，游離于細胞外。包括基礎(chǔ)小體、鉤狀體、絲狀體。

功能：①運動作用：毛是細菌的運動器官。

②與致病有關(guān)。

③有免疫原性(特殊H抗原)

④鑒定作用

判斷方法：①經(jīng)特殊染色。

②用電子顯微鏡直接觀察鞭毛。

③通過暗視野顯微鏡觀察細菌的運動方式，推斷鞭毛的有無

④在半固體培養(yǎng)基中觀察細菌的生長現(xiàn)象，推斷鞭毛的有無。

(四)菌毛(pilus)

定義：是某些細菌菌體表面的比鞭毛更短、直絲狀物。

結(jié)構(gòu)：菌毛蛋白構(gòu)成。

分類及作用：普通菌毛：具有粘附能力，與致病性有關(guān)。

性菌毛： 遺傳物質(zhì)的載體;噬菌體的受體。細菌的耐藥性、毒力等均通過這種方式傳遞。

觀察法：必須用電子顯微鏡才能觀察到。

第三章 細菌的生理

第一節(jié) 細菌的理化性

一、細菌的化學組成：與其他生物細胞相似，細菌的化學組成主要有水、無機鹽、糖類、脂類、核酸和蛋白等。

①水在細菌細胞中含量最多，占細胞總重量的70%-90%;

②糖類大多為多糖，占細菌干重的10%-30%

③蛋白質(zhì)約占細菌干重的50%-80%

④細菌含有核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)兩種核酸。RNA主要存在于胞質(zhì)中，占細菌干重的10%;DNA則存在于染色體和質(zhì)粒中，占細菌干重的3%。

二、細菌的物理性狀：

1.帶電現(xiàn)象： 細革蘭陰性菌的pl約為pH4-5，革蘭陽性菌的pl約為pH2-3，

2.光學性質(zhì)：細菌為半透明體

3.滲透壓 ：由于細菌細胞內(nèi)含有高濃度的無機鹽和有機物，因而具有較高的滲透壓。4.表面積：細細菌體積微小，但其單位體積表面積大，有利于細菌與外界物質(zhì)交換。

5 . 具有半透性。染色法、比濁法、分光光度計法。

6.營養(yǎng)類型：根據(jù)細菌對營養(yǎng)物質(zhì)需要的不同，將細菌分為兩大營養(yǎng)類型。

(1)自營菌：能以簡單的無機碳化物、氮化物作為碳源、氮源，合成菌體所需的大分子，其能量來自無機化合物的氧化(化學能)，也可通過光合作用而獲得(光能)，如固氮菌。

(2)異營菌：不能以無機碳化合物作為唯一的碳源，必須利用有機物如糖類、蛋白質(zhì)、蛋白胨和氨基酸作為碳源和氮源，僅有少數(shù)異養(yǎng)菌能利用無機氮化物，合成菌體所需的大分子，其所需的能量大多從有機物質(zhì)氧化而獲得。

第二節(jié) 細菌的生長繁殖

一、細菌生長繁殖的條件：

充足的營養(yǎng)： 包括水、氮源(主要是提供合成菌體成分的原料，一般不提供能量。)、碳源(碳源是細菌合成蛋白質(zhì)、糖類、脂類、核酸、酶類等菌體成分的原料，同時也為細菌新陳代謝提供能量。)、無機鹽及生長因子。

合適的PH值：最適PH7.2-7.6。特殊：結(jié)核分枝桿菌在pH6.4-6.8、霍亂弧菌在pH8.4-9.2的環(huán)境中生長最好。

適宜的溫度：最適溫度37℃ 。

必要的氣體環(huán)境：主要包括O2、CO2、N2

據(jù)其對氧氣的需求，分專性需氧、專性厭氧、微需氧、兼性厭氧菌。

專性厭氧菌厭氧的原因：

(1)缺乏Eh高的細胞色素及細胞色素氧化酶，不能從有氧環(huán)境獲得營養(yǎng)。

(2)缺乏過氧化物酶、過氧化氫酶及超氧化物岐化酶，不能消除O2-及H2O2的殺菌作用。

二、細菌繁殖的方式及速度：

個體的生長繁殖：多為無性二分裂;速度快。

通常每20～30min分裂一次，結(jié)核分枝桿菌18～20h分裂一次。

群體的生長繁殖：常用生長曲線表示其繁殖規(guī)律。

(1)定義：以培養(yǎng)時間為橫坐標，以活菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標繪制一條曲線，稱為細菌的生長曲線

(2)生長曲線分為4個時期：

1)遲緩期：是細菌進入新環(huán)境后的適應(yīng)階段，細菌數(shù)不增加，甚至還稍有減少。

2)對數(shù)期：此期細菌以幾何級數(shù)增長(20→21→22→23→24→…)，在生長曲線圖上，活菌數(shù)的對數(shù)呈直線上升，增長極快。此期細菌的形態(tài)、染色性、生理活性都較典型，對外界環(huán)境因素的作用較為敏感。

3)穩(wěn)定期：由于培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)消耗，毒性產(chǎn)物積聚，pH下降使細菌繁殖速度漸趨下降，細菌死亡數(shù)則逐漸上升，細菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)大致平衡。

4)衰亡期：細菌繁殖逐漸減慢，死亡逐漸增多，死菌數(shù)超過活菌數(shù)。

第三節(jié) 細菌的新陳代謝

一、細菌的分解代謝產(chǎn)物及生化反應(yīng)：

1.對糖的分解： 需氧菌將丙酮酸經(jīng)三羧酸循環(huán)徹底分解成二氧化碳和水。厭氧菌則發(fā)酵丙酮酸，產(chǎn)生各種酸類、醛類、醇類、酮類。

糖發(fā)酵實驗： V-P實驗;甲基紅實驗。

2.對蛋白質(zhì)的分解：細菌分泌的胞外酶先將復(fù)雜的蛋白質(zhì)分解為短肽或氨基酸，然后吸收進人細胞，再由胞內(nèi)酶將氨基酸繼續(xù)分解。

常用的生化試驗：有吲同靛基質(zhì)試驗：檢測細菌分解色氨酸的能力。硫化氫實驗：檢測細菌分解含硫AA的能力。

3.其 它：枸櫞酸鹽利用實驗;尿素酶實驗。其中IMViC常用于鑒別產(chǎn)氣桿菌和大腸桿菌。

二、細菌的合成代謝產(chǎn)物：五素一質(zhì)

1.熱原質(zhì)：為G-菌的LPS，有致熱、耐熱的特點。

2.毒素及侵襲性酶：

外毒素是由革蘭陽性菌及部分革蘭陰性菌合成并釋放到菌體外的毒性蛋白質(zhì)，毒性強，不同細菌的外毒素對組織器官有高度的選擇性。內(nèi)毒素是革蘭陰性菌細胞壁的脂多糖成分，當菌體死亡裂解后，才可釋放到菌體外。

3.抗生素：抗生素主要由真菌和放線菌產(chǎn)生，由細菌產(chǎn)的抗生素只有多粘菌素等少數(shù)幾種。

4.細菌素：有抗菌作用，但作用譜狹窄，常用于細菌的分型。

5.維生素：主要有B族維生素和維生素K。

6.色素： 分脂溶性和水溶性兩種，有助于細菌的鑒別。

第四章 細菌的遺傳與變異

有關(guān)概念： 遺傳、變異(遺傳性、非遺傳性)

細菌遺傳、變異的物質(zhì)基礎(chǔ)主要有染色體、質(zhì)粒和轉(zhuǎn)位因子等。

一、細菌變異的物質(zhì)基礎(chǔ)

1、染色體：環(huán)狀閉和的雙股DNA，無組蛋白包繞。

2、質(zhì)粒：染色體外的遺傳物質(zhì)，主要特點：自主復(fù)制;不相容性;轉(zhuǎn)移性;編碼某些特殊功能蛋白質(zhì)。

耐藥性質(zhì)粒(接合性耐藥質(zhì)粒R質(zhì)粒)、Col質(zhì)粒(腸毒素)、Vi質(zhì)粒(致病性有關(guān))。

3、轉(zhuǎn)位因子：插入順序、轉(zhuǎn)座子、轉(zhuǎn)座噬菌體。

細菌染色體或質(zhì)粒上一段特異的核苷酸序列片段，可在DNA分子中隨機轉(zhuǎn)移，但必須依附于染色體或質(zhì)粒同時復(fù)制。分類： 插入序列IS、轉(zhuǎn)座子Tn(IS 中心序列)。

4、噬菌體

定義：噬菌體是感染細菌、真菌等微生物的病毒。此鄉(xiāng)。此類病毒感染細菌后能引起細菌裂解，故稱噬菌體。

生物學特性：形態(tài)及大?。簻y量單位是nm;形態(tài)有：蝌蚪形、微球形、細桿形;結(jié)構(gòu)：由頭、尾兩部分構(gòu)成;化學組成：核酸-遺傳物質(zhì)，DNA或RNA;蛋白質(zhì)-保護核酸，決定噬菌體的表型特征;抗原性：特異性抗體能抑制相應(yīng)噬菌體侵襲敏感菌;抵抗力。

噬菌體與細菌的相互關(guān)系：

(1)毒性噬菌體(virulent phage)：指能在宿主菌內(nèi)復(fù)制增殖產(chǎn)生大量子代噬菌體并裂解細菌的噬菌體。其溶菌過程包括吸附、穿入、生物合成、成熟與釋放。

①吸附階段：高度的特異性;②增殖階段：Phage DNA復(fù)制子代DNA 轉(zhuǎn)錄mRNA、轉(zhuǎn)譯與生物合成有關(guān)的酶、調(diào)節(jié)蛋白、結(jié)構(gòu)蛋白，一定程序裝配成完整 Phage;③裂解階段：噬菌現(xiàn)象：液體培養(yǎng)基-變澄清;固體培養(yǎng)基-噬菌斑。

(2)溫和噬菌體(temperate phage)：指不能在宿主菌內(nèi)復(fù)制增殖而將其基因整合到細菌染色體上，并隨菌分裂到子代菌中的噬菌體。但整合基因可自發(fā)或經(jīng)誘導(dǎo)而脫落成為游離狀態(tài)，使噬菌體進入溶菌周期，因此溫和噬菌體既有溶原周期又有溶菌周期。前噬菌體;溶原性細菌。

二、 細菌的變異現(xiàn)象

1.形態(tài)、結(jié)構(gòu)的變異：①莢膜變異;②芽胞變異;③鞭毛變異(H-O變異)。

2.菌落的變異：S-R變異。指新從患者分離的沙門菌常為光滑型，經(jīng)人工培養(yǎng)后菌落呈現(xiàn)粗糙型。常伴有抗原、毒力、某些生化特性的改變。

3.毒力的變異：BCG即為毒力變異的典型。

4.耐藥性的變異：

三. 細菌變異的機理

1.突變(mutation)：

定義：突變是細菌遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生突然而穩(wěn)定的改變，這種改變可傳于后代。

分類：自發(fā)突變與誘導(dǎo)突變：基因突變與染色體畸變;

突變的規(guī)律：可誘導(dǎo)性; 隨機、不定向性;可逆性。

2.、基因的轉(zhuǎn)移與重組：

①轉(zhuǎn)化：受體菌直接攝取供體菌提供的游離DNA片段整合重組。

②轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體為媒介，將供體菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)。

③接合：性菌毛將供體菌所帶有的F質(zhì)粒或類似遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移至受體菌的過程。主要見于革蘭陰性菌。

④溶原性轉(zhuǎn)換：噬菌體的DNA與細菌染色體重組。

⑤原生質(zhì)體融合：兩種失去細胞壁的原生質(zhì)體混和可發(fā)生融合。

四、細菌變異的實際意義

一、 在診斷疾病方面：

二、在治療疾病方面：注意耐藥性變異，選擇敏感抗生素。

三、在預(yù)防疾病方面：

四、在致癌物質(zhì)測定方面的應(yīng)用

五、在基因工程方面：

第五章 細菌的分類與命名

一、細菌的分類：

細菌的分類系統(tǒng)有多種，伯杰分類系統(tǒng)是目前國際上普遍采用的分類系統(tǒng)。

1.微生物的分類等級與其他生物相同，也分為界、門、綱、目、科、屬、種。

2.臨床微生物檢驗中常用的分類單位是科、屬、種。

3.種是細菌的基本分類單。

二、細菌的命名：

國際上多采用拉丁文雙命。一個細菌的名稱由字組成，前一字是屬名，首字母大寫;后一字為種名，首字母小寫。中文的命名次序與拉丁文相反。

三、細菌生物學特性分類法

細菌的形態(tài)、染色以及細菌的特殊結(jié)構(gòu)、細菌的生理生化特征，包括：傳統(tǒng)分類法、數(shù)值分類法。

四、細菌的遺傳學分類法

以細菌的核酸、蛋白質(zhì)等在組成上的同源程度分類，包括：

DNA G C mol%測定

核酸同源值測定

核糖體RNA堿基序列測定

細菌的分類系統(tǒng)

包括有細菌的鑒定以及細菌分類資料

伯杰分類系統(tǒng)——最常用

CDC(美國疾病預(yù)防和控制中心)分類系統(tǒng)

第六章 微生物檢驗概述

一、標本的采集與送檢

(一)標本采集的一般原則

1.早期采集：采集時間最好是病程早期、急性期或癥狀典型時，而且應(yīng)在使用抗菌藥物之前采集。

2.無菌采集： 采集的標本應(yīng)無外源性污染。

與外界相通的腔道，如竇道標本應(yīng)由竇道底部取樣;

從正常菌群寄生部位(如口腔)采集的標本，采用特殊選擇性培養(yǎng)基;

盛標本的無菌容器須先經(jīng)高壓滅菌、煮沸、干熱等物理方法滅菌，或用一次性無菌容器，而不能用化學處理。

3.根據(jù)目的菌的特性用不同的方法采集

如尿液標本，疑為厭氧菌感染時，應(yīng)以無菌注射器從恥骨上緣行膀胱穿刺術(shù)抽取;若懷疑是需氧或兼性厭氧菌的感染，則可通過自然導(dǎo)尿獲取標本。

4.采集適量標本：如腸熱癥患者，發(fā)病的第1 周應(yīng)采集血液，第2 周應(yīng)采集糞便和尿液。否則影響細菌檢出率。

5.安全采集

(二)標本的處理

一些對環(huán)境敏感的細菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血桿菌等應(yīng)保溫并立即送檢，而其他所有的標本采集后最好在2小時之內(nèi)送到實驗室。

一般情況下，用于細菌培養(yǎng)的標本保存時間不應(yīng)超過24小時。

二、微生物檢驗

1.直接涂片鏡檢;

初步診斷，5～10min。標本經(jīng)涂片染色或制備濕片鏡檢，有些標本如尿液、腦脊液等經(jīng)過離心濃縮后鏡檢出其初步結(jié)果對疾病診斷有參考價值。直接鏡檢對于確定進一步檢出步驟及鑒定方法也很有幫助。另外，直接鏡檢還可評價標本是否符合檢驗要求。

2.分離培養(yǎng);

3.生化實驗;

4.血清學實驗：鑒定細菌的種或型;

5.動物試驗; 藥物敏感試驗;

6.其他鑒定法。

三、血清學診斷

用已知的細菌或Ag檢測病人體液中有無相應(yīng)的Ab及效價的動態(tài)變化，作為某些傳染病的輔助診斷。結(jié)果判斷：Ab效價升高(超過正常人);雙份血清標本，Ab效價4倍或4倍以上增長。

四、臨床微生物實驗室安全措施和質(zhì)量保證

(一)實驗室感染來源

1.微生物氣溶膠。

2.接觸感染材料或使之附著于衣服帶出室外、菌液滴落于物體表面，注射時不慎刺破皮膚等。

(二)感染性廢棄物的處理

1.任何污染材料未經(jīng)消毒不能拿出實驗室。

2.液體廢棄物必須收集在防漏、未破的容器內(nèi)，經(jīng)高濃度的化學消毒劑處理。

3.對剩余標本、接種過的培養(yǎng)基、菌種等丟棄前均需適當消毒。

4.動物房的廢物在處理前及動物籠被清洗前均需消毒，最好經(jīng)高壓蒸氣滅菌。

5.對于任何有污染的銳器如針頭、注射器、玻片等在處理前不要用手接觸。

(三)微生物實驗室的室內(nèi)質(zhì)控

1.對細菌檢驗人員的要求;

2.操作手冊;

3.儀器設(shè)備的功能監(jiān)測;

4.培養(yǎng)基的質(zhì)量控制;

5.試劑、染色液以及抗生素的質(zhì)量控制;

6.標本檢驗的質(zhì)量控制;

7.標準菌株的來源和保存及室內(nèi)質(zhì)量的全面控制。

五、動物試驗

主要用途：分離和鑒定病原微生物，檢測細菌毒性產(chǎn)物，觀察病原微生物的致病性。

實驗動物：大鼠、小鼠、豚鼠、家兔及綿羊等。

接種方法：皮下/皮內(nèi)/肌內(nèi)/腹腔/靜脈/腦內(nèi)注射等?！　?/p>

六、免疫檢驗技術(shù)

七、發(fā)光分析技術(shù)

依賴酶或化學反應(yīng)釋放能量引起發(fā)光物質(zhì)(如魯米諾、熒光素等)發(fā)光的檢測方法。

根據(jù)發(fā)光原理，主要分為生物及化學發(fā)光兩種方法。

八、鱟試驗

鱟試驗陽性表明有革蘭染色陰性菌或內(nèi)毒素血癥，也可用于生物制品或注射液的內(nèi)毒素污染檢測。

九、分子生物學在病原微生物中的應(yīng)用

分子生物學：從分子水平上研究生物的生命活動及其規(guī)律的科學。

基因診斷：應(yīng)用基因工程技術(shù)對生物體的基因組DNA片段及其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進行定性和定量分析，進而對人體狀態(tài)和疾病作出診斷。

(一)核酸雜交

(二)聚合酶鏈式反應(yīng)

(三)生物芯片技術(shù)