蛹蟲草（又稱北冬蟲夏草、北蟲草、黃金草），作為一種藥用真菌，其藥效成分和營養(yǎng)成分與冬蟲夏草完全相同，屬于世間珍貴而稀有的生物藥材。蛹蟲草含有蟲草素、蟲草酸、蟲草多糖、超氧化物歧化酶SOD和微量元素硒等多種生物活性物質(zhì)，具有特殊的藥用價(jià)值和滋補(bǔ)功效。蛹蟲草作為冬蟲夏草的替代品，目前已廣泛用于制藥，深受消費(fèi)者的青睞。人工代料培育蛹蟲草不僅占地少，栽培周期短，而且經(jīng)濟(jì)效益好，是農(nóng)村農(nóng)民、下崗和退休職工興業(yè)致富的好項(xiàng)目，也為我國名貴藥材產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)又開辟了一個(gè)新的途徑。 

　　一、菌種制備 

　　優(yōu)質(zhì)菌種是種植成功和高效的關(guān)鍵，蛹蟲草菌種不可長期保存或多次轉(zhuǎn)管擴(kuò)繁，否則菌種容易退化變異，產(chǎn)量和品質(zhì)會(huì)明顯下降。因此，需要經(jīng)常留種和更新菌種。 

　　制種方法是采取組織分離法。選擇適應(yīng)性強(qiáng)、發(fā)菌快、見光轉(zhuǎn)色快、性狀穩(wěn)定、速生高產(chǎn)的菌株進(jìn)行組織分離制種，也可直接購買斜面培養(yǎng)基試管母種自行進(jìn)行擴(kuò)繁。目前有固體菌種和液體菌種2種類型，其中以液體菌種接種為好[5]。 

　?。ㄒ唬┮后w配制 

　　液體配比為葡萄糖20 g、蛋白胨10 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1 g、維生素B1 1片（10 mg）、水1 000 mL（pH值6～7）。先將1 000 mL水加熱增溫（約40 ℃），倒入蛋白胨攪拌溶解，再倒入其余原料，充分?jǐn)嚢?；然后用pH試紙測(cè)試酸堿度（標(biāo)準(zhǔn)pH值是6～7），若偏酸則用氫氧化鈉調(diào)和，偏堿則用白醋或鹽酸調(diào)節(jié)。 

　　營養(yǎng)液配制的多少應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)量靈活掌握。實(shí)踐證明，使用吸液管噴灑接種，每個(gè)培養(yǎng)瓶噴灑菌種4～5 mL，每瓶液體菌種（指小型醫(yī)用鹽水瓶）可接種37～40瓶；也可用蒸餾水或高壓滅菌水將液體菌種稀釋2～3倍進(jìn)行接種，可大大提高菌種使用率。 

　　（二） 裝瓶 

　　選用500 mL的醫(yī)用鹽水瓶或250 mL小型醫(yī)用鹽水瓶作為液體菌種培養(yǎng)瓶（500 mL大瓶可分裝300 mL培養(yǎng)液，250 mL小瓶裝至1/2/以上）。裝瓶時(shí)用玻璃漏斗，以免培養(yǎng)液粘附于瓶口、瓶頸或瓶壁上而招致雜菌感染。瓶口用聚丙烯薄膜或化學(xué)棉、脫脂棉棉球封塞嚴(yán)密。 

　?。ㄈ?高壓滅菌 

　　用手提式高壓滅菌鍋滅菌。將上述培養(yǎng)瓶整齊地?cái)[放鍋內(nèi)，上面用干毛巾蓋好瓶口，關(guān)緊鍋蓋。大火加熱至110 ℃，壓力表指針指向0.05時(shí)打開排氣閥以便排出冷空氣，待壓力表回至0時(shí)關(guān)掉排氣閥；然后大火加熱，讓其快速升溫至125～126 ℃，壓力表指針指向0.15時(shí)改用小火，維持1.25 h后?；穑葔毫Ρ砘氐?位，冷卻后打開鍋蓋，取瓶出鍋。 

　（四）放種 

　　培養(yǎng)瓶完全冷卻后方可下種，母種擴(kuò)繁在接種箱進(jìn)行無菌操作。先將接種用一切用品、工具和試管母種及培養(yǎng)瓶事先放入接種箱內(nèi)進(jìn)行消毒。操作人員從接種口把手伸入箱內(nèi)，在消毒碗內(nèi)點(diǎn)燃至少2袋起舞消毒劑，進(jìn)行薰蒸消毒。隨即用袖頭把接種口堵塞嚴(yán)密，密閉30 min。 

　　操作人員將手洗凈，并用75%酒精擦洗1遍，通過袖頭伸入接種箱。再用75%酒精把手連同手腕部位一并擦洗1遍，用皮筋把袖頭在手腕部扎緊，嚴(yán)防雜菌進(jìn)入箱內(nèi)。點(diǎn)著酒精燈，把接種工具用75%酒精擦洗1遍再放在酒精燈上方燎烤消毒；拿起母種試管，用75%酒精擦洗管口周圍，并在酒精燈火焰上方燎烤一下。打開母種試管，用接種工具將試管母種切割成0.5 mm×0.5 mm大小菌塊，在靠近酒精燈的無菌區(qū)進(jìn)行放種，每瓶放種2～3塊。 

　?。ㄎ澹┮后w菌種培養(yǎng) 

　　為利于菌種繁殖和菌絲生長，應(yīng)將放完種的培養(yǎng)瓶放置黑暗環(huán)境中，在搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，可全天24 h不停振蕩培養(yǎng)或間歇式每隔1 h左右振搖1次，每次30 min左右。經(jīng)過8～12 d振蕩培養(yǎng)，瓶中便有大量絮狀、片狀菌絲體和菌絲球充滿整個(gè)培養(yǎng)瓶；若無搖床條件，可用手搖措施振動(dòng)瓶液，每隔1～2 h搖動(dòng)1次為好。注意不可將營養(yǎng)液打濕封膜或棉塞。 

　　二、培養(yǎng)基原料配制 

?。ㄒ唬┰吓浞?nbsp;

　　實(shí)踐表明，人工代料栽培還是選用大米（雜交米）作主料為最好，具有發(fā)菌均勻、出草快、產(chǎn)量高的特點(diǎn)。每瓶裝大米30 g、黃豆粉（豆面）3 g、營養(yǎng)液50 mL；營養(yǎng)液配方為水1 000 mL（pH值6～7）、葡萄糖25 g、蛋白胨10 g、磷酸二氫鉀1.5 g、硫酸鎂1 g、檸檬酸銨1 g、維生素B1 2片。 

　?。ǘ?shí)例 

　　為提高拌料和裝瓶的效率，可一次性拌好能裝1 000～2 000瓶的原料，同時(shí)應(yīng)精確地計(jì)算出主料和各種輔料的用量。 

　　現(xiàn)以每批裝1 000瓶為例，配料如下。主料：大米30 g×1 000=30 kg，黃豆粉3 g×1 000=3 kg；輔料：水50 g×1 000=50 kg，葡萄糖1 250 g，蛋白胨500 g，磷酸二氫鉀150 g，硫酸鎂50 g，檸檬酸銨50 g，維生素B1 100片。 

　 三、拌料 

　　在地坪上鋪1塊干凈塑料布，將上述2種主料稱好倒在塑料布上充分摻拌均勻。再將幾種輔料分別精準(zhǔn)秤好倒入50 kg的水中，充分?jǐn)嚢枋蛊淙芑Ｓ胮H試紙測(cè)試酸堿度，以pH值6～7為準(zhǔn)。 

　　四、裝瓶 

　　可分別自制幾個(gè)能定量盛裝33 g主料（大米30 g，黃豆粉3 g）的容器和定量盛裝50 mL液體的容器進(jìn)行裝瓶。裝瓶時(shí)，應(yīng)先裝主料，再裝營養(yǎng)液，裝好后用皮筋封好膜后，搖動(dòng)瓶里原料，使固體與液體充分混合均勻，以利于發(fā)菌好、生長整齊。

      五、滅菌 

　　可用高壓蒸汽爐進(jìn)行滅菌，即在121 ℃高溫和1.5 kg/m2的壓力下密閉滅菌30 min，冷卻后取出即可；也可常壓滅菌，當(dāng)溫度升至100 ℃時(shí)，再改小火維持8～10 h即可，燜鍋一夜，次日早出鍋接種。 

　　六、接種 

　　于接種箱中進(jìn)行無菌操作，點(diǎn)燃酒精燈，在靠近酒精燈的安全區(qū)打開液體菌種瓶，用吸液管吸取液體菌種，每瓶以4～5 mL種量均勻噴注到培養(yǎng)基上，立即封口扎緊（下種量要均勻，噴注菌種盡量勻稱）；接好一批培養(yǎng)瓶后及時(shí)轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室（黑暗環(huán)境）進(jìn)行菌絲培養(yǎng)；接種操作每批之間必須重新消毒，點(diǎn)燃起舞消毒劑2～3袋（第1箱消毒時(shí)3袋，之后2袋）。密閉30 min即達(dá)消毒效果；將接種好培養(yǎng)瓶整齊擺放在培養(yǎng)架上。 

　　七、菌絲培養(yǎng) 

　　蛹蟲草屬中低溫真菌類，菌絲最適宜生長溫度是15～25 ℃，子座最適宜溫度為18～22 ℃。要求培養(yǎng)室內(nèi)具備調(diào)節(jié)溫度、濕度和光照的基本條件；培養(yǎng)室放置培養(yǎng)架，培養(yǎng)架可設(shè)6～7層，層高40 cm，保證每個(gè)培養(yǎng)瓶都能得到光照。一般25～30 m2的房間可擺放10 000個(gè)培養(yǎng)瓶，可生產(chǎn)80 kg左右干品。 

?。ㄒ唬?初始階段（前5 d） 

　　菌絲萌發(fā)階段，要求做到“三控”：一是控光，需要黑暗環(huán)境；二是控溫，培養(yǎng)室內(nèi)溫度最好控制在15～18 ℃；三是控濕，室內(nèi)空氣相對(duì)濕度控制在60%左右。 

　　接種第2天，培養(yǎng)瓶料面上可見到點(diǎn)片或連片發(fā)菌；第3天菌絲已大面積展開，占領(lǐng)料面50%以上；第4天菌絲占領(lǐng)料面80%以上；第5天菌絲全部發(fā)滿料面，并已開始向培養(yǎng)基內(nèi)滲透一指左右。稀釋與未稀釋菌種，其菌絲萌發(fā)能力完全相同，采取稀釋2～3倍方法可解決菌種不足問題。經(jīng)過5 d時(shí)間培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶里菌絲很快布滿整個(gè)料面。 

　　（二）待菌絲布滿料面后（5 d后） 

　　可將溫度提高至20～23 ℃，再繼續(xù)培養(yǎng)15 d左右，菌絲就可吃透整瓶培養(yǎng)基，至此菌絲就完成營養(yǎng)生長階段，標(biāo)志菌絲體已發(fā)育成熟，開始進(jìn)入生殖生長時(shí)期。 

　?。ㄈ┻M(jìn)入生殖生長階段后（接種后20 d左右） 

　　進(jìn)行光照刺激，促進(jìn)菌絲體轉(zhuǎn)色。打開日光燈，進(jìn)行全天24 h光照，直到蛹蟲草發(fā)芽長出小子實(shí)體時(shí)，再改為白天光照14～15 h，夜晚關(guān)燈。白天溫度控制在20 ℃，晚上控制在10 ℃左右，通過溫差刺激能促進(jìn)菌絲快速發(fā)育；室內(nèi)濕度60%～65%。見光第1天，料面上菌絲出現(xiàn)微黃；第2天顯現(xiàn)正黃色；第3天培養(yǎng)基內(nèi)菌絲全變鮮黃或米黃色；第4天整瓶呈橘黃色；第5～7天，菌絲基本轉(zhuǎn)完色；第7～10天，料面上出現(xiàn)米粒大小原基。 

　八、出草管理 

　　經(jīng)菌絲體生長發(fā)育，待培養(yǎng)基料面有突起形成米粒狀原基時(shí)，蛹蟲草即行發(fā)芽出草。 

　?。ㄒ唬?扎孔透氣 

　　將牙簽或鐵絲經(jīng)75%酒精擦洗消毒后，在封口膜上扎6～8個(gè)通氣孔，加強(qiáng)氣體交換，促使子實(shí)體的生長。 

　?。ǘ?加強(qiáng)室內(nèi)通風(fēng)換氣 

　　打開換氣扇或用電風(fēng)扇吹風(fēng)，每天早、中、晚各通風(fēng)1次，以便補(bǔ)充新鮮空氣和排出CO2，防止CO2積累過多，子座不能正常分化，影響生長發(fā)育。 

　?。ㄈ貪穸裙芾?nbsp;

　　到了出草階段，溫度和濕度對(duì)子實(shí)體的生長十分重要。溫度控制在18～21 ℃。盡量使空氣相對(duì)濕度提高到80%～85%。室內(nèi)濕度過小時(shí)，瓶內(nèi)培養(yǎng)基容易提早失水而影響產(chǎn)量；若室內(nèi)濕度過大時(shí)，容易誘發(fā)氣生菌絲，對(duì)子實(shí)體生長同樣不利?？刹扇≡诘孛嫔蠟⑺驖娝?，空間用空氣加濕器增加室內(nèi)濕度；無條件用空氣加濕器者，可用噴霧器在空間噴霧增濕。 

　?。ㄋ模┕庹展芾?nbsp;

　　生長一段時(shí)間，部分瓶里的子實(shí)體有一邊倒現(xiàn)象，這是由于蛹蟲草較強(qiáng)的趨光性所致。因此，應(yīng)注意在子實(shí)體形成后可根據(jù)生長情況調(diào)整培養(yǎng)瓶與光源相對(duì)方向，讓其受光均勻，以提高產(chǎn)品的品質(zhì)和產(chǎn)量。 

　九、采收 

　　經(jīng)過45～50 d的精心培育，子實(shí)體長至7～8 cm，子實(shí)體呈橘紅色或橘黃色棒狀，頂端出現(xiàn)許多小刺時(shí)，表明子實(shí)體已經(jīng)成熟，這時(shí)就可采收；打開培養(yǎng)瓶封口膜，用消毒的攝子小心夾出子實(shí)體，注意不要碰傷子實(shí)體表皮，也不要用力太大，以免拉斷，影響商品價(jià)值；將采收的子實(shí)體放在干凈的器具內(nèi)，低溫烘干或在空調(diào)或電風(fēng)扇下吹干，不可在太陽下曬干，以免褪色影響商品價(jià)值。晾干標(biāo)準(zhǔn)：用手一捏即碎，然后再放空氣中讓其回潮，再用手一捏又不碎即可，干燥好的子實(shí)體裝袋密封待售。（工作單位：河南駐馬店農(nóng)業(yè)學(xué)校）