豆粕是常見的蛋白質(zhì)飼料，由于其蛋白質(zhì)含量高，氨基酸配比合理，消化利用率高，廣泛應(yīng)用于畜禽配合飼料中。然而，豆粕中含有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，在動(dòng)物消化道中抑制胰蛋白酶的活性，降低其飼用價(jià)值。發(fā)酵能夠在人工控制條件下，微生物通過自身的代謝活動(dòng)，將植物性和動(dòng)物性原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子分解或轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生更易被畜禽采食和吸收且無毒副作用的飼料原料。研究發(fā)現(xiàn)，飼料經(jīng)微生物發(fā)酵后，會(huì)產(chǎn)生更多的活性益生菌菌體、各種酶、各級(jí)代謝產(chǎn)物、多種維生素、活性小肽、氨基酸和促生長(zhǎng)因子等，起到促進(jìn)生長(zhǎng)作用，維持動(dòng)物腸道菌群的平衡作用。本試驗(yàn)在原有研究基礎(chǔ)上，以含水量75%濕豆渣為主要發(fā)酵原料，進(jìn)一步探討微生物發(fā)酵對(duì)飼料原料品質(zhì)的影響，以及發(fā)酵前后營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的變化，為發(fā)酵飼料在生產(chǎn)中的科學(xué)應(yīng)用和推廣提供理論依據(jù)。

1.1　試驗(yàn)材料

含水量75%的濕豆渣、玉米面、麩皮，發(fā)酵菌種：健源菌種原液（乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌，山東康地恩科技有限公司生產(chǎn)）。

1.2　試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以含水量75%的濕豆渣為主要原料，按照濕豆渣∶玉米面∶麩皮為6∶1∶1的比例配制成混合料，加入菌種原液，在發(fā)酵7 d、17 d、27 d和37 d時(shí)分別采樣分析飼料pH及常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分的變化。

1.3　試驗(yàn)方法

發(fā)酵菌種活化：將菌種與紅糖按照2∶1的比例混合，然后添加少量溫度為25～35 ℃的水稀釋活化。

飼料發(fā)酵：將混合料平鋪在干凈的地面上，用噴霧器將稀釋活化的菌種發(fā)酵液噴灑均勻，然后噴灑蒸餾水調(diào)節(jié)混合料水分含量至45%，加入攪拌機(jī)攪拌均勻，裝入發(fā)酵桶，密封發(fā)酵，發(fā)酵溫度為15～18 ℃，試驗(yàn)設(shè)置6個(gè)重復(fù)。

1.4　樣品測(cè)定

1）pH測(cè)定：稱取發(fā)酵樣品10 g溶解于含有90 mL蒸餾水的錐形瓶中，攪拌均勻，靜置10 min后，用pH計(jì)測(cè)定溶液的pH。

2）常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定：發(fā)酵飼料的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，參照張麗英主編的《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》（第3版）。主要測(cè)定指標(biāo)有：水分（及干物質(zhì)DM）、粗灰分（CA）、粗脂肪（EE）、粗蛋白（CP）、總能（GE）、無氮浸出物（NFE）、粗纖維（CF）、鈣（Ca）和磷（P）。水分采用烘箱干燥法進(jìn)行測(cè)定；CA采用灰化法進(jìn)行測(cè)定；EE采用索氏提取器法進(jìn)行測(cè)定；CP采用凱氏定氮法進(jìn)行測(cè)定；GE采用6200氧彈量熱儀法測(cè)定；NFE根據(jù)間接計(jì)算法求得，即NFE%=100%-（水分+ CA +CP+EE+CF）%；CF采用酸堿消煮法測(cè)定；Ca和P的測(cè)定采用原子吸收光譜法進(jìn)行。

1.5　數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)處理采用SAS8.2軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，方差分析使用One-way ANOVA，利用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。P<>

2.1　飼料pH的變化

圖1　發(fā)酵飼料pH變化規(guī)律

如圖1所示，飼料經(jīng)菌種發(fā)酵后，pH逐漸降低，并且發(fā)酵后飼料pH較發(fā)酵前差異顯著（P<0.05）。同時(shí)，在微生物發(fā)酵17 d之后，飼料ph的降低差異不顯著（p="">0.05）。

2.2　飼料發(fā)酵對(duì)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分的影響

由表1可知，飼料經(jīng)微生物發(fā)酵后，飼料DM、OM及NFE含量呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，發(fā)酵7 d后，DM、OM及NFE含量最高，并且與其他組相比差異顯著（P<0.05），但是，飼料發(fā)酵17 d后，dm、om及nfe含量變化不明顯，差異不顯著（p="">0.05）。與發(fā)酵前相比，發(fā)酵后飼料的EE、CP、GE及P含量顯著升高（P<><>

2.3　飼料發(fā)酵前后營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量變化

由表2可知，發(fā)酵后的飼料中OM、CF、NFE和Ca的含量降低，并且CF的降低與發(fā)酵前相比差異顯著（P<><><><>

豆粕、菜籽粕等是常見的植物性蛋白質(zhì)飼料資源，蛋白質(zhì)含量豐富，含多種礦物質(zhì)和微量元素，但由于其含有抗?fàn)I養(yǎng)因子等不利成分，限制了豆粕、菜籽粕等在畜禽飼料中的使用。研究發(fā)現(xiàn)，微生物發(fā)酵能有效提高菜籽粕中的粗蛋白質(zhì)含量，降低抗?fàn)I養(yǎng)因子水平。李文立等采用枯草芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌復(fù)合發(fā)酵豆粕，發(fā)現(xiàn)隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子的含量顯著降低。本試驗(yàn)以含水量75%的濕豆渣為主要原料，采用微生物發(fā)酵，借以改善飼料的品質(zhì)，提高飼料中的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量，提高飼料營(yíng)養(yǎng)的消化率。

本研究發(fā)現(xiàn)，飼料發(fā)酵后pH顯著降低，飼料發(fā)酵17 d后趨于穩(wěn)定。飼料經(jīng)過微生物發(fā)酵后能產(chǎn)生大量的有益菌和有機(jī)酸，維持腸道的健康環(huán)境。魏炳棟等研究發(fā)現(xiàn)，豆粕經(jīng)過乳酸菌發(fā)酵酶解后，在前期（0～12 h）pH變化迅速，此后分別持續(xù)下降和升高，但趨于穩(wěn)定。甘晶研究發(fā)現(xiàn)，乳酸菌發(fā)酵豆乳，發(fā)酵7 h后菌種達(dá)到增殖對(duì)數(shù)期，pH下降趨于穩(wěn)定。這與本試驗(yàn)研究結(jié)果基本一致。pH的降低與酸含量的增加有直接關(guān)系，酵母菌和芽孢桿菌等厭氧菌的存在使得乳酸菌大量繁殖產(chǎn)生乳酸，使發(fā)酵飼料產(chǎn)品具有酸香味，改善飼料適口性，同時(shí)，大量乳酸產(chǎn)生可降低飼料pH。

飼料經(jīng)過微生物發(fā)酵后，飼料中的CP、EE和GE含量提高，可能是由于發(fā)酵消除了豆粕中的蛋白酶抑制劑，以及降解了碳水化合物。Zamora等也得到了同樣的研究結(jié)果。同時(shí)，飼料發(fā)酵過程中，微生物在生長(zhǎng)繁殖時(shí)需要利用發(fā)酵底物本身的有機(jī)物來合成自身生存所需要的有機(jī)物，這造成干物質(zhì)的減少，這可能是CP、EE和GE含量升高的另一原因。韓建榮等研究靈芝固態(tài)發(fā)酵降解玉米淀粉發(fā)現(xiàn)，EE含量由發(fā)酵前的10.35%下降到發(fā)酵后的8.5%，而在發(fā)酵后期與中期相比，EE含量升高可能是由于干物質(zhì)損失造成的粗脂肪濃縮效應(yīng)。發(fā)酵并不能直接改變飼料中鈣和磷的含量，但是卻能顯著降低植酸磷的含量，微生物在發(fā)酵過程中利用植酸磷，降解成無機(jī)態(tài)磷，使有效磷含量升高，這與本試驗(yàn)的研究結(jié)果一致。另外，纖維素由于分子排列緊密，非反芻動(dòng)物難以將其消化利用，酵母菌和霉菌混合使用發(fā)酵飼料后，粗纖維降解率提高，使得CF顯著降低。

微生物發(fā)酵以濕豆渣為主要原料的飼料，降低飼料pH，減少飼料中的DM、OM、NFE、CF及Ca的含量，升高EE、CP、GE及P含量，提升飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。