第四章 單克隆抗體與基因工程抗體的制備

（答案及解析見(jiàn)文末）

一、A1

1、陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞常用的保存方法是（）。

A、4℃冰箱保存

B、37℃保存

C、-20℃保存

D、-30℃保存

E、液氮（-196℃）保存

2、培養(yǎng)骨髓細(xì)胞時(shí)為避免返祖，定期用于處理細(xì)胞的是（）。

A、PEG

B、TK

C、8-AG

D、HAT

E、ConA

3、制備單克隆抗體時(shí)為獲得經(jīng)過(guò)抗原免疫的B細(xì)胞通常采用（）。

A、B細(xì)胞體外培養(yǎng)

B、小鼠腹腔內(nèi)接種抗原

C、大白鼠體內(nèi)接種抗原

D、小鼠肌肉內(nèi)接種抗原

E、小鼠皮下注射B細(xì)胞

4、能在HAT培養(yǎng)基生長(zhǎng)繁殖的細(xì)胞是（）。

A、小鼠脾細(xì)胞

B、小鼠骨髓瘤細(xì)胞

C、飼養(yǎng)細(xì)胞

D、雜交瘤細(xì)胞

E、以上都可以

5、免疫治療中，同時(shí)具有特異性結(jié)合Tc和腫瘤細(xì)胞的抗體是（）。

A、單鏈抗體

B、人源化抗體

C、雙價(jià)抗體

D、嵌和抗體

E、雙特異性抗體

6、單克隆抗體制備過(guò)程中用于阻斷瘤細(xì)胞通過(guò)正常途徑合成DNA的化合物是（）。

A、次黃嘌呤

B、胸腺嘧啶核苷

C、葉酸

D、聚乙二醇

E、甲氨蝶呤

7、人源化抗體是（）。

A、由鼠抗體的Fc與人抗體的Fab組成

B、由鼠體內(nèi)編碼人抗體的基因指導(dǎo)合成的抗體

C、由2個(gè)相串聯(lián)的人抗體Fab段連接而成

D、用鼠抗體CDR嵌如人抗體可變區(qū)而成

E、完全的人體合成抗體

8、制備單克隆抗體常選用小鼠的哪類細(xì)胞作為飼養(yǎng)細(xì)胞（）。

A、中性粒細(xì)胞

B、K細(xì)胞

C、肥大細(xì)胞

D、成纖維細(xì)胞

E、腹腔細(xì)胞

9、單克隆抗體的應(yīng)用不包括（）。

A、腫瘤的診斷

B、腫瘤的定位

C、血清Cl-含量測(cè)定

D、激素水平檢測(cè)

E、抗原物質(zhì)的提取及純化

10、單克隆抗體制備時(shí)作為細(xì)胞融合劑的是（）。

A、HAT

B、PEG

C、TK

D、DNA

E、ConA

答案部分

一、A1

1、

【正確答案】 E

【答案解析】克隆化培養(yǎng)后的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞應(yīng)及時(shí)凍存，最好保存在-196℃液氮中。

2、

【正確答案】 C

【答案解析】細(xì)胞在傳代過(guò)程中，部分細(xì)胞可能有返祖現(xiàn)象，應(yīng)定期用8-氮鳥(niǎo)嘌呤（8-AG）進(jìn)行處理，使生存的細(xì)胞對(duì)HAT呈均一的敏感性。

3、

【正確答案】 B

【答案解析】制備單克隆抗體時(shí)，可采用動(dòng)物體內(nèi)誘生方法：先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不完全佐劑，一周后將雜交瘤細(xì)胞懸液注射腹腔，1～2周后，無(wú)菌抽取腹水，離心取上清液即可。

4、

【正確答案】 D

【答案解析】細(xì)胞融合的選擇培養(yǎng)基中有三種關(guān)鍵成分：次黃嘌呤（H）、甲氨蝶呤（A）、胸腺嘧啶核苷（T），所以取三者的字頭稱為HAT培養(yǎng)基。只有融合細(xì)胞具有親代雙方遺傳性能，才能在HAT培養(yǎng)基上長(zhǎng)期存活與繁殖，如雜交瘤細(xì)胞。

5、

【正確答案】 E

【答案解析】雙特異性不同的兩個(gè)小分子抗體連接在一起可得到雙特異性抗體。雙特異性抗體能同時(shí)結(jié)合兩種抗原，因而可介導(dǎo)標(biāo)記物與靶抗原結(jié)合或某些效應(yīng)因子定位于靶細(xì)胞，在免疫學(xué)檢測(cè)中可簡(jiǎn)化操作步驟，提高檢驗(yàn)質(zhì)量；應(yīng)用雙特異性抗體介導(dǎo)的藥物殺傷效應(yīng)可用于腫瘤等的治療。

6、

【正確答案】 E

【答案解析】甲氨蝶呤（A）是葉酸的拮抗藥，可阻斷瘤細(xì)胞利用正常途徑合成DNA。

7、

【正確答案】 D

【答案解析】人源化抗體主要指鼠源單克隆抗體以基因克隆及DNA重組技術(shù)改造，重新表達(dá)的抗體，其大部分氨基酸序列為人源序列取代，基本保留親本鼠單克隆抗體的親和力和特異性，又降低了其異源性，有利于人體。

8、

【正確答案】 E

【答案解析】制備單克隆抗體常選用小鼠的腹腔細(xì)胞作為飼養(yǎng)細(xì)胞。先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不完全佐劑，一周后將雜交瘤細(xì)胞懸液注射腹腔，1～2周后，無(wú)菌抽取腹水，離心取上清液即可。

9、

【正確答案】 C

【答案解析】單克隆抗體在醫(yī)學(xué)中用于：①作為診斷試劑，用于診斷各類病原體，目前這是McAb應(yīng)用最多的領(lǐng)域之一；②腫瘤特異性抗原和相關(guān)抗原的檢測(cè)。用于腫瘤的診斷、分型及定位；③檢測(cè)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物，用于區(qū)分細(xì)胞亞群和細(xì)胞分化階段；④抗原微量成分的檢測(cè)及對(duì)酶類、激素、維生素、藥物等的檢測(cè)；⑤在防治工作中如惡性腫瘤的治療，“生物導(dǎo)彈”的研制等都有廣泛前景；⑥研究工作中用作“探針”，確定大分子生物物質(zhì)在細(xì)胞中的分布及位置；⑦用于抗原物質(zhì)的提取及純化。

10、

【正確答案】 B

【答案解析】單克隆抗體制備時(shí)最佳的融合效果應(yīng)是最低程度的細(xì)胞損傷而又產(chǎn)生最高頻率的融合。聚乙二醇（PEG1000～2000）是目前最常用的細(xì)胞融合劑，一般應(yīng)用濃度為40%（W/V）。

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