一、PH對酶活性影響的實(shí)驗(yàn)

  （1）不能用碘液作指示劑

   常正良 只有在中性和酸性條件下，碘才能使淀粉變藍(lán)，而在堿性條件下，碘不會使淀粉變藍(lán)。事實(shí)上，淀粉與碘的藍(lán)色反應(yīng)在pH=3～5的弱酸性溶液中進(jìn)行最靈敏，在pH<8的弱堿性溶液中次之，在強(qiáng)酸性溶液中，反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)紫色，在pH>9的堿性溶液中不顯色。

    王建光  本實(shí)驗(yàn)不能用碘液作鑒定試劑，因?yàn)镮2不能長時間留在堿液中，I2會與NaOH發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，很快生成NaI（碘化鈉）和NaIO（次碘酸鈉），使I2與淀粉生成藍(lán)紫色絡(luò)合物的機(jī)會大大減少，從而影響實(shí)驗(yàn)的觀察效果。

 （2）不能用斐林試劑作指示劑

  王學(xué)宏  鹽酸會與斐林試劑發(fā)生中和反應(yīng)，使斐林試劑失去鑒定作用。即使酸性條件下淀粉酶仍具有活性，使淀粉水解成還原糖，也不能通過斐林試劑檢驗(yàn)出來。

  （3）建議改用過氧化氫酶進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)

   王學(xué)宏  綜上所述，該實(shí)驗(yàn)既不能用碘液作鑒定試劑，也不可用斐林試劑作鑒定試劑。而要探究PH值對酶活性的影響，只能改變反應(yīng)底物和酶，因此新課標(biāo)建議改用過氧化氫酶催化過氧化氫的分解來完成此實(shí)驗(yàn)，這樣就回避了鑒定試劑的選擇問題。

   二、驗(yàn)證酶化學(xué)本質(zhì)的實(shí)驗(yàn)

 （1）酸堿水解，產(chǎn)物為氨基酸。

（2）使蛋白質(zhì)變性的條件如：強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫等可使酶失活、沉淀。

（3）具有和蛋白質(zhì)相同的膠體性質(zhì)。

（4）與雙縮脲和硝酸等試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。5)電泳實(shí)驗(yàn)和元素分析等。

 以上各種實(shí)驗(yàn)均可用于證明酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，但是忽視了一個問題。20世紀(jì)80年代以來美國科學(xué)家切赫和奧特曼發(fā)現(xiàn)了少數(shù)RNA也具有催化能力。因此應(yīng)補(bǔ)充驗(yàn)證RNA酶本質(zhì)的實(shí)驗(yàn)，如用吡羅紅來檢驗(yàn)。

三、酶的專一性實(shí)驗(yàn)

如果選用碘液，只能說明淀粉酶對淀粉起催化作用，不能說明淀粉酶對蔗糖不起作用。故只能選用斐林試劑。

四、溫度對酶活性影響的實(shí)驗(yàn)

彭邦鳳：在“溫度對酶活性的影響”實(shí)驗(yàn)中，為何選擇碘液，而不選擇斐林試劑呢？

       如果僅從檢測反應(yīng)是否進(jìn)行的角度來選擇，兩種試劑均可。就教材三個溫度而言，選擇斐林試劑進(jìn)行鑒定，可以看到條件為0℃的試管中生成磚紅色沉淀極少，條件為100℃的試管中無磚紅色沉淀生成，條件為60℃的試管中磚紅色沉淀生成較多，得出結(jié)論，酶的作用需要適宜溫度。至于常老師提出的，隨溫度升高，酶活性恢復(fù)的問題應(yīng)該不會出現(xiàn)，由于所加斐林試劑堿性較強(qiáng)，會導(dǎo)致淀粉酶變性失活，鑒定過程中反應(yīng)不會進(jìn)行；同時，即便是有少許還原糖生成，也并不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)論的得出，甚至還能更好地說明溫度對酶活性的影響——低溫降低酶活性，隨溫度升高酶活性增強(qiáng)，高溫導(dǎo)致酶失活，酶的作用需要適宜的溫度。

        既然如此，為什么實(shí)驗(yàn)仍不選擇斐林試劑呢？筆者認(rèn)為，弄清這一點(diǎn)才是解釋指示劑選擇的本質(zhì)。選擇碘液不僅僅在于證明反應(yīng)能不能進(jìn)行，而在于進(jìn)行的程度，是要證明是否仍有淀粉存在、存在多少（即反應(yīng)了多少）。為此，正如常老師所說，我讓學(xué)生對實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了改進(jìn)，部分學(xué)生將碘液提前到第二步加入后進(jìn)行處理，通過預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果，通過討論大家認(rèn)為結(jié)果為選用碘液除可確定反應(yīng)是否進(jìn)行外，還可以動態(tài)觀察現(xiàn)象變化（其間可能呈現(xiàn)紅褐色或紅棕色），選擇斐林試劑的化學(xué)性質(zhì)的特殊性（堿性）和使用條件的特定性（沸水浴，屬鑒定反應(yīng)是否進(jìn)行）而達(dá)不到這個目的。值得一提的是，討論中也有同學(xué)所提到了100 ℃（沸水中）的條件下，淀粉遇碘并不變藍(lán)的問題，當(dāng)時還提出了改進(jìn)意見，將溫度適度調(diào)低以避免這一點(diǎn)，但在寫作時為了尊重教材我仍寫了100℃，以至于忽視了在100 ℃（沸水中）的條件下淀粉遇碘不變藍(lán)的事實(shí)。