熒光黃（Lucifer Yellow）-Invitrogen
作者 Jeffrey 于2011 年 6 月 14 日 在產(chǎn)品評(píng)述 瀏覽:424 views | 還沒有評(píng)論，快來評(píng)論吧
綠色熒光蛋白（Green Fluorescent Protein，GFP）可以算是分子生物學(xué)的一個(gè)具有革命性意義的發(fā)現(xiàn)，有了GFP，科研人員可以方便地觀察細(xì)胞。到目前為止，出現(xiàn)了多種GFP，但研究人員更多地使用不同顏色的熒光蛋白（如櫻桃色），或適用于特定條件的熒光蛋白（如pH敏感的GFP）。

有時(shí)候，GFP卻無法在一些應(yīng)用中失蹤細(xì)胞，比如檢測(cè)細(xì)胞液體攝入、細(xì)胞內(nèi)囊泡運(yùn)輸、檢查單分子膜的通透性等，此時(shí)需要的是小分子量的熒光化合物。第一個(gè)用于此類實(shí)驗(yàn)的化合物是熒光素，后來出現(xiàn)了異硫氰酸熒光素（FITC）。FITC是綠色的熒光分子，亮度高，對(duì)細(xì)胞無毒，但和大多數(shù)小熒光染料一樣，它會(huì)在成像時(shí)被漂白。熒光黃（Lucifer Yellow）是FITC標(biāo)記的替代品，具有很高的stokes range，約為110納米。此外，Lucifer Yellow非常易溶于水，因此在需要的時(shí)候可以配置較高濃度，而FITC水溶解性較弱。雖然Lucifer Yellow在成像過程中強(qiáng)度會(huì)減弱，但如果有需要，可以使用Lucifer Yellow抗體以獲得更好的信號(hào)。

這些染料的另一個(gè)缺點(diǎn)是，他們不能直接標(biāo)記生物相關(guān)的分子，如蛋白質(zhì)或脂類。由于這些染料與蛋白結(jié)合會(huì)損失熒光強(qiáng)度，同時(shí)具有光漂白敏感性，在標(biāo)記的蛋白很成像強(qiáng)度較弱。因此在標(biāo)記生物分子時(shí)，應(yīng)當(dāng)考慮使用其他標(biāo)簽。

在我的實(shí)驗(yàn)室里，我們使用Invitrogen公司的 Lucifer Yellow標(biāo)記細(xì)胞中的內(nèi)吞噬泡。由于其水溶解度高、熒光明亮、細(xì)胞毒性低，并且具有較寬的Stokes shift，我們得以在固定和活細(xì)胞中觀察內(nèi)吞噬泡。最近，我們也使用這種染料，觀察Transwell中的細(xì)胞形成的緊密連接。這些緊密連接不允許小分子從頂端轉(zhuǎn)運(yùn)到基底端，因此Lucifer Yellow被限制進(jìn)入基底端。

總結(jié)
The Good
和FITC相比，更小，更亮，水溶性更好。

The Bad
在醛固定過程中只有修飾過的Lucifer Yellow才能被固定。

The Bottom Line
Lucifer Yellow是替代FITC的選擇之一。

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標(biāo)簽: invitrogen, Lucifer Yellow, 熒光黃
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