事實(shí)證實(shí)，在科學(xué)飛速發(fā)展的今天，無論從事哪個(gè)領(lǐng)域的研究，要想突破，除了有良好的理論基礎(chǔ)外，更重要的是依靠于先進(jìn)的技術(shù)和優(yōu)良的儀器設(shè)備以及良好的研究環(huán)境。一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室除了具有一般生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)儀器設(shè)備外，還具有一些特殊用途的儀器，這些儀器一般較精密，價(jià)格昂貴。下面先容這些儀器的使用方法和留意事項(xiàng)。

一、冷凍離心機(jī)

低溫分離技術(shù)是分子生物學(xué)研究中必不可少的手段?；蚱瑪嗟姆蛛x、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實(shí)驗(yàn)中都離不開低溫離心技術(shù)，因此低溫冷凍離心機(jī)成為分子生物學(xué)研究中必備的重要儀器。在國內(nèi)，有多個(gè)廠家生產(chǎn)冷凍離心機(jī)，本實(shí)驗(yàn)室的高速冷凍離心機(jī)為GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。配有角式轉(zhuǎn)頭：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。極限轉(zhuǎn)速20000rpm。

1. 安裝與調(diào)試

離心機(jī)應(yīng)放置在水平堅(jiān)固的地面上，應(yīng)至少間隔10cm以上且具有良好的透風(fēng)環(huán)境中，四周空氣應(yīng)呈中性，且無導(dǎo)電性灰塵、易燃?xì)怏w和腐蝕性氣體，環(huán)境溫度應(yīng)在0～30℃之間，相對(duì)濕度小于80%。試轉(zhuǎn)前應(yīng)先打開蓋門，用手盤動(dòng)轉(zhuǎn)軸，輕巧靈活，無異常現(xiàn)象方可上所用的轉(zhuǎn)頭。轉(zhuǎn)子正確到位后打開電源開關(guān)，然后用手按住門開關(guān)，再按運(yùn)轉(zhuǎn)鍵，轉(zhuǎn)動(dòng)后立即停止，并觀察轉(zhuǎn)軸的轉(zhuǎn)向，若逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)即為正確，機(jī)器可投進(jìn)使用。

2. 操縱程序

（1）插上電源，待機(jī)指示燈亮；打開電源開關(guān)，調(diào)速與定時(shí)系統(tǒng)的數(shù)碼管顯示的閃爍數(shù)字為機(jī)器工作轉(zhuǎn)速的出廠設(shè)定，溫控系統(tǒng)的數(shù)碼管顯示此時(shí)離心腔的溫度。

（2）設(shè)定機(jī)器的工作參數(shù)，如工作溫度，運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間，工作轉(zhuǎn)速等。

（3）將預(yù)先平衡好的樣品放置于轉(zhuǎn)頭樣品架上，封閉機(jī)蓋。

（4）按控制面板的運(yùn)轉(zhuǎn)鍵，離心機(jī)開始運(yùn)轉(zhuǎn)。在預(yù)先設(shè)定的加速時(shí)間內(nèi)，其運(yùn)速升 至預(yù)先設(shè)定的值。

（5）在預(yù)先設(shè)定的運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間內(nèi)（不包括減速時(shí)間），離心機(jī)開始減速，其轉(zhuǎn)速在預(yù)先設(shè)定的減速時(shí)間內(nèi)降至零。

（6）按控制面板上的停止鍵，數(shù)碼管顯示dedT，數(shù)秒鐘后即顯示閃爍的轉(zhuǎn)速值，這時(shí)機(jī)器已預(yù)備好下一次工作。

3. 留意事項(xiàng)

（1）離心機(jī)應(yīng)始終處于水平位置，外接電源系統(tǒng)的電壓要匹配，并要求有良好的接地線，機(jī)器不使用，要拔掉電源插頭。

（2）開機(jī)前應(yīng)檢查轉(zhuǎn)頭安裝是否牢固，機(jī)腔中有無異物掉進(jìn)。

（3）樣品應(yīng)預(yù)先平衡，使用離心筒離心時(shí)離心筒與樣品應(yīng)同時(shí)平衡。

（4）揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時(shí)，應(yīng)使用帶蓋的離心管，并確保液體不過漏以免腐蝕機(jī)腔或造成事故。

（5）除工作溫度、運(yùn)轉(zhuǎn)速度和運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間外，不要隨意更改機(jī)器的工作參數(shù)，以免影響機(jī)器性能。轉(zhuǎn)速設(shè)定不得超過最高轉(zhuǎn)速，以確保機(jī)器安全運(yùn)轉(zhuǎn)。

（6）使用中如出現(xiàn)0.00或其它數(shù)字，機(jī)器不運(yùn)轉(zhuǎn)，應(yīng)關(guān)機(jī)斷電，10秒鐘后重新開機(jī)，待所設(shè)轉(zhuǎn)速顯示后，再按運(yùn)轉(zhuǎn)鍵，機(jī)器將照常運(yùn)轉(zhuǎn)。

（7）不得在機(jī)器運(yùn)轉(zhuǎn)過程中或轉(zhuǎn)子未停穩(wěn)的情況下打開蓋門，以免發(fā)生事故。

（8）每次操縱完畢應(yīng)做好使用情況記錄，并定期對(duì)機(jī)器各項(xiàng)性能進(jìn)行檢驗(yàn)。

二、電泳儀

電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究不可缺少的重要手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳大類，自由界面電泳不需支持物，如等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等，這類電泳目前已很少使用。區(qū)帶電泳需用各種類型的物質(zhì)作為支持物，常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠?DG薄層等，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的是瓊脂糖凝膠電泳。應(yīng)用電泳法可以對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析，或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組份分析或單個(gè)組份提取制備。下面以DYY-12型電腦三恒多用電泳儀（北京六一儀器廠）為例先容其使用方法。

1.使用方法

（1）按電源開關(guān)，顯示屏出現(xiàn)“歡迎使用DYY-12型電腦三恒多用電泳儀…”等字樣后，同時(shí)系統(tǒng)初始化，蜂叫4聲，設(shè)置常設(shè)置。屏幕轉(zhuǎn)成參數(shù)設(shè)置狀態(tài)，見圖一：

U: 0V U＝ 100V ｜ Mode： STD I: 0mA I ＝ 50mA ｜ P: 0W P＝ 50W ｜ T: 00:00 T＝ 01:00 ｜

其中:左側(cè)大寫U: I: P: T: 為電泳時(shí)實(shí)際值；中間部分顯示程序的常設(shè)值（預(yù)置值）。Mode(模式)：STD(標(biāo)準(zhǔn))；TIME(定時(shí))；VH（伏時(shí)）；STEP（分步）

（2）設(shè)置工作程序。用鍵盤輸進(jìn)新的工作程序。例如，要求工作電壓U＝1000V，電流I限制在200mA以內(nèi)，功率W限制在100W以內(nèi)，時(shí)間T為3小時(shí)20分，并且到時(shí)間自動(dòng)關(guān)掉輸出。則操縱步驟如下：

①按“模式”鍵，將工作模式由標(biāo)準(zhǔn)（STD）轉(zhuǎn)為定時(shí)（TIME）

模式。每按一下模式鍵，其工作方式按下列順序改變： STD®TIME®VH®STEP®STD。

②先設(shè)置電壓U，按“選擇”鍵，先將其反顯，然后輸進(jìn)數(shù)字鍵即可設(shè)置該參數(shù)的數(shù)值。按數(shù)字1000,則電壓即設(shè)置完成。

③設(shè)置電流I，按“選擇”鍵，先使I反顯，然后輸進(jìn)數(shù)字200。

④設(shè)置功率P，按“選擇”鍵，先使P反顯，然后輸進(jìn)數(shù)字100。

⑤設(shè)置時(shí)間T，按“選擇”鍵，先使T反顯，然后輸進(jìn)數(shù)字320。假如輸進(jìn)錯(cuò)誤，可以按“清除”鍵，再重新輸進(jìn)。

⑥確認(rèn)各參數(shù)無誤后，按“啟動(dòng)”鍵，啟動(dòng)電泳儀輸出程序。在顯示屏狀態(tài)欄中顯示Start! 并蜂叫4聲，提醒操縱者電泳儀將輸出高電壓，留意安全。之后逐漸將輸出電壓加至設(shè)置值。同時(shí)在狀態(tài)欄中顯示“Run”，并有兩個(gè)不斷閃爍的高壓符號(hào)，表示端口已有電壓輸出。在狀態(tài)欄最下方，顯示實(shí)際的工作時(shí)間（精確到秒）。

⑦每次啟動(dòng)輸出時(shí)，儀器自動(dòng)將此時(shí)的設(shè)置數(shù)值存進(jìn)“MO”號(hào)存儲(chǔ)單元。以后需要調(diào)用時(shí)可以按“讀取”鍵，再按“0”鍵，按“確定”鍵，即可將上次設(shè)置的工作程序取出執(zhí)行。

⑧電泳結(jié)束，儀器顯示：“END”，并連續(xù)蜂叫提醒。此時(shí)按任一鍵可止叫。

2.留意事項(xiàng)

(1)U、I、P三個(gè)參數(shù)的有效輸進(jìn)范圍是：U：5～3000V；I： 4～400mA；P：4～400W.

(2)一般情況下，當(dāng)No Load！時(shí)，首先應(yīng)關(guān)機(jī)檢查電極導(dǎo)線與電泳槽之間是否有接觸不良的地方，可以用萬用表的歐姆檔逐段丈量。

(3)假如輸出端接多個(gè)電泳槽，則儀器顯示的電流數(shù)值為各槽電流之和，此時(shí)應(yīng)選擇穩(wěn)壓輸出，以減小各槽的相互影響。

(4)留意保持儀器的清潔，不要遮擋儀器后方進(jìn)風(fēng)通道。嚴(yán)禁將電泳槽放在儀器頂部，避免緩沖液灑進(jìn)儀器內(nèi)部。

(5)本儀器輸出電壓較高，使用中應(yīng)不避免接觸輸出回路及電泳槽內(nèi)部，以免發(fā)生危險(xiǎn)。

(6）長期不用儀器，應(yīng)放置在干燥透風(fēng)的清潔環(huán)境中保存。

三、分析天平

分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要儀器，充分了解儀器性能及熟練把握其使用方法，是獲得可靠分析結(jié)果的保證。分析天平的種類很多，有普通分析天平、半自動(dòng)/全自動(dòng)電光分析天平及電子分析天同等。目前實(shí)驗(yàn)室常規(guī)備用的是自動(dòng)化程度較高的電子分析天平。下面先容電子分析天平 PL203/01型和AL104/01型 (METTLER-TOLEDO)的性能及使用方法。PL203/01型精密電子天平：最大稱量210g；實(shí)際分度值0.001g；AL104/01型高分辨率電子分析天平：最大稱量110g；實(shí)際分度值0.0001g

1. 使用方法

（1）檢查并調(diào)整天平至水平位置。檢查電源電壓是否匹配（使用配置的穩(wěn)壓器），按天平儀器要求通電預(yù)熱至所需時(shí)間30min 。

（2）打開天平開關(guān)“on”，天平則自動(dòng)進(jìn)行靈敏度及零點(diǎn)調(diào)節(jié)。待顯示屏上所有字段短時(shí)點(diǎn)亮，天平回零時(shí)，可進(jìn)行正式稱量。

（3）稱量時(shí)將潔凈稱量瓶或稱量紙置于稱盤上，關(guān)上側(cè)門，天平將顯示該重量，點(diǎn)擊“®O/T¬”鍵自動(dòng)校對(duì)零，然后逐漸加進(jìn)待稱物質(zhì)，直至所需重量為止。

（4）稱量結(jié)束應(yīng)及時(shí)除往稱量瓶（紙），關(guān)上側(cè)門，切斷電源，并做好使用情況登記。

2. 留意事項(xiàng)

（1）天平應(yīng)放置在牢固平穩(wěn)水泥臺(tái)或木臺(tái)上，室內(nèi)要求清潔、干燥，同時(shí)應(yīng)避免光線直接照射到天平上。

（2）稱量時(shí)應(yīng)從側(cè)門取放物質(zhì)，讀數(shù)時(shí)應(yīng)封閉箱門以免空氣活動(dòng)引起天平擺動(dòng)。

（3）揮發(fā)性、腐蝕性、強(qiáng)酸強(qiáng)堿類物質(zhì)應(yīng)盛于帶蓋稱量瓶內(nèi)稱量，防止腐蝕天平。

（4）電子分析天平若長時(shí)間不使用，則應(yīng)定時(shí)通電預(yù)熱，每周一次，每次預(yù)熱2h，以確保儀器始終處于良好使用狀態(tài)。

四、分光光度計(jì)

不同物質(zhì)對(duì)不同波長進(jìn)射的吸收程度各不相同，從而形成各具特征的吸收光譜 。根據(jù)這一原理，應(yīng)用比色法可以對(duì)某些有色物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。但由于比色法僅限于可見光區(qū)，而且精度低，已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足高精度微量分析的要求。隨著科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，分析儀器也不斷地更新?lián)Q代，人們引進(jìn)了分光光度法的概念，分光光度計(jì)隨之應(yīng)用。分光光度計(jì)由光源、單色器、吸收池、接受器、顯示屏幕所組成，它不僅適應(yīng)于可見光區(qū)，同時(shí)還擴(kuò)展至紫外光區(qū)及紅外光區(qū)。光密度（OD）是很多溶液中的溶質(zhì)定量的指標(biāo)之一，通過所產(chǎn)生的單色光而測(cè)定某一溶液對(duì)該單色光的吸收值。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常使用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行核酸溶液定量和純度的初步判定。下面先容紫外可見光分光光度計(jì)GeneQantTM Pro（Amersham）的使用方法。該儀器除了能檢測(cè)核酸樣品濃度外，還可進(jìn)行蛋白質(zhì)濃度以及細(xì)胞培養(yǎng)液濃度的測(cè)定，能檢測(cè)低至幾微升樣品（70µl和5～7µl），樣品無需稀釋，丈量后還可全部回收。

使用方法

(1）打開電源開關(guān)（ON），等待數(shù)秒鐘，顯示屏上顯示一系列數(shù)據(jù)，如本機(jī)型號(hào)、當(dāng)前日期等，這些數(shù)據(jù)可以重新設(shè)置，當(dāng)出現(xiàn)“instrument Ready”即可進(jìn)進(jìn)下一程序。

(2）在儀器面板上有很多功能鍵，其中包括檢測(cè)base sep 、Tm、DNA、RNA、oligo、Protein595assay、Protein280 meas、cell culture等。例如，欲檢測(cè)DNA， 按DNA鍵，即進(jìn)進(jìn)DNA檢測(cè)程序。在顯示屏上：

Pathlengh 10mm

Units µg/µl

Use 320nm NO

Dilution Faotor 1

Insert reference,

以上為儀器預(yù)設(shè)置的參考數(shù)據(jù)，若按“enter”鍵，和“select”鍵可以將以上的參數(shù)進(jìn)行重新設(shè)定。

(3）取石英樣品杯70µl或5～7µl ，容量大小根據(jù)需要。先用吸管吸高純水進(jìn)樣品杯中，然后放進(jìn)儀器上的樣品槽中，放進(jìn)時(shí)留意樣品杯的光學(xué)面朝前方。

(4)按“set ref”鍵，進(jìn)行空缺測(cè)試。顯示屏上出現(xiàn)一系列數(shù)據(jù)均“0.000”并提示插進(jìn)樣品“Insert sample ”。將樣品杯取出，吸干水分，稍干燥后，同樣吸進(jìn)待測(cè)樣品，放進(jìn)樣品槽中進(jìn)行測(cè)定。

(5）一個(gè)樣品測(cè)定完畢，按“stop”鍵，返回“Instrument Ready”。

(6）取出樣品杯，吸出樣品，然后用高純水洗幾次，自然晾干。由于樣品杯十分昂貴，使用時(shí)要小心操縱。不能用手指拿樣品杯的光學(xué)面，用后要及時(shí)洗滌，可用溫水或稀鹽酸，乙醇以至鉻酸洗液（濃酸中浸泡不要超過15分鐘），表面只能用柔軟的絨布或拭鏡頭紙擦凈。

五、數(shù)字式酸度計(jì)

酸度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室配置溶液必備的儀器。本實(shí)驗(yàn)室的酸度計(jì)為臺(tái)式微電腦酸堿度計(jì)和溫度計(jì)（Hanna）,丈量pH范圍為0.00～14.00pH；溫度為0.0～100.0℃；

1. 使用方法

（1）將pH電極和溫度探頭與主機(jī)連接，主機(jī)與電源連接。

（2）取出電極保護(hù)套，假如有結(jié)晶鹽出現(xiàn)，這是電極常見現(xiàn)象，浸進(jìn)水后就會(huì)消逝。假如薄膜玻璃或透析膜發(fā)干，可在HI170300電極保存液中浸泡1小時(shí)。

（3）pH校準(zhǔn)。將pH電極和溫度探棒浸泡在所選的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液內(nèi)4cm（建議用pH6.86、7.01），緩沖液值可通過“D℃”或“Ñ℃”鍵來調(diào)節(jié)。按“CAL”鍵，儀器將顯示“CAL”和“BUF”符號(hào)及“7.01”數(shù)據(jù)。當(dāng)讀數(shù)不穩(wěn)定時(shí)，屏幕會(huì)顯示“NOTREADY”；當(dāng)讀數(shù)穩(wěn)定時(shí)，屏幕會(huì)顯示“READY”和“CFM”，按“CFM”鍵確認(rèn)校準(zhǔn)值。確認(rèn)第一校準(zhǔn)點(diǎn)后，將pH電極與溫度探棒浸泡在標(biāo)準(zhǔn)緩沖液內(nèi)4cm（建議用pH4.01、9.18、10.01）；再按“CAL”鍵，儀器將顯示“CAL”和“BUF”符號(hào)及“4.01”數(shù)據(jù)。按“CFM”鍵確認(rèn)校正值。

（4）pH丈量。校準(zhǔn)完畢后，儀器自動(dòng)進(jìn)進(jìn)pH丈量狀態(tài)，將電極與溫度探棒浸泡在待測(cè)溶液約4cm，停幾分鐘讓電極讀數(shù)穩(wěn)定。

2. 留意事項(xiàng)

（1）由于pH211酸度計(jì)內(nèi)裝有可充電電池，在剛購買或長時(shí)間放置后，再使用時(shí)，通電校正丈量完畢后，可將電源繼續(xù)還插進(jìn)電源插座，只需封閉開關(guān)，這樣可以保證電池充電，是校正值得以儲(chǔ)存，下次丈量時(shí)無須校正即可進(jìn)進(jìn)精確丈量。

（2）不可用蒸餾水、往離子水和純水浸泡電極。假如讀數(shù)偏差太大（±1pH），則是由于沒有校正或電極變干。為避免電極受損，在關(guān)機(jī)前要將pH電極從溶液中拿出。當(dāng)處于關(guān)機(jī)狀態(tài)時(shí)，在電極浸進(jìn)電極保存液前，電極要與機(jī)器分開。

（3）如儀器已測(cè)過幾種不同的樣品溶液，請(qǐng)用自來水清洗，或在插進(jìn)樣品溶液前，用待測(cè)樣品清洗電極。

（4）溫度會(huì)影響pH的讀數(shù)，為丈量正確的pH值，溫度要在適合的范圍內(nèi)進(jìn)行自動(dòng)溫度補(bǔ)償，用HI7669/2W溫度探棒浸進(jìn)樣品中，緊靠電極并停幾分鐘，假如被測(cè)溶液的溫度已知或丈量是在相同溫度下進(jìn)行，只需動(dòng)手補(bǔ)償，那么此時(shí)溫度探棒是不用連接，屏幕上會(huì)顯示溫度讀數(shù)伴有℃信號(hào)閃爍。溫度可通過“Ñ℃”或“D℃”來調(diào)節(jié)。

六、PCR儀

PCR儀，也稱DNA熱循環(huán)儀、基因擴(kuò)增儀，它是使一對(duì)寡核苷酸引物結(jié)合到正負(fù)DNA鏈上的靶序列兩側(cè)，從而酶促合成拷貝數(shù)為百萬倍的靶序列DNA片斷，它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進(jìn)行DNA變性、引物復(fù)性、DNA聚合酶催化的延伸反應(yīng)的三個(gè)過程。

PCR儀主要應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究等很多領(lǐng)域，如基因分析、序列分析、進(jìn)化分析、臨床診斷、法醫(yī)學(xué)等等。隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，PCR擴(kuò)增技術(shù)也得到普及推廣應(yīng)用，因此了解PCR儀的性能，熟練把握儀器的正確使用方法及使用過程中的留意事項(xiàng)，將是十分必要的。

現(xiàn)先容PCR 擴(kuò)增儀（Tl Thermocycler）的使用方法和留意事項(xiàng)。

1. 使用方法

(1）接通電源開關(guān)，儀器進(jìn)進(jìn)預(yù)備狀態(tài)；在顯示屏上記錄了當(dāng)前儀器的溫度和蓋子（Lid）的溫度。若儀器正在運(yùn)行時(shí)，須按“ B ”鍵（start/stop），才能退出運(yùn)行并返回預(yù)備狀態(tài)。

(2）編寫程序段。在預(yù)備狀態(tài)下按“ C ”鍵(programs)進(jìn)進(jìn)編程狀態(tài)，選定一程序號(hào)，然后按“enter”鍵，進(jìn)進(jìn)下一程序；按 “A”(list)鍵后，選一文件號(hào)（empty program）；再按“enter”鍵，進(jìn)進(jìn)下一程序；按“ABC”鍵，進(jìn)進(jìn)下一程序，用上下左右鍵號(hào)選擇一個(gè)字母（A、B、C、D、…），然后按“enter”鍵，進(jìn)進(jìn)下一程序；按“name ok”鍵，完成文件命名。

(3）設(shè)定蓋子的溫度。“lid temp： ℃”，蓋子的溫度一般比變性溫度要高10℃，例如變性溫度是95℃，那么蓋子的溫度就要設(shè)定為105℃。待蓋子預(yù)熱后按“enter”鍵，進(jìn)進(jìn)下一程序。